| 研究課題/領域番号 |
21K10169
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57070:成長および発育系歯学関連
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| 研究機関 | 岩手医科大学 |
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研究代表者 |
黒瀬 雅之 岩手医科大学, 歯学部, 教授 (40397162)
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| 研究分担者 |
竹林 浩秀 新潟大学, 医歯学系, 教授 (60353439)
吉岡 望 新潟大学, 医歯学系, 助教 (20708375)
山村 健介 新潟大学, 医歯学系, 教授 (90272822)
佐藤 大祐 新潟大学, 研究推進機構, 助教 (70778703)
森川 和政 岩手医科大学, 歯学部, 教授 (70514686)
岡本 圭一郎 新潟大学, 医歯学系, 准教授 (50382338)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | ジストニア / 不随意運動 / ニューロパチー / 咀嚼 / 嚥下 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
不随意な筋の協調障害により運動が障害されるジストニアの一症状である口顎部(オーラル)ジストニアは、詳細な病態が明らかになっておらず疾患に対する包括的な理解が進んでいない。本研究では、全身性ジストニア様の運動障害を呈するDst 遺伝子変異マウスを用いて、①病態モデル確立のための表現型解析 ②顎口腔系で発症する不随意運動の原因部位の探索を行う。そのために、原因部位の候補とした脳幹・感覚神経系それぞれに部位選択的にDst発現を抑制したcKOマウス、部位選択的にDst発現を回復したcRescueマウスを作成し、詳細な表現系解析を行い、発症する症状の比較により原因部位を明らかとする。
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| 研究実績の概要 |
不随意な筋の協調障害により運動動作が障害されるジストニアの一症状である口顎部(オーラル)ジストニアは、詳細な病態が明らかになっておらず疾患に対する包括的な理解が進んでいない。本研究計画では、全身性ジストニア様の運動障害を呈するDst 遺伝子 (細胞骨格リンカータンパク質をコードし、変異によりニューロパチーを引き起こす) 変異マウスを用いて、①病態モデル確立のための表現型解析 ②顎口腔系で発症する不随意運動の原因部位の探索について研究を行うことを計画している。具体的には、先行研究で原因部位の候補とした脳幹・感覚神経系それぞれに部位選択的にDst発現を抑制したcKOマウス、部位選択的にDst発現を回復したcRescueマウスを作成し、電気生理学・組織学実験による詳細な表現系解析を行い、発症する症状の比較により原因部位を明らかとする。研究計画の2年目に当たる本年度は、Dst gtマウスの系統がおおよそ確立されたため、ホモマウスを用いた実験を行った。電気生理学的実験として、マウスの舌や硬口蓋に刺激電極を設置した開口反射記録、咬筋と咀嚼筋に筋電図電極を刺入し自由行動下での咀嚼運動・嚥下運動記録、そして組織学的実験を実施した。ホモの個体は、離乳後に早期に衰弱が始まるため、生後3－4週齢程度での実験が必要であり、実験手技の難易度が高いが、咀嚼運動では咬筋と舌骨上筋での明確な同時収縮が観察され、安静時にも両筋の同時収縮が観察されるなど、ワイルド個体では見られない特徴を得ることが出来た。免疫組織学的実験では、ストレスマーカーを用いた研究において、三叉神経節の感覚神経細胞に明確なマーカー発現が見られ、感覚神経細胞の変性という結果を得た。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究課題では、Dstマウスを対象とした電気生理学的並びに免疫組織学的実験を組み込んでいる。その中で、マウス機能の生理学的検索として開口反射を電気的に誘発し、その反射応答誘発までの潜時を計測することを計画に組み込んでいた。野生型マウスでは、個体サイズが大きく、電気刺激によるアーチファクトの影響が少ないが、Dstのホモマウスは、３－４週齢で実験をする必要があり、個体サイズが非常に小さく、電気刺激によるアーチファクトの影響が顕著であった。このため、神経変性の影響を可視化するための開口反射誘発が困難となったため、その代替えプランとして高速度カメラを使った画像解析を行うことした。その準備や記録系の確立のために実験計画はやや遅延している。
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| 今後の研究の推進方策 |
Dstマウスの系統は、本学動物実験センターにて適切に管理され、順調に実験個体を得ることが可能な状況である。進捗状況に記したように、電気生理学的実験の手法に一部変更があったが、高速度カメラの設置はすでに終えており、記録・解析の術式を会得している最中である。次年度は最終年度であり、これまでの成果を学会発表や論文発表の形で公表できるように研究計画を遂行する。
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