| 研究課題/領域番号 |
21K08724
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55020:消化器外科学関連
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
中村 透 北海道大学, 医学研究院, 助教 (70645796)
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| 研究分担者 |
平野 聡 北海道大学, 医学研究院, 教授 (50322813)
平岡 圭 北海道大学, 医学研究院, 客員研究員 (10719587)
YANG JAY 北海道大学, 医学研究院, 客員教授 (60897619)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 膵癌 / CA19-9 / DNAアプタマー |
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| 研究開始時の研究の概要 |
細胞表面糖鎖抗原CA19-9を標的とし膵癌細胞にsiRNA を選択的に導入する共有結合DNAアプタマーを開発し、K-rasG12D 遺伝子およびfibulin-3 遺伝子発現を抑制し、膵癌増殖抑制効果を検討する。①CA19-9選択的に細胞内に核酸を取り込むことが可能な共有結合DNAアプタマーの作成、②CA19-9を標的としたDNAアプタマーとsiRNAを結合したDNA aptamer-siRNAによる、K-rasG12Dおよびfibulin-3 遺伝子発現抑制実験、①②を組み合わせた共有結合DNAアプタマー-siを用い、ヒト膵癌同所移植モデルマウスによる前臨床試験を施行する。
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| 研究成果の概要 |
CA19-9を標的とした共有結合DNAアプタマーを検討したが、糖鎖抗原のheterogeneityが高く検討困難であった。そこでMUC1バリアント（MUC1/Y）を標的とし、膵癌細胞の発現を確認し、既報のMUC1/Yアプタマー(S11b) を使用した。S11bはMUC1/Yの発現に応じた取り込みを示した。次S11bとsiRNAを結合したDNA aptamer-siRNAを構築し、K-ras抑制したが、十分な効果を示さなかった。未修飾アプタマーはヌクレアーゼで消化され効果が不安定であった可能性を考慮し、様々な修飾を試した。しかし共有結合修飾は修飾自体確認できず、PS修飾は非特異的な効果を示した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
本研究は細胞表面分子を標識とし、選択的なDNAアプタマーによる癌細胞への核酸阻害剤の取り込みによる新規治療薬開発である。MUC1/Yが膵癌細胞に特異的に発現していることが確認され、またMUC1/Yに対するアプタマーにより細胞内への取り込みが可能であることを確認できた。残念ながらその不安定性から細胞増殖抑制には至らなかったが、DNAアプタマーの不安定性や、PS修飾が非特異的に細胞障害を引き起こすこと、共有結合修飾の適切な評価方法が必要など、問題点が明らかとなった。また本アプローチは癌表面マーカーの選択や発現抑制遺伝子の選択など幅広い可能性があり、今後の治療薬開発の可能性を広げた。
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