研究課題/領域番号 |
21K04784
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分27040:バイオ機能応用およびバイオプロセス工学関連
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研究機関 | 筑波大学 |
研究代表者 |
前田 義昌 筑波大学, 生命環境系, 准教授 (30711155)
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研究分担者 |
田中 剛 東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (20345333)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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キーワード | 微細藻類 / オメガ3脂肪酸 / 人工染色体 / 自律複製配列 / 代謝改変 |
研究開始時の研究の概要 |
本研究では、単細胞光合成生物である微細藻類をホスト生物として用い、EPAやDHAなどのオメガ3脂肪酸を効率的に、持続可能性の高い方法で生産することを大目的とする。そのために、微細藻類のオメガ3脂肪酸合成経路を大規模に改変するための遺伝子組み換えツールである人工染色体を構築する。人工染色体の構築に必要なDNA配列は、ホスト生物となる微細藻類の染色体構造の解析により特定する。
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研究実績の概要 |
本研究では、微細藻類の多数の遺伝子を一括導入し、大規模な代謝改変を可能とする人工染色体を開発する。人工染色体を用いて、養殖魚の成育に必須な飼料添加物であるオメガ3脂肪酸の生合成に関与する遺伝子を微細藻類に導入し、得られた改変微細藻類により効率的にオメガ3脂肪酸を生産するプロセスを開発することを目的とする。2022年度は、推定した微細藻類セントロメア配列の内の15種類の配列、もしくは酵母由来セントロメア/自律複製配列を含む接合伝達ベクターを、同種の微細藻類に導入した。その結果、特定の推定セントロメア配列で形質転換効率が向上することを確認した。また、導入ベクターに特異的な配列を標的とするプライマーを用いたPCRにより、微細藻類の推定セントロメアを含むベクターの方が、酵母由来セントロメア/自律複製配列を含むベクターよりも、微細藻類細胞内での安定的が高い傾向にあることを確認した。さらに、同ベクターが同属異種の微細藻類においても機能することを確認した。これらのことから、2021年度に推定した微細藻類セントロメア配列の機能を、より詳細に解明することができたと考える。また、接合伝達ベクターにオメガ3脂肪酸の生合成に関与する遺伝子を搭載し、微細藻類に導入したところ、野生株が生産することができないオメガ3脂肪酸の生合成を新たに確認した。これにより、本研究で開発しているベクターが、オメガ3脂肪酸の生合成経路拡大に利用可能であることを実証できた。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
推定したセントロメア配列の機能をより詳細に解明し、人工染色体に必要なDNA配列の要件に関する洞察を得ることができた。また、オメガ3脂肪酸の生合成代謝の拡大にも成功した。これらのことから、本研究はおおむね順調に進展していると判断した。
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今後の研究の推進方策 |
引き続き、人工染色体に必要なDNA配列の特定作業を進める。また、オメガ3脂肪酸の生合成代謝の更なる拡大について検討する。
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