研究課題/領域番号 |
21K07220
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分50020:腫瘍診断および治療学関連
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研究機関 | 九州大学 |
研究代表者 |
田中 謙太郎 九州大学, 医学研究院, 准教授 (00536849)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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キーワード | EGFR遺伝子変異陽性肺癌 / Hippo-YAP経路 / Serum deprivation / Apoptosis / MOB1 / YAP / EGFR変異陽性肺癌 / Hippo / Hippo経路 / 分子標的薬 / LATS |
研究開始時の研究の概要 |
1) EGFR遺伝子変異陽性肺癌におけるLATS発現と予後/患者背景相関の検討 2) EGFR遺伝子変異陽性肺癌細胞株におけるMOB1及びLATSの発現量及び結合、及び細胞内におけるYAP局在の検討 3) MOB1強制発現がEGFR遺伝子変異陽性肺癌細胞株の増殖能、移動能及び薬剤感受性に与える影響の検討 4) 網羅的遺伝子解析法を用いた、MOB1発現によりEGFR遺伝子変異陽性肺癌に特異的に誘導される転写因子の同定と、EGFR-TKI耐性化克服の検討
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研究実績の概要 |
EGFR野生型及び変異型肺癌細胞株を用いて、Hippo-YAPシグナル分子のタンパク発現レベルを網羅的に評価したところ、EGFR変異型細胞株ではYAP発現量が多い傾向にあった。次に代表的な増殖刺激であるEGF刺激下のYAP活性化を評価したところ、EGFR変異細胞株でYAPリン酸化の有意な低下が観察される一方、野生型ではYAPのリン酸化はむしろ増強した。 EGFR変異型肺癌細胞株では、EGF刺激下におけるYAPの過剰な活性化が認められたことから、野生型及び変異型EGFR過剰発現非小細胞肺癌細胞株を樹立し、Hippo-YAP経路の動態や細胞の増殖能を評価した。有血清条件下では、YAPの蛋白発現量と細胞増殖にEGFR変異型と野生型で差が認められなかったが、無血清条件を誘導するとEGFR変異型でのみYAPの蛋白発現が増加し、EGF刺激によるYAP活性化が認められた。加えて無血清条件下のEGF刺激により、EGFR野生型細胞株ではアポトーシスによる細胞死が生じたが、EGFR変異型細胞株はアポトーシス耐性であり、抗アポトーシス関連タンパクの発現が上昇した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度前半での論文投稿、及び公開を予定しており、3年での研究完了と結果の発表が十分見込める状態である。
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今後の研究の推進方策 |
siYAPの導入により、EGFR変異型細胞株で認められた無血清下EGF刺激によるアポトーシスへの耐性が消失するかフローサイトメトリーにて評価するとともに、抗アポトーシス関連たんぱく質の消失も評価する。次にこれらアポトーシス関連タンパクの誘導に影響するシグナルについて、EGF刺激下に存在するSTAT1/3, MAPK, PI3Kのシグナル解析を実施し同定する。最後に同シグナル経路下流の転写因子が、抗アポトーシス関連タンパクのプロモーター領域に結合するか、クロマチン免疫沈降法を用いて評価する。
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