| 研究課題/領域番号 |
21K15998
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分53010:消化器内科学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
塩出 悠登 大阪大学, 医学部附属病院, 医員 (10838840)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2023-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2022年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2021年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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| キーワード | 肝内胆管癌 / TRAF3 / NIK / PTEN / 分化転換 / 肝癌 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
胆管細胞癌は予後不良な疾患として知られているが、その発症のメカニズムは明らかではなく、治療法も十分とは言えない。そこで我々はトランスポゾン挿入変異スクリーニング法という新たな手法を用い、胆管がんの新しいがん遺伝子を同定し、同遺伝子を欠損させることで新規の胆管がんモデルマウスを作成した。このマウスは早期に胆管がんを発がんするため、胆管がんの発がんのメカニズムの解明や、またその過程で明らかになる新規の遺伝子を標的とした治療方法の開発を速やかに行うことが可能となった。我々は当マウスを用い、新規の胆管がん治療法の探索を目的とする。
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| 研究実績の概要 |
本研究では本年度で以下のことを明らかにした。 まずTraf3遺伝子が肝細胞から胆管細胞への分化転換に与える影響を肝癌細胞を用いて検討した。肝癌細胞株HepG2を用い、siRNA法でTraf3を抑制すると、肝細胞マーカーの発現抑制と胆管細胞マーカーの発現亢進を認めた。初代培養ヒト肝細胞株でも同様の結果を得た。また、細胞増殖能をIncuCyteを用いて検討したところ、肝癌細胞株HepG2でTraf3を抑制すると細胞増殖能が亢進することがわかった。以上の結果は肝細胞でTraf3が抑制されることで、肝細胞から増殖性の胆管細胞へと分化転換することを示唆するものであった。また我々は本現象における実行因子として非古典的Nf-KB経路でTraf3の下流に存在するNIKに着目した。実際に、肝細胞株・肝癌細胞株でTraf3を抑制するとNIKの発現が亢進し、Traf3を欠損したマウスではNIKの発現が高いということがわかった。また、肝細胞・肝癌細胞でTraf3を抑制したときに起こる胆管細胞への分化転換や細胞増殖の亢進は、NIKを阻害することで抑制されることがわかった。
次にNIKの肝内胆管癌の治療ターゲットとしての有用性を検討するため、以下の実験を行った。肝内胆管癌細胞株でsiRNA法でNIKを抑制したところ、細胞増殖能が低下した。阻害剤を用いてNIKを抑制しても同様の結果が得られた。次に、肝内胆管癌細胞を免疫不全マウスに移植し、NIK阻害剤で治療を行ったところ、NIK阻害剤で治療した個体では腫瘍サイズの有意な縮小が得られた。shRNA法を用いてNIKを抑制した肝内胆管癌細胞株を作成し、同様に免疫不全マウスに移植したところ、対象群と比較して有意な腫瘍縮小が得られた。以上の結果から、NIKは肝内胆管癌の新たな治療ターゲットになりうると考えた。
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