| 研究課題/領域番号 |
21K10068
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 三重大学 |
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研究代表者 |
清水 香澄 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (20378368)
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| 研究分担者 |
村田 琢 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (80242965)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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| キーワード | 悪性腫瘍 / phosphodiesterase / Phosphodiesterase |
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| 研究開始時の研究の概要 |
Phosphodiesterase (PDE)は11種類(PDE1からPDE11)報告されており、 細胞内のcAMP、cGMP濃度を調整することにより様々な生理作用に関与している。われわれはPDE1が悪性黒色腫細胞で発現していること、さらにPDE1、PDE5両方の阻害効果をもつsildenafilが、PDE1を阻害することによってその運動能を抑制することを発見したことから、本研究ではPDE1を発現していない細胞にPDE1を強制発現させることによって細胞の性質がどのように変化するかを検討し、PDE1阻害剤が増殖、運動能を抑制するかどうかを確認する。
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| 研究実績の概要 |
Phosphodiesterase (PDE)は11種類(PDE1からPDE11)報告されており、 細胞内のcAMP、cGMP濃度を調整することにより様々な生理作用に関与している。われわれは抗腫瘍活性をもつDifferentiation-inducing factor (DIF)の哺乳類でのターゲット分子がPDE1であることを世界で初めて発見した。その後、PDE1が悪性黒色腫細胞で発現していること、さらにPDE1、PDE5両方の阻害効果をもつsildenafilが、PDE1を阻害することによってその運動能を抑制することを発見した。本研究ではPDE1を発現していない細胞にPDE1を強制発現させることによって細胞の増殖、運動能等の性質がどのように変化するかを検討した。
まず、PDE1を発現していないと考えられた口蓋悪性黒色腫PMP細胞についてreal-time PCRを行ったところ、PDE1Cのバリアントの一つであるPDE1C3が発現していることがわかった。同一患者の腋下リンパ節転移巣由来MAA細胞ではPDE1C1が発現していた。そこで、PDE1C1遺伝子およびPDE1C3遺伝子を組み込んだプラスミドをそれぞれ作製した。そして、PMP細胞にPDE1C1遺伝子、PDE1C3遺伝子をそれぞれ導入して強制発現させた。 次に、PDE1が細胞内に導入されて発現していることをreal-time PCR、western blottingで確認した。確認後、増殖能・運動能の変化、形態変化について検討したところ、PDE1C1遺伝子を強制発現させたPMP細胞では増殖能・形態に変化はみられなかったが、運動能が上昇していた。また、PDE1C3遺伝子を強制発現させたPMP細胞では増殖能・形態・運動能いずれも変化はなかった。
以上のことから、PDE1C1は口腔悪性黒色腫細胞の運動能に関与することが示唆された。
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