| 研究課題/領域番号 |
21K05902
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分42010:動物生産科学関連
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| 研究機関 | 岩手大学 |
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研究代表者 |
平田 統一 岩手大学, 農学部, 准教授 (20241490)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | アルギニン / 経口給与 / 定時人工授精 / 肉用牛 / 繁殖生 / 受胎率 / 卵胞発育 / 卵子成熟 / 黒毛和種牛 / 経腟採卵OPU / 体外胚生産IVP / OPUドナー / 牛 / 定時胚移植 / 経腟採卵 / 体外受精 / 体外牛胚培養 / ウシ / 妊孕性向上 / 栄養 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
アルギニン(Arg) を経口投与する、またはしない卵子ドナー牛から採卵し、Arg影響下にあったウシ胚（Arg胚）となかったウシ胚（Cont胚）を準備する。一方、定時排卵処置中にArg製剤を給与した（Arg牛群）、あるいは給与しない受胚牛（Cont牛群）を準備する。すなわち、Arg胚とCont胚、Arg牛群とCont牛群の組合せで４区設定し、Day8前後に胚移植を実施する。子宮内膜厚、子宮動脈血流量、卵胞や黄体の数、大きさを観察する。また頸静脈から採血し、生化学検査および各種アミノ酸、E2、P4濃度を測定する。もってArgが卵子発育能、あるいは、子宮環境の改善のどちらを介して作用するか検討する。
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| 研究実績の概要 |
アルギニン（Arg）製剤の経口給与が、排卵卵胞の十分な成熟を制限することを意図した定時人工授精（tAI）プログラムにおいて、卵胞の成熟度合いや受胎率に及ぼす影響を検討した。
供試牛は黒毛和種未経産および経産牛で、試験期間中は自家産ロールサイレージを飽食給与し、配合飼料2 kg/日・頭を給与した。給与群には、tAIをDay 0としてDay -10からDay -1までの10日間、ルーメンバイパス性を施したArg製剤を100ｇ/日・頭（有効Arg量として41 g/日・頭）給与した。対照群には給与しなかった。Day -7にPGF2α製剤を頚部筋肉内投与し、腟挿入プロゲステロン（P4）・エストラジオール（E2）安息香酸エステル配合剤を5日間短期装着した。Day-2に抜去し、Day -1にGnRH合成剤を頸部筋肉内投与した。発情の有無にかかわらずDay 0の9:00頃にtAIを行った。超音波装置を用い卵胞や黄体の数、大きさを記録し、血漿中P4とE2濃度を測定した。
tAI後の受胎率は、対照群が55.6％（5/9頭）、給与群が33.3％（4/12頭）であり、両群間に有意な差はみられなかった。対照群と給与群における最大卵胞径および血漿中P4濃度は、Day -7、-2、-1のいずれにおいても有意な差はみられなかった。血漿中E2濃度の平均値±標準偏差は、Day -7が7.18±2.86と7.47±1.09 pg/ml、Day -2は6.68±1.05と8.96±3.93 pg/ml、Day -1は7.80±1.98と10.24±3.01 pg/mlで、給与群が対照群と比較してDay -2で高い傾向（P<0.10）があり、Day -1で有意に（P<0.05）高かった。これらのことから、経口給与されたArgは卵胞の成熟に関与し受胎率を向上させる可能性があることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究拠点の岩手大学農学部附属寒冷フィールドサイエンス教育研究センター・御明神牧場の施設大型改修が2022年度に実施され、研究室の使用が６ヶ月程度制限された事から、研究計画に遅れが生じた。
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| 今後の研究の推進方策 |
アルギニン(Arg)製剤がウシの卵胞発育および卵子成熟に及ぼす影響を明らかにすることを目的として、牛胚回収と移植試験を行う。
黒毛和種雌牛を3頭用いて、発情周期の任意の時期(Day 0)に超音波診断装置による卵巣内卵子の経腟採卵(OPU)を行い、Day 4 に持続性卵胞発育刺激製剤およびPGF2aを、Day 8 にGnRHを筋肉内投与する。Day 9 に人工授精し、Day 16に子宮洗浄による胚回収を行い、PGF2aを投与する(対照区)。続いて、Day 37 にアントリン AL(30AU)およびレジプCを筋肉内投与して、Arg製剤(下垂体機能検査薬アルギニン点滴静注30g、600 ml/頭)を静注する。Day 41にコンサルタンを筋肉内投与する。Day 42に人工授精し、Day 49に子宮洗浄による胚回収を行う(Arg区)。回収した胚はガラス化凍結保存する。Day 4 および 8、16、37、41、49に超音波装置による卵巣観察を行い、18G採血針、真空採血管を用いて採血(ヘパリン加 30 ml)し、血漿中プロジェステロン（P4）と血漿中エストラジオール（E2）濃度を測定する。
一方、40頭程度の受胚牛に対して10日間の経腟プロジェステロン徐放剤(PRIDデルタ)を装着し、翌日にGnRHを投与し、7日後に凍結牛胚を融解して移植する。あるいは自然発情観察後８日に移植する。その後35日前後に妊娠診断を実施する。胚移植時に超音波装置による卵巣観察を行い、18G採血針、真空採血管を用いて採血(ヘパリン加 30 ml)し、血漿中P4とE2濃度を測定する。
黒毛和種雌牛供胚牛と受胚牛 (Arg給与群20頭、対照群20頭)はパドックにて群管理し、ロールサイレージを飽食、水は自由飲水とする。
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