| 研究課題/領域番号 |
21H04817
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
中区分52:内科学一般およびその関連分野
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
茶山 一彰 広島大学, 医系科学研究科(医), 共同研究講座教授 (00211376)
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| 研究分担者 |
茶山 弘美 広島大学, 医系科学研究科(医), 准教授 (70572329)
三木 大樹 広島大学, 医系科学研究科(医), 講師 (10584592)
Hayes C.Nelson 広島大学, 医系科学研究科(医), 准教授 (50572327)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-05 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
42,510千円 (直接経費: 32,700千円、間接経費: 9,810千円)
2023年度: 12,220千円 (直接経費: 9,400千円、間接経費: 2,820千円)
2022年度: 12,220千円 (直接経費: 9,400千円、間接経費: 2,820千円)
2021年度: 18,070千円 (直接経費: 13,900千円、間接経費: 4,170千円)
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| キーワード | NASH / ヒト肝細胞キメラマウス / 肥満 / 脂肪肝 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
非アルコール性脂肪性肝炎(Non Alcoholic Steato-Hepatitis; NASH)は肝細胞の脂肪化と炎症により繊維化が進展する。申請者はヒト肝細胞を移植したuPA/scidマウスに肝炎ウイルスを感染させるモデルを構築した (Tsuge, Hepatology 2005, Sainz, Nature Medicine 2012)。これにhigh fat dietを投与するとヒト肝細胞への脂肪沈着が認められ、進展に伴いヒトALTの上昇も認められた。この動物モデルを使用し、同一ドナーに由来する肝細胞の脂肪化した肝細胞としていない肝細胞のmulti-omix解析による解析を行う。
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| 研究実績の概要 |
ヒト肝細胞における脂肪化のメカニズムを解明するために、ヒト肝細胞キメラマウスに高脂肪、高カロリー食を投与あるいは普通食の投与、ヒト成長ホルモンを投与するあるいはしないの4群のマウスを作製し、腹部超音波検査により脂肪肝の形成を観察した。ヒト成長ホルモンを投与し、普通食を投与したマウスでは、脂肪化はほとんど認められなかった。ヒト成長ホルモンを投与せず、高脂肪食を投与したマウスでは顕著な脂肪化が認められ、繊維染色を行ったところpericellular fibrosisが認められた。しかし、膠原繊維の沈着は少なく、炎症細胞の浸潤も軽度であった。RNA sequence解析では、それぞれの群に特徴的な遺伝子発現のプロフィールが認められた。蛋白の発現解析でもやはり各群で特徴的な蛋白の発現が認められた。リピドーム解析やメタボローム解析も行ったが、やはり各群で特徴的なプロフィールが認められた。これらの結果から、脂肪化を促進する因子、抑制する因子を抽出するような解析を行っている。これらのデータの統合を試みているが、異なるプラットフォームのデータの統合がなかなかうまくいかず、様々な解析方法を用いて統合を試みている。最終的には高度の脂肪化に特徴的なRNA発現データ、蛋白発現データ、メタボロームデータをデータベース化し、web上の公開サイトに公表する予定である。現在最終的な統合解析を行っており、論文発表に向けて最後の実験を実施、投稿用の原稿の作成を行っているところである。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マウスを使用した各群3頭の実験は実施することができ、proteome解析、RNA sequence解析、metabolome解析は実施し実施計画の実行は順調に進んでいる。
またこれらを統合する解析はmixed multi-ome解析が必要である。時間を要する作業であるが、比較的順調に解析は進んでいる。
データの統合が複雑で、時間を要することが予測されるが、令和5年度中には完成させて投稿したいと考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
ヒト肝細胞キメラマウスに高脂肪、高カロリー食を投与あるいは普通食の投与、ヒト成長ホルモンを投与するあるいはしないの4群のマウスを作製し、腹部超音波検査により脂肪肝の形成を観察した。ヒト成長ホルモンを投与し、普通食を投与したマウスでは、脂肪化はほとんど認められなかった。ヒト成長ホルモンを投与せず、高脂肪食を投与したマウスでは顕著な脂肪化が認められ、繊維染色を行ったところpericellular fibrosisが認められた。しかし、膠原繊維の沈着は少なく、炎症細胞の浸潤も軽度であった。RNA sequence解析では、それぞれの群に特徴的な遺伝子発現のプロフィールが認められた。蛋白の発現解析でもやはり各群で特徴的な蛋白の発現が認められた。リピドーム解析やメタボローム解析も同様で、やはり各群で特徴的なプロフィールが認められた。これらの結果から、脂肪化を促進する因子、抑制する因子を抽出するような解析を行っている。これらのデータの統合を試みているが、異なるプラットフォームのデータの統合がなかなかうまくいかず、様々な解析方法を用いて統合を試みている。最終的には高度の脂肪化に特徴的なRNA発現データ、蛋白発現データ、メタボロームデータをデータベース化し、web上の公開サイトに公表する予定である。現在最終的な統合解析を行っており、論文発表に向けて最後の実験を実施、投稿用の原稿の作成を行っている。令和5年度中には最初の投稿を行いたいと考えている。
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