| 研究課題/領域番号 |
21K07933
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53010:消化器内科学関連
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| 研究機関 | 筑波大学 |
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研究代表者 |
岡田 浩介 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (80757526)
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| 研究分担者 |
有泉 俊一 東京女子医科大学, 医学部, 准教授 (40277158)
正田 純一 筑波大学, 医学医療系, 客員教授 (90241827)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | NASH / p62 / autophagy / 臓器連関 / LC3 / lipophagy / 脂肪酸 / 非アルコール性脂肪性肝炎 / 肝硬変 / 肝癌 / 脂肪酸代謝 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
p62の脂肪酸代謝を介したNASH発症進展における役割を明らかにすることを目的として，①p62-KOマウスと野生型マウスの脂肪酸と中性脂肪のバランス変化を比較解析し，p62が全身の脂肪酸代謝の異常を介してNASH病態にどのように関与するか，②肝細胞，脂肪細胞または肝Kupffer細胞を含むマクロファージのみにp62を発現する組織細胞特異的p62遺伝子レスキューマウスを作製して，臓器組織別のp62がどのようにNASH病態に関与するか，③ヒトNASH臨床標本について，p62を中心とした免疫組織学的解析を行い，ヒトNASHの発症と進展においてp62がどのような役割を果たすか，を明らかにする．
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| 研究実績の概要 |
全身p62遺伝子欠失マウス（p62-KO）では，60%高脂肪食の長期摂餌により肝炎症線維化を伴う重症NASHを発症する．臓器連関の視点から，どの臓器組織のp62がNASH防御に重要なのかを明らかにするため，p62-KOをベースに肝細胞特異的p62レスキューマウス，脂肪細胞特異的p62レスキューマウス，マクロファージ特異的p62レスキューマウスでのNASH表現型を比較したところ，肝細胞特異的p62レスキューマウスでのみNASHの進行が軽減し，NASH防御において肝細胞のp62が重要であることが明らかになった．肝組織の解析を進めたところ，肝組織の全遺伝子解析（RNA-seq）において，p62欠失状態ではautophagy/lipophagyに関わる遺伝子がNASH発症以前から変化しており，更に，mitophagyやER phagyに関わる遺伝子も並行して変化が認められ，p62が肝臓においてタンパク分解系に広く関与し，NASHの進行に影響を与える可能性が示唆された．
培養肝細胞（Hepa1-6）を用いた解析では，WTと比較してp62をノックアウトした細胞（p62-KO）では，脂肪酸負荷によるERストレスシグナルとapoptosisシグナルがp62-KO で顕著に増加し，しかも遷延する興味深い結果が得られ，マウスで得られたp62のER phagyとの関連が裏付けられた．
ヒト肝臓標本を用いてmulti-ubiquitin（Mu）の免疫組織学的解析を行った．非癌部のMuの免疫組織学的発現が強い症例ではその発現が顆粒状に認められ，同部位ではp62についても同様に顆粒状発現が認められ，免疫組織学的発現の相似性が認められた．更に，Muおよびp62の顆粒状発現が認められる症例では，肝炎症線維化が軽度の症例が多く，これらの発現と発現パターンがNASHの防御に関連がある可能性が示唆された．
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