研究課題/領域番号 |
21K07276
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分51030:病態神経科学関連
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研究機関 | 長崎大学 |
研究代表者 |
中垣 岳大 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (80722917)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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キーワード | 孤発性クロイツフェルトヤコブ病 / プリオン / RT-QUIC法 |
研究開始時の研究の概要 |
孤発性クロイツフェルトヤコブ病MM11患者の異常型プリオンタンパク(PrPSc)を検討したところ、アルカリ製剤処理に対する反応が異なっていた。これはPrPScの性質が異なることを示唆しており、同じMM1の中にもサブタイプが存在する可能性が考えられる。本研究では複数のMM1患者由来のPrPScの生化学的特性、マウスに対する病原性を比較し、MM1のサブタイプの有無を検討する。
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研究実績の概要 |
我々は4例の孤発性CJD MM1患者由来の脳乳剤をテラヘルツ水(CAC717)で処理すると、同じMM1型でも、異常型プリオンタンパク(PrPSc)が減少するパターンが異なる事を見出した。ウエスタンブロット法で3F4抗体(エピトープ 109-112)を用いて検出した際に90%程度減少するパターン①(3例)と50%程度しか減少していないパターン②(1例)である。この結果から、我々はMM1型の中にも異なるプリオンが存在する、もしくは病期によってプリオンが変性していくのではないかと考えた。 そこで今回、新たにMM1型の10例を同様の方法で検証した。 検証した10症例には純粋なMM1、MM1にMM2が少し混在するもの、MM1とMM2が同程度混在するものが存在していた。また、これらの症例の病期(発症から死亡まで)は1か月から半年以上のものまで多岐にわたっていた。しかし、いずれもCAC717処理によって3F4抗体のエピトープが90%程度減少しており、パターン①に分類された。つまり、CAC717に対する反応性の違いは病理像や病期によるものではない可能性が考えられる。ここまで14症例を検証してきたが、パターン②を示す症例は今のところ1例しか見つかっていない。つまり、パターン②を示すMM1型というのはマイナーなプリオンである可能性が考えられる。 今後、新たな評価方法でパターン①と②を比較する必要がある。その一つとして、変性剤グアニジン塩酸塩に対する耐性の違いを検証する方法がある。今回はマウスプリオン(22L株)を塩酸グアニジン処理して基礎実験を行い、塩酸グアニジンによるアッセイ方法を確立した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ヒトプリオンの異常型プリオンタンパクの量に個体差が大きく、検証が難しい症例が多いため、ウエスタンの条件を見直している。
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今後の研究の推進方策 |
今後も症例数を増やしながら検証する。また、グアニジンなどの他の評価方法をヒトサンプルでも検証する。 これらの検証で検体をグループ化して、マウスや試験管内での伝播実験を行う予定である。
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