研究課題/領域番号 |
21K05300
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分37020:生物分子化学関連
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研究機関 | 藤田医科大学 |
研究代表者 |
大島 信子 藤田医科大学, 国際再生医療センター, 講師 (60387694)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2024年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2023年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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キーワード | ファージディスプレイ / 交差反応性 / 抗体軽鎖 / 交差反応 |
研究開始時の研究の概要 |
重鎖と軽鎖の2本鎖で構成されている抗体による抗原の認識は主として重鎖が担っており、軽鎖は抗原への親和性と抗原抗体反応時の安定性に関与していると考えられている。しかし、軽鎖配列への変異導入または配列そのものの交換などによる抗体改変では、抗原への親和性向上、エピトープ部位や結合活性の変化、さらには認識抗原の変化が報告されている。 本研究では、ファージディスプレイ技術により作製されたヒト抗体ライブラリーから単離された抗体群を基に,抗インフルエンザウイルス抗体の変異ウイルス株に対する交差反応性の変化を指標として抗体軽鎖配列の抗原認識における役割を評価し、抗体改変における軽鎖の可能性を検討する。
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研究実績の概要 |
ファージディスプレイ技術により作製したヒトファージ抗体ライブラリーでは、1種類の重鎖配列に対し様々な種類の軽鎖配列との組み合わせを持たせることが可能である。当該研究では、ファージディスプレイ技術を基に作製したファージ抗体ライブラリーから取得した抗インフルエンザウイルス抗体群から、1種類の抗体重鎖配列に対し複数の軽鎖配列の組み合わせを持つ抗体群の抽出を行い、軽鎖配列の違いによりインフルエンザウイルス株への交差反応性にどのような影響を及ぼすかを検討することにより、抗原認識における軽鎖配列の役割を明らかにすることが目的である。昨年度に引き続き当該年度も、解析対象となる5000個以上の抗インフルエンザウイルス抗体クローンの軽鎖配列の解析を行った。今年度で、解析が必要であると判断した抗体クローンすべての軽鎖の塩基配列解析を終了した。その塩基配列をもとに抗体の分類を行っており、さらにそれらの由来となるGermline GeneをNCBIのIgBlastで検索し、順次決定した。さらにそのGermlineとのアミノ酸配列との比較もIgBlastで行い、変異の導入率を算出した。 また、塩基配列解析および分類の終了したクローンの中から、中和抗体のターゲットであり、ウイルス膜タンパクであるヘマグルチニン (HA)を認識する可能性のある抗体候補を、ウイルス核タンパクに対し結合活性のある抗体を除去することで選抜した。そのクローンに対し、複数のインフルエンザウイルス株に対し交差反応性を示す抗体クローンの有無を検討している。 当該年度においてはファージ抗体ライブラリーからスクリーニングされた抗体群、特にインフルエンザウイルス中和抗体群の重鎖-軽鎖配列の組み合わせの詳細が判明しつつあるとともに、交差反応性解析へ適用できる抗体クローンの選出も進みつつある。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
昨年度はやや遅れていたものの、当該年度でその遅れを取り戻し、ほぼ、当初の計画通りの進捗状況となった。
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今後の研究の推進方策 |
これまでのところ、研究計画にそって困難なこともなく順調に進んでいる。今後も、当初の研究計画通りムーズに進むと考えており、今後実施する交差反応性実験においても、リコンビナントHAの準備が整い次第開始可能であると考えている。
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