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高エネルギー変換効率を可能とするべん毛モーター回転軸と軸受の構造と機能の解明

研究課題

研究課題/領域番号 21J12128
研究種目

特別研究員奨励費

配分区分補助金
応募区分国内
審査区分 小区分43040:生物物理学関連
研究機関東京工業大学 (2022)
大阪大学 (2021)

研究代表者

山口 智子  東京工業大学, 地球生命研究所, 特別研究員(PD)

研究期間 (年度) 2021-04-28 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2022年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2021年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
キーワードべん毛モーター / クライオ電子顕微鏡 / 軸受け / 軸 / 自己集合 / 立体構造解析 / タンパク質 / LPリング / 構造解析 / サルモネラ / ロッド
研究開始時の研究の概要

多くのバクテリアはべん毛を用いて遊泳する。べん毛は、基部体(モーター)、フック(ユニバーサルジョイント)、繊維(スクリュー)の3つの部分から構成され、よく制御された自己構築機構を持ち、細胞内外の電気化学ポンテンシャル差による陽イオンの流れをほぼ100%の効率で回転エネルギーに変換できる。べん毛モーターの自律的構築機構と高いエネルギー伝達効率を可能にする回転メカニズムを解明するため、回転時のエネルギー散逸の最小化に大きく寄与していると推測されるモーター軸受部位に着目し、軸と軸受の相互作用を原子レベルで解明する。

研究実績の概要

回転型モーターには、回転子や固定子の他に、トルクを外部に出力するための回転軸と、軸を支える軸受けが存在します。細菌の運動を駆動するべん毛モーターも上記と同様の構造を持ち、細胞内外のプロトン勾配による電気化学ポテンシャルエネルギーをほぼ100%の効率でトルクに変換し、F1レーシングカーのエンジンに匹敵するほどの高速で回転する非常に効率の良いモーターとして知られています。べん毛モーターにおいて軸受け構造であるLPリングは、軸であるロッドを取り囲むようにリング状に存在しています。これら二つはべん毛モーターが機能する際には独立して存在しており、LPリングがどのようにロッドの周りに適切に配置・形成されるのかはわかっていませんでした。本研究では、べん毛モータ形成の中間状態を模擬したポリロッド-Pリング(通常より長く重合したロッドの周りにPリングのみが直接結合した)複合体の立体構造をクライオ電子顕微鏡による単粒子像解析を用いて解析することで、LPリングがロッド周りに自己形成される過程を詳細に調べました。Pリングのロッドに対する傾きを確認した結果、ポリロッド- Pリング状態におけるPリングはロッド-LPリングにおけるPリングより約3°傾いてロッドに結合しており、Pリングがロッドに結合する際はPリングを構成するタンパク質であるFlgIとロッドの一部を構成するFlgGのフレキシブルな領域が足場となることでロッド周りのPリング形成を支えていることが示唆される結果となりました。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

報告書

(2件)
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2023 2022 2021 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 2件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件) 備考 (3件)

  • [国際共同研究] Charles University/BIOCEV(チェコ)

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [雑誌論文] Purification and CryoEM Image Analysis of the Bacterial Flagellar Filament2023

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi T, Miyata T, Makino F, Namba K.
    • 雑誌名

      Methods in molecular biology

      巻: 2646 ページ: 43-53

    • DOI

      10.1007/978-1-0716-3060-0_5

    • ISBN
      9781071630594, 9781071630600
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Structures of multisubunit membrane complexes with the CRYO ARM 2002022

    • 著者名/発表者名
      Gerle Christoph、Kishikawa Jun-ichi、Yamaguchi Tomoko、Nakanishi Atsuko、?oruh Orkun、Makino Fumiaki、Miyata Tomoko、Kawamoto Akihiro、Yokoyama Ken、Namba Keiichi、Kurisu Genji、Kato Takayuki
    • 雑誌名

      Microscopy

      巻: 71 号: 5 ページ: 249-261

    • DOI

      10.1093/jmicro/dfac037

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Structure of the molecular bushing of the bacterial flagellar motor2021

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi Tomoko、Makino Fumiaki、Miyata Tomoko、Minamino Tohru、Kato Takayuki、Namba Keiichi
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 12 号: 1 ページ: 4469-4469

    • DOI

      10.1038/s41467-021-24715-3

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] LPリング中のロッドの回転シミュレーション2023

    • 著者名/発表者名
      北尾彰朗
    • 学会等名
      べん毛研究交流会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 構造から紐解くバクテリアべん毛モーターの軸-軸受相互作用2021

    • 著者名/発表者名
      山口智子, 牧野文信, 宮田知子, 南野徹, 加藤貴之, 難波啓一
    • 学会等名
      第67回日本生化学会近畿支部例会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 滑らかに回転するバクテリアべん毛モーターの軸-軸受け相互作用を立体構造から紐解く2021

    • 著者名/発表者名
      山口智子, 牧野文信, 宮田知子, 南野徹, 加藤貴之, 難波啓一
    • 学会等名
      第59回日本生物物理学会年会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] べん毛モーターの軸受けはどのようにして軸周りに構築されるのか?2021

    • 著者名/発表者名
      山口智子, 牧野文信, 宮田知子, 南野徹, 加藤貴之, 難波啓一
    • 学会等名
      2021年度べん毛研究交流会
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 細菌の生体分子モーターは静電相互作用で滑らかに回る2021

    • 著者名/発表者名
      山口智子, 牧野文信, 宮田知子, 南野徹, 加藤貴之, 難波啓一
    • 学会等名
      第61回日本生物物理学会若手の会夏の学校
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [備考] Charles University faculty of science

    • URL

      https://www.natur.cuni.cz/eng

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [備考] BIOCEV

    • URL

      https://www.biocev.eu/en

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [備考] 細菌の回転モーターは静電相互作用で滑らかに回る

    • URL

      https://www.fbs.osaka-u.ac.jp/ja/research_results/papers/detail/1028

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書

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公開日: 2021-05-27   更新日: 2024-03-26  

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