| 研究課題/領域番号 |
21K02118
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分08030:家政学および生活科学関連
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| 研究機関 | 京都女子大学 |
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研究代表者 |
門間 敬子 京都女子大学, 家政学部, 教授 (70397561)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 食物アレルギー / GRP / モノクローナル抗体 / 重症果物・野菜アレルゲン / モモ重症アレルゲン / CRD / 果物重症アレルゲン / タンパク質安定性 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
食物アレルギーは「アレルギー食品」ではなくアレルギーの原因となる「アレルゲン分子」を考えることが重要である。本研究ではモモ重症アレルゲンであるGibberellin-regulated protein (GRP)について果物・野菜および調理加工した食品中のGRP含量測定、安定性評価を特異的なモノクローナル抗体を用いて行い、GRPがアレルゲンとなる要因を究明する。何をどのくらいどのように食べて良いのかを明らかにすることで、アレルギー患者のQOLの向上に寄与することが期待できる。
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| 研究実績の概要 |
モモ重症アレルゲンであるGibberellin-regulated protein (GRP) は果物・野菜間で保存性が高く、モモ以外の果物・野菜においてもGRPを原因物質としたアレルギーが報告されている。さらにヒノキ科花粉にもGRPが存在することが報告されアレルギーとの関係が重要視されている。
我々がすでに取得している抗モモGRPモノクローナル抗体の交差反応性を利用して、様々な果物、野菜、また花粉からGRPを純化した。これらのGRPは、果物・野菜アレルギー患者血清との反応性の解析に用いることで、アレルギーの責任抗原を特定することに役立てられる。また、２種類のモノクローナル抗体を用いたサンドイッチELISAにより、果物・野菜中のGRP含有量を測定した。GRPの抽出には塩濃度が大きく影響した。モモおよびウメ果肉にはGRPが非常に多く、またサクランボ、トマト、ブドウなどにも多くのGRPが含まれていた。精製したGRPは熱安定性が高く、CD測定によるTm値は90℃以上であり、加熱冷却後も加熱前と同様のスペクトルを示した。加糖・加熱したウメジャムでも多くのGRPが検出されたが、ジャガイモやニンジンでは加熱により検出量が減少した。
RT-qPCRによりモモ、ウメ、リンゴ、ナシのGRP発現の季節依存性を測定したところ、成熟するに従って増加する傾向が見られた。
スギ花粉は抗モモGRP抗体によるサンドイッチELISAではGRPが検出されなかったため、スギ花粉よりGRPを精製し、これを抗原として新たにモノクローナル抗体を作成した。これを用いてサンドイッチELISA系を構築し、スギ花粉およびヒノキ花粉中のGRP量を測定した。さらにモモおよびウメ花粉でもGRPを検出した。
これらの結果は、GRPアレルギーの診断、予防、対応に寄与することが期待できる。
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