| 研究課題/領域番号 |
21K09335
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56020:整形外科学関連
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
小松 梨恵 聖マリアンナ医科大学, 医学研究科, 研究技術員 (80517475)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | CDK6 / 滑膜線維芽細胞 / 炎症性サイトカイン |
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| 研究開始時の研究の概要 |
SPACIA1は関節リウマチの病態形成に重要な役割を果たす「炎症に伴う滑膜線維芽細胞増殖」に着目した先行研究で同定され、関節炎モデルマウスの重度の病態の増悪に関わる因子であるが、その分子機構に対する理解は不十分である。本研究ではSPACIA1による発現制御を受けるCDK6に焦点をあて、炎症性サイトカイン刺激下の滑膜線維芽細胞増殖におけるSPACIA1/CDK6の分子レベルでの理解を進める。さらにSPACIA1/CDK6が関与する経路の阻害剤を特定し、関節炎モデルマウスにおける病態抑制の可能性を検討する。
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| 研究実績の概要 |
研究代表者らは関節リウマチの滑膜線維芽細胞の過剰増殖の根底にあるメカニズムの一つとして炎症性サイトカイン刺激によるCDK6の発現亢進が潜在的な治療標的となると考え、治療法開発の基礎的データを得ることを目的に一連の研究を進めてきた。研究代表者らがリウマチ治療の標的とする滑膜線維芽細胞増殖について、個体レベルでは培養滑膜線維芽細胞で検討した既存の阻害剤（5種類）のうち有望と考えられた1種類について投与条件を検討後、コラーゲン誘導関節炎マウスの病態への影響を検討した。その結果、有意な病態抑制効果を認めた。さらに、すでに私たちが検討してきたCDK6発現阻害剤の効果（膝関節滑膜過形成の組織学的評価・免疫抗原抗体価・標的分子発現レベル）との比較も進めた。
細胞レベルでは、用量依存的に生細胞数を抑制した阻害剤（8種類中5種類）の中から細胞増殖に対する他の指標をCDK6発現阻害剤の効果と比較し、動物実験に用いる薬剤を選定した。各阻害剤は、G1期に関連するmRNAおよびタンパク質・標的シグナル伝達経路・抗アポトーシスへの影響がそれぞれ異なっており、生細胞数に対する効果と同様の用量依存的な効果を示した阻害剤は1種類であった。またCDK6発現阻害剤およびCDK6発現阻害剤の対照薬（CDK4/6両キナーゼ阻害剤・生物学的製剤）を検討に加え、既存の治療薬との異なる作用が示唆された。本研究成果から、CDK6が滑膜線維芽細胞増殖に重要な役割を担うことが明らかとなった。
また、本研究課題の一部のデータをまとめ、国際学術誌への投稿を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
リウマチ動物モデルマウスに投与する阻害剤の必要量は、予算の都合で複数種類の検討が難しかった。そのため、細胞レベルのアッセイに基づき1種類の阻害剤について複数条件の予備試験を重ね、本試験を実施した。予定通り、「膝関節滑膜過形成の組織学的評価」・「血液学的検査」・「標的分子の発現レベル」の解析を進め、研究成果が得られた。
動物での複数種類の阻害剤を用いた検討に代わり、培養細胞の実験系で複数種類の阻害剤および比較対照となる薬剤を購入した。細胞増殖抑制作用の調節に関わる候補因子について予定よりも分子レベルでの解析を進めることができた。また、国際学術誌への投稿を進めているが、為替レートの影響から想定していた論文掲載費用よりも高額になることが想定される。追加実験など費用が確定後、一部未完となっている再検証のための実験を予定しており、進捗区分は「やや遅れている」と判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
追加実験を進める。使用額が確定した段階で、動物モデルでの結果を確定させるためのマウス・阻害剤の購入を予定している。
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