| 研究課題/領域番号 |
21K09892
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57030:保存治療系歯学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
神野 友樹 大阪大学, 大学院歯学研究科, 招へい教員 (10839202)
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| 研究分担者 |
北川 晴朗 大阪大学, 大学院歯学研究科, 助教 (50736246)
壷井 莉理子 大阪大学, 大学院歯学研究科, 特任助教(常勤) (20827430)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | バイオフィルム / 酵素 / フィラー / 歯科材料 / 菌体外多糖 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、材質や粒径の異なる4種のフィラーに、各種反応性官能基を用いてデキストラナーゼまたはフルクタナーゼを固定化し、フィラーに担持された酵素活性を評価することで、各酵素の担持に適したフィラーおよび反応性官能基の種類および組み合わせを検証する。さらに、確定した条件で作製した各酵素担持フィラーをコンポジットレジンやグラスアイオノマーセメントに配合し、各試料表面でのバイオフィルム形成抑制効果を検証することで、口腔バイオフィルム制御能を備えた酵素担持フィラーの開発と修復材料への応用を目指す。
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| 研究実績の概要 |
令和４年度は、令和３年度までの成果にもとづいて、まず、シリカ系多孔質フィラーに対するフルクタナーゼ担持能を検討した。
フルクタナーゼを担持させるための反応性官能基をフィラーに結合させるため、まず、3種類の各シリカフィラーに対して、3-アミノプロピルトリエトキシシラン（APTES）を75度の蒸留水中で3時間反応させることでシランカップリング処理を行い、良好なカップリング反応が行われたことを確認した。その後、シランカップリング処理後のフィラーをグルタルアルデヒドと反応させ、フィラー表面にアルデヒド基を結合させた。続いて、APTES－グルタルアルデヒド処理を行ったフィラーをフルクタナーゼ溶液に24時間浸漬し、BCA法により浸漬溶液中のフルクタナーゼ濃度の変化を確認することでフィラーに対するフルクタナーゼ担持量を定量した。その結果、いずれの孔径のフィラーにおいても、APTES－グルタルアルデヒド処理を行わなかった群では、フルクタナーゼの担持が全く検出されなかった一方で、APTES－グルタルアルデヒド処理を行ったシリカフィラーはフルクタナーゼがシリカフィラーへ担持されていることが確認された。
さらに、フルクタナーゼ担持フィラーの酵素活性を評価するため、各フルクタナーゼ担持フィラーをイヌリン中に浸漬し、DNS法により還元糖を定量した。フルクタナーゼ担持フィラーは、非担持フィラーと比較して還元糖の生成量が有意に多く、多孔質シリカフィラーに対してフルクタナーゼ活性を維持した状態で担持されていることが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
令和4年度の研究実施計画に則り、フルクタナーゼ担持シリカフィラーの作製に成功し、前述のような結果を得た。
以上のことから本研究の進捗は、おおむね順調に進展していると判断できる。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和3年度、および令和4年度に得られた結果に基づいて、デキストラナーゼおよびフルクタナーゼの2種類の酵素を用いた各酵素担持フィラーを市販コンポジットレジンに配合し、各修復材料の抗プラーク性について評価を行う。
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