| 研究課題/領域番号 |
21K07057
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分49060:ウイルス学関連
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| 研究機関 | 藤田医科大学 |
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研究代表者 |
河本 聡志 藤田医科大学, 医学部, 准教授 (60367711)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | ロタウイルス / リバースジェネティクス / ワクチンベクター / 弱毒化 / 遺伝子操作系 / ロタウイルスベクター / 粘膜免疫 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、RVを基盤として、独自の遺伝子操作系（11-プラスミドシステム）を駆使して、他の病原体の感染防御抗原を組み込むことで、RVのみならず、臨床上で問題となっている粘膜面を侵入門戸とする他の病原体についても、粘膜面における侵入阻止と全身系免疫での防御の両方が誘導できるRVワクチンベクターの創出を試みる。
計画している研究項目は、①基盤となるRVベクターの最適化、②他の病原体の感染防御抗原を発現するRVベクターの作製、③異種抗原に対する免疫誘導能の検証、の３つである。
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| 研究実績の概要 |
重要な下痢症ウイルスの一つであるロタウイルスは小腸絨毛を標的器官とすることから、ロタウイルスゲノムに他の病原体の中和抗原をコードする遺伝子を組み込めば、ロタウイルスのみならず他の病原体に対する免疫をも誘導できる粘膜免疫誘導ワクチンベクターとして活用できる可能性がある。一方で、野生型ロタウイルスは下痢病原性を有することからワクチンベクターのバックボーンには弱毒化させたロタウイルスが適していると考えられる。そこで今年度は、ロタウイルスの非構造蛋白質NSP6を発現欠損させることで下痢病原性を弱毒化できるかどうかを検討した。
ロタウイルスがコードする非構造蛋白質NSP6のin vivoでの役割を明らかにするため、リバースジェネティクスでNSP6発現欠損組換えロタウイルスを作成し、乳のみBALB/cマウスでの増殖能と下痢病原性を検討した。NSP6欠損ウイルスは増殖に伴って下痢を誘導したものの、野生型に比べて発症期間は短くなり、重症度も軽くなった。また、腸管でのウイルス量は野生型に比べて減少した。加えて、腸管のHE染色と免疫組織化学染色から、小腸病変部の回復も野生型に比べて早いことが示された。これらの結果から、NSP6はin vivoにおけるロタウイルスの増殖や病原性発現に重要であり、NSP6を発現欠損させたロタウイルスは弱毒化することからワクチンベクターのバックボーンに適していることが示された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
組換えロタウイルスの下痢病原性を評価できるin vivoマウスモデルを確立できたが、ロタウイルスベクターの最適化の検討は中途である。
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| 今後の研究の推進方策 |
ロタウイルスベクター最適化の実施するとともに、in vivoにおける他病原体に対する免疫誘導の改良を行う。
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