| 研究課題/領域番号 |
21K14901
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分40030:水圏生産科学関連
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
竹内 久登 愛媛大学, 南予水産研究センター, 助教 (80802157)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
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| キーワード | 養殖 / 魚病 / 感染症対策 / マダイ / エドワジエラ症 / マダイイリドウイルス症 / 環境RNA / 非侵襲検査 / RNA |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では，養殖場における環境水をサンプルとした，非侵襲的な魚病検査手法の確立を目指す。魚病細菌に感染させたマダイ飼育水中に放出されるマダイ由来の生体物質 (水中生体物質) の正体を，遺伝子およびタンパク質の網羅的解析により特定するとともに、特定された水中生体物質の免疫学的および分子生物学的手法による定量法を確立する。さらに，魚体の感染状態変化と水中生体物質動態の関係性，および確立された手法の魚病発生の予測性を検証することで，検査マーカーとしての水中生体物質の適用性を評価する。
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| 研究実績の概要 |
昨今、養殖場では様々な魚病が頻発し、養殖魚の生産効率や商品価値を著しく低下させている。魚病被害抑制のためには、密な検査により魚病発生を早期に探知し、発生拡大の前に封じ込め・治療を行うことが不可欠であるが、現行の検査方法は取り上げや解剖による魚体へのダメージから養殖業者に敬遠されている。そこで本研究では環境水をサンプルとした、魚体の取り上げを必要としない非侵襲的な魚病検査手法を確立することを目的とした。
マダイに対する魚病細菌Edwardsiella anguillarumの感染試験を行い、飼育水中のマダイ由来RNA（環境RNA）の網羅的検出を行ったところ、複数の環境RNAが非感染魚飼育水に比べ有意に増加していた。また、これらのうち3つの環境RNAを選定し定量PCR法による定量検出系を確立し、飼育水中の当該RNAの発現動態を調べたところ、対象としたいずれの環境RNAも感染魚飼育水中で非感染魚飼育水に比べ数十～数百倍高く発現しており、またRNAの種類により発現パターンが異なっていた。そこで再度マダイに対するE.anguillarumの感染試験を行い、同様の解析を行ったこところ、確立した3つのRNAはいずれも前回試験と同様の発現動態を示し、再現性が確認された。さらに、これら環境RNAの養殖海域からの検出にも成功したことから、環境RNAは病原体の感染を探知できる非侵襲性マーカーとして魚病検査に応用できる可能性が示された。
また、感染した病原体の種類による環境RNA発現の差を検証するため、マダイイリドウイルス症ウイルスをマダイに感染させ、飼育水中の環境RNAを網羅的に検出した。その結果、E.anguillarum感染時とは異なる環境RNAが優占して検出され、発現する環境RNA組成から感染した病原体種を推定できる可能性が示唆された。
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