DNA損傷から解明する移植後腎機能発現遅延の病態

• 研究課題/領域番号: 21K16176
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分53040:腎臓内科学関連
• 研究機関: 金沢医科大学
• 研究代表者: 岡田 圭一郎 金沢医科大学, 医学部, 助教 (70835876)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2022年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2021年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: γH2AX / 虚血再灌流障害 / 腎移植 / 移植腎機能発現遅延 / DNA損傷

研究開始時の研究の概要

腎移植時早期に腎機能が十分に発揮されない移植腎機能発現遅延（DGF；Delayed graft function）は、移植腎の予後不良因子である。研究代表者は、移植後1時間目の腎生検標本において、DNA二重鎖切断の指標であるリン酸化ヒストンH2AXの存在を同定し、報告した。また、虚血ストレスなどで誘導されるDNA二本鎖切断に引き続くDNA修復機構は、様々な細胞内での変化を引き起こす事が明らかになりつつ有る。本研究では、腎移植時の虚血ストレスによって発生するDNA損傷が、移植腎機能発現遅延に関与するか否かを明らかにする。

研究実績の概要

移植腎の0時間生検および1時間生検の腎組織を用いて、抗γ-H2AX抗体を用いた免疫染色を検体を新たに追加し、染色した。生体腎移植では、 0時間および1時間後のγ-H2AX陽性率は、有意に低下していた。また、生体腎移植と献腎移植の1時間後のγ-H2AX陽性率に有意差を認め、生体腎移植より献腎移植では移植後1時間で、尿細管障害が強く認める結果となった。0時間γ-H2AX陽性率とその変化率は、生体腎、献腎移植例ともに負の相関を示した。一方、1時間生検γ-H2AX陽性率とその変化率は、献腎移植例において正相関を示すとともにDGF(移植腎機能発現遅延)およびPNF(移植後無機能腎)群では、その変化率(⊿1hr-0hr)が増加傾向を示した。多変量解析(ステップワイズ法)では、移植後のDGFやPNFなどの腎予後のgradeを5段階で評価した場合に、γ-H2AXの変化率とdonorの血清クレアチニン値との関連が強いことが示された。また、移植腎donorの血清クレアチニン値と、0時間と 1時間におけるγ-H2AXの陽性率の差である⊿γ-H2AXは、より重度の腎機能発現遅延を認めた症例およびPNF症例に対する有用な予測因子であった。生体腎移植に比して献腎移植、特にDGFおよびPNFでは、移植後の二本鎖DNA障害に示される尿細管障害が進行し、その機能発現がより遷延している可能性が示された。また、尿細管における移植後0hr、1hrのγ-H2AXの変化率がDGFを予測できる可能性が示された。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

マウスの腎組織標本の染色を免疫蛍光抗体法で行っているが、γH2AXの定量化が困難となっているため。

今後の研究の推進方策

マウス抗体による腎組織標本の染色は、非特異的反応によって定量化が困難であったため、動物種の異なる別の抗体を用いて追加染色を行う。