| 研究課題/領域番号 |
21K09383
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
木村 高弘 東京慈恵会医科大学, 医学部, 教授 (00307430)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 前立腺癌 / 融合遺伝子 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
前立腺癌においてTMPRSS2:ERG遺伝子融合は最も頻度の高い遺伝子変異であり、欧米人では約50％に認められる、一方で日本人におけるその頻度は20％以下であることから、日本人においては別の融合遺伝子の存在が示唆される。新たな融合遺伝子の発見は、日本人前立腺癌における発癌メカニズムの解明と治療法の開発につながる。申請者は日本人から樹立した前立腺癌モデルを用いた次世代シークエンス解析により複数の新たな融合遺伝子候補を同定した。本研究では申請者の見い出した日本人の融合遺伝子の機能を解析するとともに、近年開発されたナノポアシークエンス解析を用いて、患者検体から新たな融合遺伝子を同定する。
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| 研究実績の概要 |
2021年度までに、当科で前立腺癌患者の転移組織より樹立した内分泌感受性前立腺癌マウス皮下移植モデルJDCaPおよびその去勢抵抗性モデルであるJDCaP-CRの次世代シークエンス解析により同定された遺伝子融合遺伝子ELOVL5:LRRC1遺伝子融合の発現を、前立腺癌細胞および臨床検体を用いて検討した。当科で樹立したヒト前立腺癌皮下移植モデル(JDCaPおよびJDCaP-CR)およびヒト前立腺癌細胞株PC３およびLNCaPがELOVL5:LRRC1遺伝子融合を有する事をRT-PCR法で検討し、JDCaP、JDCaP-CRおよびLNCaPではRT-PCR法によりELOVL5:LRRC1遺伝子融合の発現が確認されたが、PC3細胞では確認が出来なかった。
2022年度はFISH法によりELOVL5:LRRC1遺伝子融合を検討した。FISH法においても、LNCaPでELOVL5:LRRC1遺伝子融合を確認する事が出来た。JDCaP、JDCaP-CRでの検討を進めている。
臨床検体におけるELOVL5:LRRC1遺伝子融合の発現を解析するため、限局性前立腺癌の前立腺全摘組織、転移性前立腺癌の生検組織、去勢抵抗性前立腺癌の転移組織（ホルマリン固定パラフィン包埋組織）を対象としてFISH法解析および免疫組織染色の検討を進めている。
臨床検体においては、当院における手術検体、生検検体の中から、腫瘍量の多く、病理学的悪性度や進行度の異なる症例を抽出した。現在臨床検体における免疫染色およびFISH法の検討を行っている。
ELOVL5:LRRC1遺伝子発現前立腺株の作成を進めている。ELOVL5:LRRC1遺伝子発現レンチウイルスベクターを作成した。現在PC３に遺伝子導入を行っている。
患者末梢血CTCの採取を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
FISH法が確立したため、臨床検体の検討を行う事が出来た。
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| 今後の研究の推進方策 |
機能解析のためのELOVL5:LRRC1遺伝子融合遺伝子発現ベクターを作成したため、今後はin vitro実験系を進めていく。また、患者CTCの採取も引き続き行う。
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