研究課題/領域番号 |
21K06097
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分43040:生物物理学関連
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研究機関 | 大阪大学 |
研究代表者 |
福岡 創 大阪大学, 大学院生命機能研究科, 准教授 (50447190)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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キーワード | 大腸菌 / 走化性 / FRET / 蛍光イメージング / シグナル伝達 / 回転計測 / 情報伝達 / 1細胞計測 |
研究開始時の研究の概要 |
大腸菌は小さな細胞の中に,高等生物と同じようなセンシング能,情報処理能,運動能を有しているが,単純な大腸菌ですら,細胞の応答を細胞内でのタンパク質動態(局在,活性,分子数,相互作用)として理解するには至っていない.本研究は1細胞内FRETや走化性タンパク質の細胞内動態と共に,最終出力のべん毛モーター回転を同時計測することで,定常状態における走化性システム,入力に対する細胞応答やシステムのリセット機構の定量的解析を1細胞で行う.これにより生きた細胞内のタンパク質動態と細胞応答の相関関係を直接的に理解し,生命に普遍的な細胞内情報伝達の基本原理を,細胞内のタンパク質動態レベルで明らかにする.
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研究実績の概要 |
大腸菌は小さな細胞の中に,高等生物と同じようなセンシング能,情報処理能,運動能を有しているが,単純な大腸菌ですら,細胞の応答を細胞内でのタンパク質動態(局在,活性,分子数,相互作用)として理解するには至っていない.本研究は1細胞内FRETや走化性タンパク質の細胞内動態と共に,最終出力のべん毛モーター回転を同時計測することで,大腸菌1細胞における情報伝達を,細胞内のタンパク質動態と細胞応答の相関関係を直接的に理解し,情報伝達の基本原理を細胞内のタンパク質動態レベルで明らかにすることを目的としている.R4年度の研究では,本研究の目的のために,(1)FRETによる細胞内情報伝達タンパク質(CheYp)濃度とべん毛モーターの同時計測,また,(2)走化性タンパク質CheBの細胞内動態とのべん毛モーターの同時計測により,走化性応答時における細胞内タンパク質の動態と実際の細胞応答の相関関係を明らかにすべく計測を続けている.現在(2)の成果を論文発表するために準備を行っている.また我々は,(3)無刺激環境下(定常状態)において,細胞極にクラスター化した受容体の自発的な活性化/不活性化がCheYp濃度の揺らぎを生じさせている.我々は,走化性システムのリセットを担うCheR/CheBを介した受容体のメチル化レベルの変動が,この受容体クラスターの自発的な活性化/不活性化を生じさせていることを明らかにし,この成果を論文としてJournal of bacteriologyに発表した.
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
交付申請時の研究計画の通り,1)FRETによる細胞内情報伝達タンパク質(CheYp)濃度とべん毛モーターの回転方向を同時にモニターする系,ならびに2)走化性タンパク質CheBの細胞内動態の計測により受容体活性をイメージング可能な系を確立し,これらの計測によって走化性応答時における細胞内タンパク質の動態と実際の細胞応答の相関関係を明らかにすべく研究を続けている.2)の内容については,その成果を論文として発表するための準備を行なっている.また3)走化性システムによる受容体クラスターのメチル化ベルを変動させることによって,受容体クラスターの自発的活性化/不活性を引き起こし,それによって,無刺激環境下における細胞遊泳を制御していることを明らかにしたが,R4年時にその成果を論文としてJournal of bacteriologyに発表した.
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今後の研究の推進方策 |
R5年度は,まず研究実績の概要に記述した研究成果(2)走化性タンパク質CheBの細胞内動態とのべん毛モーターの同時計測についての論文を国際科学雑誌へ投稿し採択を目指す.また研究成果(1)FRETによるCheYp濃度と細胞応答の同時計測の結果についても,論文化の準備を進める.(1)および(2)で得られた成果を基に,細胞外刺激に対する情報伝達を(誘引刺激・忌避刺激に対する応答,またそれらに対する適応過程),細胞内タンパク質の動態と実際の細胞応答の同時計測によって,両者の相関関係を定量解析し,生命に普遍的な細胞内情報伝達の基本原理を,細胞内のタンパク質動態レベルで明らかにしていく.
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