| 研究課題/領域番号 |
21K09305
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56020:整形外科学関連
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
熊谷 研 横浜市立大学, 医学部, 准教授 (10468176)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
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| キーワード | 力学的負荷 / 軟骨 / スクレロスチン / 変形性関節症 / 関節軟骨 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
変形性関節症（OA）の発症や進行に関するメカニズムとして、Wnt/β-cateninシグナルを介した軟骨内骨化の関与に着目した。Wntのアンタゴニストであるスクレロスチンに焦点をあて研究を行う。本研究では、OAのような過剰な力学的負荷が加わる環境下において、スクレロスチンは軟骨内骨化を抑制し、関節軟骨の維持に作用するか、という点を明らかにする。本研究により、OAの発症や進行の予防に対する新しい指針や創薬につながる知見をもたらすことが期待される。
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| 研究実績の概要 |
本研究では変形性関節症（ＯＡ）の発症や進行に関するメカニズムとして、力学的負荷と関節軟骨におけるＷｎｔ／β－ｃａｔｅｎｉｎシグナルを介した軟骨内骨化過程の関与に着目した。「ＯＡのような過剰な力学的負荷が加わる環境下において、スクレロスチンは軟骨内骨化を抑制し、関節軟骨を維持するように作用するか」について検証することを目的として調査を行う。令和4年度は、以下の２つの実験を行った。
①高位脛骨骨切り術（HTO）術前後における関節液中のスクレロスチンと関節マーカーの調査：HTOの症例は内反変形を伴い、術前は過剰な力学的負荷が内側コンパートメントに集中するが、下肢アライメントの矯正により術後は関節内の力学的な環境が至適化され臨床症状が改善する。術前、術後（抜釘時）に関節液を採取し（n=30）、ELISA法にて各種関節マーカーおよびスクレロスチンの発現を測定した。術後の臨床症状改善とともに各種関節マーカーの改善とスクレロスチン濃度との関連性を示すことができた。
②In vitro軟骨分化での力学的負荷モデルの作製：昨年度から継続して実験を行った。ヒトＯＡ由来軟骨細胞を単層培養し、力学刺激培養装置にて伸張の力学的負荷をかけ実験を行った。伸張の条件や解析までの時間などの条件を変えながら、リアルタイムＲＴ－ＰＣＲにて軟骨分化関連遺伝子の発現とWntシグナル関連マーカーの発現を評価した。再現性のある条件を見つけることができ、実験モデルを確立することができた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
HTO症例の関節液評価は予定通りに行うことができた。一方、In vitro軟骨分化での力学的負荷モデルの作製において、条件検討の部分は終了したが、Wntシグナル関連マーカーの発現の解析はまだ不十分である。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度に予定通り達成できなかった部分については、速やかに終了するよう進めていく。今年度の結果を踏まえ、次年度は軟骨への力学的負荷とWntシグナルおよびスクレロスチンの遺伝子発現および抑制した場合に及ぼす影響を調査する。
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