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Spatiotemporal mapping of gene expression to reveal mechanisms of cellular differentiation in E. coli biofilms

研究課題

研究課題/領域番号 21K05341
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分38020:応用微生物学関連
研究機関京都大学

研究代表者

Robert Martin  京都大学, 薬学研究科, 特定准教授 (90365487)

研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2023年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワードbiofilm / E. coli / gene expression / imaging / differentation / bacterial growth / proteomics / stress resistance / proteome analysis / cell motility / acid fermentation / imaging system / proteome / surface properties / nutrients / differentiation / Escherichia coli
研究開始時の研究の概要

Bacteria can form biofilms having unique and emergent biological properties. To explore these properties we will quantify gene expression and metabolic activity in E. coli biofilms using time-lapse fluorescence imaging of gene expression, and spatio-temporal mapping of the cellular proteome.

研究成果の概要

このプロジェクトは、大腸菌バイオフィルムの機能分化を、形態と遺伝子発現をモニターすることによって調べるものであった。我々は、グルコースがバイオフィルムに対して、代謝や酸ストレスに起因する機能的差異だけでなく、構造的差異を生じさせることを発見した。時空間的な遺伝子発現は、蛍光レポーターとプロテオーム解析の両方で観察され、形態学的な違いは、表面硬度の変化と局所的な栄養状態の変化から生じていた。加えて、運動性、マトリックス産生、タンパク質合成に関連する遺伝子発現とタンパク質レベルの変化も観察された。予定通り、バイオフィルムの時空間的差異から、細胞集団の共存と相互作用を示唆する新たな証拠を得た。

研究成果の学術的意義や社会的意義

この結果はバイオフィルムの成長と発達に対するグルコースの重要な影響を浮き彫りにした。 また、環境条件や薬剤などに対する耐性を試験するために使用できる単純な生物学的モデルにおける、多細胞の増殖と分化に関する基本的な洞察を提供する。バイオフィルムの生存と形成に重要な耐酸性、マトリックス産生、運動性遺伝子に関連した明らかな変化は、バイオフィルムの形成を制御するための新たなターゲットとなる可能性を示唆している。加えて、我々は関連分野の他の研究者にも有用な、オープンソースタイプの汎用的で安価なマルチモードイメージングシステムを開発した。

報告書

(4件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2023 2022 2021 その他

すべて 学会発表 (12件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件) 備考 (1件)

  • [学会発表] Exploring culture conditions and fractionation methods for spatio-temporal analysis of E. coli biofilms.2023

    • 著者名/発表者名
      Fujino. Y and Robert, M.
    • 学会等名
      The 46th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Investigating the role of YccA on E. coli biofilm growth and development.2023

    • 著者名/発表者名
      Zhao, Y and Robert, M.
    • 学会等名
      The 46th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Development of imaging system to track biofilm morphology and temporal gene expression in growing biofilms.2023

    • 著者名/発表者名
      Sakai. R, Zhao, Y, and Robert, M.
    • 学会等名
      The 46th Annual Meeting of the Molecular Biology Society of Japan
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Biofilming beyond B. subtilis2023

    • 著者名/発表者名
      Robert, M.
    • 学会等名
      BACELL 2023
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] E. coli biofilms as a developmental model2023

    • 著者名/発表者名
      Robert M.
    • 学会等名
      第19回 21世紀大腸菌研究会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Effects of glucose on the growth of E. coli biofilms in rich medium2023

    • 著者名/発表者名
      干場 悠介, 藤野 祐紀子, Zhao Yifan, 酒井 隆之介, Robert M.
    • 学会等名
      第19回 21世紀大腸菌研究会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Investigating the role of YccA on E. coli biofilm growth and development2023

    • 著者名/発表者名
      Zhao Yifan, Sakai R., Fujino Y., Hoshiba Y., Robert M.
    • 学会等名
      第19回 21世紀大腸菌研究会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 明視野および蛍光モードでバイオフィルムの動態を捉える タイムラプスイメージングシステムの開発2023

    • 著者名/発表者名
      酒井 隆之介, Zhao Yifan, Robert M
    • 学会等名
      第19回 21世紀大腸菌研究会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Exploring patterns of growth and differentiation during E. coli biofilm formation.2023

    • 著者名/発表者名
      Robert M.
    • 学会等名
      日本農芸化学会関西支部 第525回講演会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Exploring transitions in metabolic state during the development of bacterial biofilms.2023

    • 著者名/発表者名
      Fujino Y. Sakai, R. and Robert M.
    • 学会等名
      RIKEN BDR Symposium 2023 “Transitions in Biological Systems”. Kobe
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Opening and closing the box of bacterial metabolic function: from enzyme discovery to adaptive evolution and biofilms using E. coli.2022

    • 著者名/発表者名
      Robert M.
    • 学会等名
      Annual Meeting of Japan Society for Environmental Biotechnology. Tokyo
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Exploring developmental processes in growing E. coli biofilms2021

    • 著者名/発表者名
      Yukiko Fujino
    • 学会等名
      ゲノム微生物学会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [備考] Biofilm spatio-temporal gene expression mapping

    • URL

      https://sites.google.com/kyoto-u.ac.jp/msb/research/biofilm-spatiotemporal-mapping-project

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書

URL: 

公開日: 2021-04-28   更新日: 2025-01-30  

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