| 研究課題/領域番号 |
21K08217
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分53030:呼吸器内科学関連
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| 研究機関 | 藤田医科大学 |
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研究代表者 |
水谷 泰嘉 藤田医科大学, 医学部, 講師 (10546229)
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| 研究分担者 |
稲田 健一 藤田医科大学, 医学部, 教授 (70246081)
鈴木 元 藤田医科大学, 医学部, 教授 (80236017)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | PD-L1 / YBX1 / 肺がん / YB1 / 免疫チェックポイント / mRNA安定性 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、がんの免疫逃避に関わる蛋白質PD-L1の発現におけるYB1の機能を明らかにする。この研究をとおして、肺がんにおけるPD-L1阻害療法の治療効果予測マーカーの開発と治療効果の向上をめざす。おもにPD-L1 mRNAの安定性に注目してYB1の作用を解析する。そして、YB1発現を人為的に制御した肺がん細胞株を移植したマウスを用いて、YB1発現変化にともなうPD-L1阻害薬の抗腫瘍効果を検証する。さらに、肺がん病理検体におけるYB1とPD-L1発現の相関性やYB1発現とPD-L1阻害療法の治療効果との相関性を解析して、PD-L1阻害療法の効果予測マーカーとしてのYB1の有用性を検証する。
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| 研究実績の概要 |
本研究の目的は、PD-L1（Programmed death 1 ligand 1）の発現制御におけるYBX1（Y box binding protein 1）の機能を明らかにすることである。これまでに、肺がん細胞株においてYBX1がPD-L1 mRNAの安定性を低下させることを明らかにしている。前年度までの検証により、YBXによるPD-L1 mRNA不安定化において、PD-L1 mRNAの3'-UTRを介する可能性が示唆された。そこで本年度は、PD-L1発現にかかわるマイクロRNA（miRNA）に対するYBX1の機能に着目して検証した。肺がん細胞株Calu-1を用いて、PD-L1発現との関係性が報告されている6種類のmiRNAの3p型と5p型について、YBX1ノックダウンによる発現変化を検証した。その結果、YBX1ノックダウンによってmiR-152-3pの発現が低下することが明らかとなった。このmiRNAが、Calu-1細胞のPD-L1発現に寄与するか確認するために、antisense inhibitorによるmiRNA阻害実験を行った。Calu-1細胞にmiR-152-3pのantisense inhibitorを添加後、PD-L1発現をFACSにより解析したが、control inhibitorを添加した細胞と比較して、変化しなかった。したがって、Calu-1細胞においてmiR-152-3pはYBX1によって発現制御を受けているが、PD-L1発現制御には寄与していない可能性が高いと考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
これまでにYBX1をノックダウンするとPD-L1のmRNAが安定化することを示すデータを得ていることから、YBX1によるPD-L1 mRNA不安定化機構への影響の解明を目的とした研究を進めている。この機構の解明に想定よりも時間がかかっている。今回PD-L1発現と関連が報告されているmiRNAの中からYBX1により発現制御を受けるmiRNAを同定したが、そのmiRNAがPD-L1発現制御に寄与することは証明できなかった。今回標的外としたmiRNAも含めて、YBX1により制御を受けているかどうかを調べる必要がある。以上の理由から研究の進捗はやや遅れている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今回検索対象としたmiRNA以外のmiRNAについて、PD-L1 mRNAとの相互作用が予測されるmiRNAをデータベースを利用して検索する。PD-L1 mRNAとの相互作用の可能性が高いことが示されたmiRNAについて、YBX1ノックダウンによる発現変化を肺がん細胞株を用いて検証する。YBX1ノックダウンにより発現が減少するmiRNAが認められた場合、そのmiRNAに対するantisense inhibitorやmiRNA mimicを用いて、PD-L1発現における標的miRNAの寄与を証明する。
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