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3次元蛍光寿命イメージングフローサイトメーターの開発とがん細胞群の薬剤応答解析

研究課題

研究課題/領域番号 21J10600
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
審査区分 小区分30020:光工学および光量子科学関連
研究機関東京大学

研究代表者

菅野 寛志  東京大学, 理学系研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2021-04-28 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2022年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2021年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
キーワード蛍光寿命 / イメージング / イメージングフローサイトメトリー / 高速イメージング / がん細胞 / 蛍光 / COVID-19
研究開始時の研究の概要

蛍光イメージングは生命科学研究において幅広く利用されているが、撮像速度と定量性の観点から応用範囲が限られている。本研究では、蛍光強度に比べて定量性が高いとされている蛍光寿命(蛍光が減衰するのにかかる時間)を用いた高速イメージング技術を開発する。また開発したイメージング装置の高速性を活かし、大量の細胞(がん細胞など)を一個ずつ高速に撮像し、得られた画像群を機械学習により解析することで、新たな科学的知見を得ることを目指す。

研究実績の概要

前年度に完成させたハイスループットな2次元蛍光寿命イメージングフローサイトメーターの実証実験を行った。その結果、これまで実現不可能であった蛍光寿命画像による大規模な単一細胞解析が可能になり、細胞内部に存在する蛍光分子の微小環境を統計的に解析できることを示した。具体的には、蛍光ビーズや蛍光染色した生細胞群を、2 m/s以上の高速でマイクロチャネル内に流し込み、異なる周波数で強度変調させた励起ビーム列を照射することで、高速(10,000イベント/秒以上)かつ高空間分解能(0.8マイクロメートル)の蛍光寿命画像の取得を実験的に実証した。実験では、複数種類の蛍光ビーズを混合して撮像し、それぞれの蛍光寿命値によって、蛍光ビーズが正しく分離できることを確かめた。また、細胞核を染色したユーグレナ細胞を撮像し、細胞核から生じる蛍光の蛍光寿命値と、葉緑素から生じる自家蛍光の蛍光寿命値が異なることを確かめた。さらに、開発した蛍光寿命イメージングフローサイトメーターのバイオメディカル分野における有用性を示すため、薬剤投与によって引き起こされるがん細胞群の細胞内構造変化を解析し、従来の蛍光強度によるイメージングフローサイトメトリーでは取得困難な結果を得ることができた。本技術は、がん患者の血液検査、病理診断等に応用することで、抗がん剤治療の効果やがん細胞群の抵抗性を評価するためのフレームワークを提供することができると期待される。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて 2022 2021 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件) 備考 (1件)

  • [国際共同研究] バージニア大学工学部(米国)

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [雑誌論文] 単一細胞レベルの大規模画像プロファイリングによるCOVID-19患者血液中の循環血小板凝集塊の解析2022

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Kanno、Zhou Yuqi、Masako Nishikawa et al.
    • 雑誌名

      化学とマイクロ・ナノシステム学会誌

      巻: 21 ページ: 1-1

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際共著
  • [雑誌論文] Massive image-based single-cell profiling reveals high levels of circulating platelet aggregates in patients with COVID-192021

    • 著者名/発表者名
      Nishikawa Masako、Kanno Hiroshi、Zhou Yuqi et al.
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 12 号: 1 ページ: 7135-7135

    • DOI

      10.1038/s41467-021-27378-2

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] COVID-19の診断・治療のためのタイムストレッチ・イメージング2021

    • 著者名/発表者名
      周 雨奇、菅野 寛志、肖 廷輝、シャクマトフ 理人、伊林 侑真、西川 真子、矢冨 裕、合田 圭介
    • 雑誌名

      レーザー研究

      巻: 49 ページ: 228-233

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 情報通信技術を用いた超高速蛍光寿命顕微鏡による細胞イメージング2021

    • 著者名/発表者名
      菅野 寛志、三上 秀治、平松 光太郎、合田 圭介
    • 学会等名
      量子生命科学会第3回大会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] High speed FLIM, high-throughput FLIM flow cytometry, and beyond2021

    • 著者名/発表者名
      Kanno Hiroshi、Mikami Hideharu、Hiramatsu Kotaro、Goda Keisuke
    • 学会等名
      Pacifichem 2021
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 国際学会
  • [備考] 血小板で新型コロナの重症化リスクを予測

    • URL

      https://www.s.u-tokyo.ac.jp/ja/press/2021/7612/

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書

URL: 

公開日: 2021-05-27   更新日: 2024-03-26  

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