| 研究課題/領域番号 |
21K10406
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分58020:衛生学および公衆衛生学分野関連:実験系を含む
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| 研究機関 | 金城学院大学 |
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研究代表者 |
内藤 久雄 金城学院大学, 生活環境学部, 教授 (90547556)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | NASH / 高血圧 / 肝線維化 / エピジェネティクス / DNAメチル化 / Cyp7a1 / プロテオーム / CYP7A1 / プロテオミクス / メチル化 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
NASHモデル動物の高脂肪・高コレステロール飼料摂取により肝線維化進展する原因として、高血圧及びコレステロールが相乗して引き起こすことが考えられた。この研究では、それらに深く関与するCyp7a1遺伝子に着目し、高血圧ラットが何週齢からCyp7a1プロモーター領域のメチル化頻度が高くなるのかを明らかにする。また、降圧剤を投与した実験のプロテオーム解析により高血圧とNASHとの関連を明らかにする。
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| 研究実績の概要 |
先行研究により、高脂肪・高コレステロール飼料（HFC）摂取により引き起こされるラットの肝炎・線維化は、肝臓内への胆汁酸の蓄積が壊死・線維化に進展していることが判明しており、その要因の一つとして高血圧がある。
実験② 8週齢の雄SHR/Ismを4群(各群6匹)に分け、2群に降圧剤ヒドララジン(60 mg/L)を2週間投与（順化）し、残りの2群は通常飼料のみとする。10週齢に達したところで、a) 降圧剤+HFC群、b) 降圧剤+コントロール飼料群、c) HFC群、d)コントロール飼料群とし、8週後(18週齢)で解剖し、各肝臓サンプル調整後、藤田医科大学にある次世代質量分析装置(Orbitrap fusion)でプロテオーム解析自体は終了し、高血圧・脂質摂取による肝炎・線維化と関連するマーカーをいくつか抽出することはできている。
一方、実験①のDNAメチル化解析を昨年度行えなかったため、すでに実験済みのサンプルからDNAを抽出し、次世代s－クエンサー等によりCyp7a1のDNAメチル化頻度の解析を今後行っていく予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
昨年度は6月に転倒・打撲により数か月両手の握力低下があり実験を行えず、研究業務以外の業務も後期に山積みとなり、昨年度は実験自体行う時間を確保できなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
実験①高血圧自然発症ラット（SHR）の血圧は3週齢頃から高くなるが、Cyp7a1プロモーター領域のDNAメチル化頻度は何週齢から増加するのかを明らかにするための実験として、雌雄SHRを交配させ、生後1、3、6、10週間目の雄SHRを解剖して、肝臓サンプル調整し、DNA抽出、バイサルファイト処理後、次世代シークエンサーでCyp7a1プロモーター領域のメチル化頻度を測定する解析を今年度行う（動物実験自体はすでに実施済）。
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