| 研究課題/領域番号 |
21K08100
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53020:循環器内科学関連
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
門田 真 信州大学, 学術研究院医学系, 助教 (70799064)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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| キーワード | ペースメーカー細胞 / 多能性幹細胞 / セルソーティング / 自動能 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
HCN4陽性ペースメーカー細胞とHCN4陽性非ペースメーカー細胞を細胞膜電位・細胞内Ca2+濃度変動波形から判別し、それぞれから局所的に微量RNAを採取してRNAシーケンス(RNA-seq)解析を行い、ペースメーカー細胞分化・自動能維持に関わる遺伝子群を特定する。その上で、特定された複数の遺伝子を標識するヒトiPS細胞株を樹立し、薬剤選択などによりペースメーカー細胞を純化する。さらに、純化ペースメーカー細胞のラット心臓への移植実験を行い、長期的なペーシング機能を評価する。
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| 研究実績の概要 |
HCN4赤色蛍光標識ヒトiPS細胞株の、ペースメーカー細胞に強く発現する別の遺伝子下流に、CRISPR/Cas9を用いて、緑色蛍光タンパクの遺伝子導入したデュアルレポーターラインの作製に成功し、セルソーティングによるペースメーカー細胞純化が可能となった。ペースメーカー細胞分化誘導および、純化ペースメーカー細胞を用いた実験を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
デュアルレポーターヒトiPS細胞株を樹立して、蛍光標識によるペースメーカー細胞純化に成功したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
ペースメーカー細胞の分化誘導効率を上げる培養条件および純化ペースメーカー細胞の自動能維持をきたす培養条件を検討する。
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