| 研究課題/領域番号 |
21K09543
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56040:産婦人科学関連
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
三浦 生子 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (00404301)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2021年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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| キーワード | 産婦人科学 / 胎児成熟 / mRNA / microRNA / 分子マーカー / 産科疾患 / 妊娠産物 / 間葉系幹細胞 / エクソソーム / 妊娠高血圧症候群 / 母体 / RNA / circRNA / 産婦人科 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
これまで、私どもは母体血中の胎児・胎盤由来RNA を同定し、それらは母体血を通じて非侵襲的に得られる胎児・胎盤の分子情報であり周産期の病態との関連が示唆されている。本研究では、胎児・胎盤由来RNA を内包して母体血中を循環するエクソソームおよび妊娠産物由来間葉系幹細胞（MSC）に着目し、産科疾患（preeclampsia、FGR）と関連するバイオマーカーを同定し、母体の血液検査による産科疾患の病態評価と妊娠産物由来MSC を用いた再生医療による胎内治療に向けた新知見の獲得を目指す。
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| 研究実績の概要 |
R5年度は直接的に肺以外の臓器についても胎児成熟度を評価する分子マーカーの同定を目指して、胎児臓器の成熟をモニターできる可能性のある羊水中の胎児由来cell free mRNA/miRNAの同定を試みました。対象として、妊娠16週の羊水は、羊水検査で正常核型であった検体を集積しました。妊娠38週の羊水は、長崎大学病院産婦人科での選択的帝王切開時に、子宮切開後、卵膜を膨隆させて穿刺し、シリンジに羊水を吸引して集積しました。R5年度は、妊娠16週の羊水検体を6例、妊娠38週の羊水検体を9例集積しました。妊娠16週と38週の羊水からトータルRNAを抽出し、RNAシークエンスを行いました。その結果、妊娠16週から妊娠38週にかけて発現量が増加する21種類のmRNAを同定されました。同定した21種類のmRNAのうち、妊娠16週で羊水細胞における発現量が０TPM（transcripts per million）で、妊娠38週で増加しているmRNA5種類を胎児成熟の分子マーカーとして選択しました。5種類のmRNA（発現臓器）の内訳は、SFTPC（肺）、SMIM29（脳や皮膚）、NAA10（脂肪や虫垂）、IFITM3P6（副腎や甲状腺、唾液腺）、およびCALML5（皮膚、唾液腺、食道）であり、胎児臓器の機能成熟を反映するバイオマーカーの候補であると示唆されました。同定した5種類のmRNAについてそれぞれプライマーを設定し、RT-qPCRを行いました。現在のところ、肺に発現しているSFTPCについて、妊娠16週で発現していないのに対し、38週で有意に発現量が増加していました。現在、残り4種類のmRNAについても同様にRNAを抽出し解析を進めています。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
R5年度は5種類のmRNA（SFTPC、SMIM29、NAA10、IFITM3P6およびCALML5）の安定したRT-PCRによる定量系の設定に時間を要してしまい、研究計画に遅延が生じてしまいました。
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| 今後の研究の推進方策 |
肺以外の臓器でも発現している4種類のmRNAについてRT-qPCRを用いて発現量の評価を行います。また、標的mRNAの発現を抑制するといわれるmiRNAとして、C14MCに着目し羊水中における発現量の推移を検討します。また、羊水と同時に採取している母体血を用いて低侵襲的に胎児臓器の成熟を評価しうる分子マーカーの同定を目指します。
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