| 研究課題/領域番号 |
21K06581
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分47040:薬理学関連
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| 研究機関 | 獨協医科大学 |
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研究代表者 |
林 啓太朗 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (10323106)
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| 研究分担者 |
倉沢 和宏 獨協医科大学, 医学部, 特任教授 (30282479)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | アミノ酸トランスポーター / アルギニンメチル化 / T 細胞 / LAT1 / JPH203 / T細胞 / タンパクメチル化 / 免疫疾患 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
T細胞活性化に伴い発現が誘導されるアミノ酸トランスポーターLAT1が取り込むメチオニンは、タンパク質の機能を調節するアルギニンメチル化の基質となる。本研究は、LAT1によるメチオニン輸送を介したアルギニンメチル化のT細胞活性化における重要性について、LAT1特異的阻害薬を用いた手法により解明し、さらにLAT1-アルギニンメチル化シグナル経路を標的とした新たな免疫疾患治療戦略の開発基盤を構築する。
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| 研究実績の概要 |
LAT1は、大型中性アミノ酸を細胞内に取り込むアミノ酸トランスポーターで、T細胞の活性化に伴い発現が著しく亢進し、免疫反応に重要な役割を果たす。メチオニンはLAT1によって細胞内に取り込まれるアミノ酸の一つで、細胞内でS-アデノシルメチオニンに変換され、タンパク質やDNAのメチル化の基質として機能する。アルギニンメチル化はタンパク質の機能を制御する重要な修飾反応である。研究代表者は、LAT1特異的阻害薬JPH203存在下でT細胞を活性化することによりメチル化の状態が変動するタンパク質を見出し、その一つとしてRNA結合タンパク質のEwsR1をこれまでに同定した。本研究は、LAT1を介したメチオニン取り込みとそれに伴うEwsR1のメチル化変動によるT細胞の機能発現の制御メカニズムを明らかにすることを目的とする。本研究は、ヒトT細胞を材料とした結果に基づき遂行されるが、近年のコロナウイルスの影響により健常者より採血を行うことが困難となり進捗が遅延していた。そこで本年度は、昨年に引き続き購入したヒトT細胞を用いて実験を実施することにした。その結果、siRNAによるEwsR1の発現低下により活性化T細胞におけるサイトカイン産生が抑制されたこと、さらには核酸合成経路に関わる酵素の発現が変動することが明らかとなった。以上の結果から、活性化T細胞の機能制御にEwsR1のアルギニンメチル化が関わり、核酸合成に重要な役割を果たす可能性が示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究はヒトT細胞を材料とした実験が必須であるが、近年のコロナウイルスの影響で健常者からの採血を行うことが極めて困難となり、進捗が遅れていた。本年度はヒトT細胞を購入して実験を実施することにしたが、極めて高価でもあること、さらに細胞数も限られるため、実験内容が制限され進捗はやや遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまではコロナウイルスの影響による採血不能により実験が制約されていたものの、ヒトT細胞を購入して代用することで迅速な実験の遂行を図る。EwsR1の標的遺伝子の同定などによりT細胞制御メカニズムの解明を中心に実験を遂行する予定である。
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