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脂質結合タンパク質の改変による新たな脂質プローブの作出

研究課題

研究課題/領域番号 21K19231
研究種目

挑戦的研究(萌芽)

配分区分基金
審査区分 中区分43:分子レベルから細胞レベルの生物学およびその関連分野
研究機関九州大学

研究代表者

池ノ内 順一  九州大学, 理学研究院, 教授 (10500051)

研究期間 (年度) 2021-07-09 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2022年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2021年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
キーワード膜流動性 / スフィンゴミエリン / コレステロール / 生体膜 / ラフト / 可視化 / リン脂質 / 膜ドメイン
研究開始時の研究の概要

細胞膜の構成要素であるリン脂質には多数の分子種が存在しますが、それらの局在や機能は不明な点が多くあります。特定の脂質分子の局在を可視化する上で、特定の脂質に特異的に結合する脂質結合タンパク質が有用ですが、天然に存在する脂質結合タンパク質の種類は限られています。本研究では、既存の脂質結合タンパク質を改変することにより、可視化できる脂質のレパートリーを拡張し、特定の脂質分子種の機能や各種の病態発症との関連を明らかにします。

研究成果の概要

生体膜において多様な脂質分子種が時空間的に不均一に分布することが、多様な細胞内機能に関わると考えられている。本研究課題では、多様な脂質の混和物として形成される細胞膜の物性を可視化するツールの開発を目指して研究を行った。ピレン骨格色素(PA)は、Lo相では短波長、Ld相では長波長の蛍光を発するソルバトクロミック色素であり、Red/Blueの比によって膜の秩序性を可視化できる。しかし、ピレン骨格色素は膜透過性が高く、形質膜の不均一性については観察が困難であった。今年度は、ピレン色素を改変し、選択的に形質膜に局在化させることによって、形質膜の膜物性の不均一性を可視化するプローブの開発を行った。

研究成果の学術的意義や社会的意義

生体膜は多様な脂質分子種によって構成されており、これらの脂質種が時空間的に不均一に分布することが、多様な細胞内機能に関わると考えられている。人工脂質二重膜において、スフィンゴ脂質やコレステロールは、秩序性の高い膜領域を形成し、他の膜領域と相分離する性質を示すが、生細胞の形質膜の物性が不均一であるかについては、解析手法が限られるため未解明である。本研究では、周囲の膜の物性に依存して異なる波長の蛍光を発する環境依存性プローブを改変し、生体膜の不均一性の可視化するプローブの開発を行った。

報告書

(3件)
  • 2022 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2021 実施状況報告書
  • 研究成果

    (16件)

すべて 2023 2022 2021 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 2件、 招待講演 5件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Cholesterol-rich domain formation mediated by ZO proteins is essential for tight junction formation2023

    • 著者名/発表者名
      Shigetomi Kenta、Ono Yumiko、Matsuzawa Kenji、Ikenouchi Junichi
    • 雑誌名

      Proceedings of the National Academy of Sciences

      巻: 120 号: 8

    • DOI

      10.1073/pnas.2217561120

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Tricellulin secures the epithelial barrier at tricellular junctions by interacting with actomyosin2022

    • 著者名/発表者名
      Cho Yuma、Haraguchi Daichi、Shigetomi Kenta、Matsuzawa Kenji、Uchida Seiichi、Ikenouchi Junichi
    • 雑誌名

      Journal of Cell Biology

      巻: 221 号: 4

    • DOI

      10.1083/jcb.202009037

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書 2021 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] mTORC2 suppresses cell death induced by hypo-osmotic stress by promoting sphingomyelin transport2022

    • 著者名/発表者名
      Ono Yumiko、Matsuzawa Kenji、Ikenouchi Junichi
    • 雑誌名

      Journal of Cell Biology

      巻: 221 号: 4

    • DOI

      10.1083/jcb.202106160

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書 2021 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 上皮細胞におけるスフィンゴミエリンの輸送に関わる分子機構の解析2022

    • 著者名/発表者名
      池ノ内 順一
    • 学会等名
      生理学研究所上皮研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Roles of membrane lipids in the organization of cell-cell adhestion structure.2022

    • 著者名/発表者名
      Junichi Ikenouchi
    • 学会等名
      第60回日本生物物理学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 細胞膜構造形成における脂質の機能解析2022

    • 著者名/発表者名
      池ノ内 順一
    • 学会等名
      第20回 医用分光学研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] mTORC2はスフィンゴミエリン輸送を促進することにより、低浸透圧ストレスによる細胞死を抑制する2022

    • 著者名/発表者名
      小野由美子、松沢健司、池ノ内順一
    • 学会等名
      第45回日本分子生物学会年会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ブレブの動的な振る舞いを制御する分子機構2021

    • 著者名/発表者名
      池ノ内 順一、青木 佳南
    • 学会等名
      第73回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 上皮細胞シートにおける Tricellulin による三細胞間接着の形成機構2021

    • 著者名/発表者名
      長 佑磨、池ノ内 順一
    • 学会等名
      第73回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] MAGI-ASPP を介した細胞の収縮力調節による上皮細胞シートの恒常性維持機構2021

    • 著者名/発表者名
      松沢 健司、池ノ内 順一
    • 学会等名
      第73回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] タイトジャンクション領域における細胞膜脂質の集積機構2021

    • 著者名/発表者名
      重富 健太、池ノ内 順一
    • 学会等名
      第73回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 上皮細胞において mTORC2経路はアピカル膜へのスフィンゴミエリンの輸送を促進することで低浸透圧による細胞死を 抑制する2021

    • 著者名/発表者名
      小野 由美子、池ノ内 順一
    • 学会等名
      第73回日本細胞生物学会大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] Roles of membrane lipids in tight junction formation2021

    • 著者名/発表者名
      Junichi Ikenouchi
    • 学会等名
      4th International TJ Conference 2021
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Roles of membrane lipids in tight junction formation2021

    • 著者名/発表者名
      Junichi Ikenouchi
    • 学会等名
      第51回 生理研国際シンポジウム Frontiers in Epithelial Cell Biology
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [備考] 九州大学理学部生物学科代謝生理学研究室ホームページ

    • URL

      http://www.biology.kyushu-u.ac.jp/~taisha/

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [備考] 研究室のHP

    • URL

      http://www.biology.kyushu-u.ac.jp/~taisha/

    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書

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公開日: 2021-07-13   更新日: 2024-01-30  

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