研究課題/領域番号 |
21K10068
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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研究機関 | 三重大学 |
研究代表者 |
清水 香澄 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (20378368)
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研究分担者 |
村田 琢 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (80242965)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
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キーワード | 悪性腫瘍 / Phosphodiesterase |
研究開始時の研究の概要 |
Phosphodiesterase (PDE)は11種類(PDE1からPDE11)報告されており、 細胞内のcAMP、cGMP濃度を調整することにより様々な生理作用に関与している。われわれはPDE1が悪性黒色腫細胞で発現していること、さらにPDE1、PDE5両方の阻害効果をもつsildenafilが、PDE1を阻害することによってその運動能を抑制することを発見したことから、本研究ではPDE1を発現していない細胞にPDE1を強制発現させることによって細胞の性質がどのように変化するかを検討し、PDE1阻害剤が増殖、運動能を抑制するかどうかを確認する。
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研究実績の概要 |
2022年度は、当科で樹立・継代された口腔悪性黒色腫細胞株PMPにPhosphodiesterase(PDE)1遺伝子を導入し、安定発現細胞株を作製して運動能等についての解析を行う予定であった。PDE1には、いくつかのバリアントの存在が報告されているが、これまでのわれわれの研究結果より、PDE1C1とPDE1C3が、口腔悪性黒色腫細胞株の機能に関与していると考えられるため、まずPDE1C3を組み込んだプラスミドを作製し、Lipofection法にてPMP細胞に強制発現させ、安定発現細胞株を作製した。PMP細胞は、PDE活性測定において、カルシウム・カルモジュリンにて活性が上昇しないため、当初はPDE1は発現しないものとして研究を行っていたが、実験を進めていくとカルシウム・カルモジュリンを欠くタイプであるPDE1C3が発現していることがわかった。さらに、同一患者の転移巣由来であるMAAでは、PDE1C1が発現していることがわかった。 原発巣と転移巣でPDE1Cのバリアント発現に違いがあるという報告はなく、この違いが転移に関わる機能に関与している可能性が考えられる。 PMP細胞において、PDE1C3を強制発現させ、安定発現細胞株を作製して増殖能について検討した結果、PDE1C3の発現量と増殖能には関連がないことがわかった。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
PDE1C1を組み込んだプラスミドを作製し、Lipofection法にてPMP細胞に強制発現させる実験をすでに始めており、おおむね順調に進展している。
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今後の研究の推進方策 |
2023年度は、PMP細胞にPDE1C1を遺伝子導入し、強制発現させて運動能等について検討する予定である。
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