| 研究課題/領域番号 |
21K10165
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57070:成長および発育系歯学関連
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
稲田 絵美 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 講師 (30448568)
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| 研究分担者 |
佐藤 正宏 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, ゲノム医療研究部, 共同研究員 (30287099)
齊藤 一誠 朝日大学, 歯学部, 教授 (90404540)
野口 洋文 琉球大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50378733)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 遺伝子工学的手法 / アルカリホスファターゼ / ヒト乳歯歯髄細胞 / 乳歯歯髄幹細胞 / 細胞工学的手法 / 多能性幹細胞 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
ヒト乳歯歯髄細胞（HDDPC）は高い増殖能と多分化能を有することが報告されており、組織再生のための有望な細胞ソースと考えられるが、非幹細胞が混在する細胞集団であるため、この中から幹細胞を純化する必要がある。申請者らの過去の研究から「アルカリホスファターゼ高活性かつOCT3/4陽性の細胞（以下、ALP(+)/OCT3/4(+)）は多能性幹細胞になり得る」と判断された。今回、細胞工学的手法によるHDDPC由来ALP(+)/OCT3/4(+)安定株樹立を目指す。同細胞の特性を解析する一方、マウス胎仔の歯槽堤部由来細胞との共培養による組織再構成実験を行い、多能性幹細胞の特性の有無を明らかにする。
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| 研究成果の概要 |
限界希釈法にてヒト乳歯歯髄細胞（HDDPC）をsingle cell化した後、幹細胞特異的遺伝子の発現をRT-PCR法にて調べた結果、cell cloneによってアルカリホスファターゼ（ALP）等の幹細胞特異的遺伝子の発現様式が異なることが判った。さらに、HDDPCへの山中因子の繰り返し遺伝子導入による幹細胞様細胞への分化転換誘導実験の結果、４回目の遺伝子導入でALP陽性細胞の出現を確認できたことから、HDDPCから幹細胞様細胞への誘導が成功したと考えられる。一方、HDDPC由来iPS細胞の高度未分化誘導、続く、胚様体形成後、独自の器官培養の結果、三胚葉性の高度に分化した細胞の発生を認めた。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
再生医療では、自己再生能と分化能を有する幹細胞が重要な役割を果たす。脱落乳歯や智歯、矯正治療のために便宜的に抜歯される永久歯から採取される歯髄細胞は、組織再生のための有望な細胞ソースと考えられている。本研究により、ALP(+)HDDPCが多能性幹細胞の特性を有し、それが歯形成に関与する能力が歯組織再構成実験から証明されれば、歯学分野、その他の基礎研究分野への波及効果は大いに期待できる。
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