| 研究課題/領域番号 |
21K17089
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
河合 穂高 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (10803687)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2021年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 口腔癌 / 癌微小環境 / 組織マクロファージ / 口腔扁平上皮癌 / 骨髄由来細胞 / 癌免疫 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究は、Cx3cr1レポーターマウスを用いて組織マクロファージを可視化し、口腔癌の浸潤や転移における同細胞の役割を検討する。申請者は既に腫瘍転移組織において組織マクロファージの関与を示唆する結果を得ており、研究の実現可能性は極めて高い。本研究により腫瘍内の組織マクロファージの表面マーカーや発現因子が明らかになれば、腫瘍の浸潤や転移に重要な組織マクロファージの性格が理解され、組織マクロファージを標的とした分子標的治療など新たな研究領域に発展する可能性がある。
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| 研究実績の概要 |
末梢組織に存在する「組織マクロファージ」は胎児期卵黄嚢由来で、骨髄単球由来の既知のマクロファージと役割や動態が異なることが報告されている。口腔内にも多数の組織マクロファージが存在するが、口腔癌における組織マクロファージの役割はほとんど分かっていない。頭頸部癌における腫瘍随伴マクロファージの臨床的重要性を鑑みても、その動態を明らかにすることは大きな意義がある。本研究は、Cx3cr1レポーターマウスを用いて組織マクロファージを可視化し、口腔癌の浸潤や転移における同細胞の役割を検討する。申請者は既に腫瘍転移組織において組織マクロファージの関与を示唆する結果を得ており、研究の実現可能性は極めて高い。本研究により腫瘍内の組織マクロファージの表面マーカーや発現因子が明らかになれば、腫瘍の浸潤や転移に重要な組織マクロファージの性格が理解され、組織マクロファージを標的とした分子標的治療など新たな研究領域に発展する可能性がある。
本年度は、Cx3crcreER;R26tdTomato マウスの作出を行なった。組織マクロファージは、胎生期7~7.5週 (E7~7.5)に卵黄嚢に出現する早期EMP (Erythromyeloid progenitor) 細胞のうち、Transcription factor Myb依存的にCx3cr1 (CX3C chemokine receptor 1)を発現する卵黄嚢マクロファージが由来と考えられている。Cx3cr1陽性卵黄嚢マクロファージはE8.5に出現し、これらの細胞が組織マクロファージのsourceとなる。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
B6.129-Cx3cr1tm2.1(creERT2)Jung/JとB6.Cg-Gt(ROSA) 26Sor tm14(CAG-tdTomato)Hze/Jを交配させることでCx3cr1creER R26tdTomato マウスを作製する。B6.129;P2(C)-Cx3cr1 tm2.1(creERT2)Jung/Jは、Cx3cr1を発現した細胞にCre-ER(エストロゲン受容体)タンパク質を発現させ、タモキシフェン依存的にCre-loxpシステムを作動させることができる。本実験ではB6.Cg-Gt(ROSA) 26Sor tm14(CAG-tdTomato)Hze/Jと交配させることで、タモキシフェン依存的にCx3cr1陽性細胞にtdTomato（赤色蛍光色素）を発現させる。このマウスのE8.5にタモキシフェンを作用させることで、Cx3cr1陽性卵黄嚢マクロファージにtdTomatoを発現させ、組織マクロファージのみtdTomatoで標識されたマウスを作製することが可能となる。
本年は、マウスの食殺が多く、思うように仔マウスを得ることができなかったが、ここのところマウスが順調増えているため、状況は改善傾向にある。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、目的の仔マウスが順調に増えていることから、本年はタモキシフェン誘導による、組織マクロファージの標識を行う。標識を行ったマウスに、腫瘍細胞を移植し、組織マクロファージの局在を免疫組織化学染色にて確認する。
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