| 研究課題/領域番号 |
21K09519
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56040:産婦人科学関連
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
浅野間 和夫 九州大学, 医学研究院, 准教授 (30380413)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 転写因子 / 栄養代謝 / 子宮体癌 / 解糖系 / 酸化的リン酸化 / 上皮間葉移行 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
我々はこれまで特に子宮体癌の上皮間葉移行に注目し浸潤機構について研究を進めてきた。癌細胞はエネルギー産生に関して解糖系に大きく依存していることが古くより知られているが、一方で最近では酸化的リン酸化も重要な役割を持っており、癌の進展や転移に重要であることが分かってきた。しかし癌細胞の上皮間葉移行・浸潤機構と細胞内代謝との関連については議論が分かれるところで、十分な知見がないため、これを明らかとし子宮体癌の進展を制御する新たな治療法開発の基礎的研究を行う。
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| 研究実績の概要 |
我々は癌抑制転写因子BHLHE40が癌細胞の栄養代謝に与える影響を見るため、まず代表的なエネルギーセンサーであるAMPKの発現とリン酸化に与える影響を調べてきた。これまでの研究でBHLHE40が子宮体癌細胞においてAMPKα1 /2Thr172のリン酸化を促進すること、解糖系を抑制しミトコンドリア呼吸を促進することを見出した。またその過程に乳酸水酸化酵素（LDHA）の活性的リン酸化（p-Tyr10）の抑制によるLDHA活性の抑制とピルビン酸水酸化酵素（PDHα1）の抑制的リン酸化（p-Ser293）の抑制による、PDH活性の促進が関わることを見出した。BHLHE40がAMPKα1/2のThr172リン酸化を促進する機序として、AMPKα1を脱リン酸化すると考えられる酵素PPM1AとPPM1Fを同定した。実際BHLHE40は転写抑制によりこれらの脱リン酸化酵素の発現を抑制することを発現解析、レポーター解析、ゲルシフト解析で明らかとした。また、PPM1A, PPM1Fの不活性型変異体を作成し、これらの酵素が確かにAMPKα1/2を脱リン酸化することを細胞内での解析と共にin vitroでの脱リン酸化解析でも明らかにした。PPM1A, PPM1FのノックダウンによりAMPKα1 /2Thr172のリン酸化が増加した。またBHLHE40をノックダウンした子宮体癌細胞株を作成し、マイクロアレイ解析, GSEA解析によりBHLHE40が制御する栄養代謝経路を網羅的に明らかとした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
前後する部分はあるがおおむね研究計画に沿って研究が進んでおり、順調と判断する。
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| 今後の研究の推進方策 |
子宮体癌の進展におけるBHLHE40-PPM1s-AMPKα1/2経路の重要性を確認するため現在、子宮体癌症例の組織検体を用いてBHLHE40、PPM1A、PPM1F、p-AMPKα1/2 Thr172の発現を免疫組織学的染色で確認しているところである。BHLHE40-PPM1s-AMPKα1/2経路が上皮間葉移行に及ぼす影響を調べるため、PPM1A, PPM1F、AMPKα1/2の発現を抑制または活性化させて上皮・間葉マーカーの発現解析、in vitroの細胞遊走能・浸潤能解析を行う。研究結果をまとめ、国際論文誌にて成果発表を行う。
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