| 研究課題/領域番号 |
21K19381
|
|---|
| 研究種目 |
挑戦的研究(萌芽)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 審査区分 |
中区分49:病理病態学、感染・免疫学およびその関連分野
|
|---|
| 研究機関 | 九州大学 |
|---|
研究代表者 |
林 哲也 九州大学, 医学研究院, 教授 (10173014)
|
|---|
| 研究分担者 |
田仲 哲也 鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 教授 (00322842)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2021-07-09 – 2024-03-31
|
| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
|
| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2022年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
2021年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
|
|---|
| キーワード | ホロゲノム / トランスクリプトーム / ダニ / 細菌 / 共生 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
様々な病原体を媒介するマダニには多様な微生物が共生しているが、その分子基盤はほとんど明らかになっていない。フタトゲチマダニ（LON）は、紅斑熱リケッチアやSFTSウイルスなどのベクターであるが、LONにはRickettsia longicornii（Rlon）というリケッチアが存在し、経卵感染を介して安定に維持されている。一方、LONについては10年以上にわたって長期継代系が存在する。本研究では、この系を利用して病原体/マダニ共生の分子基盤の解明に挑戦する。
|
| 研究実績の概要 |
リケッチアはマダニと緊密な共生関係にあるが、その相互作用は明らかになっていない。フタトゲチマダニ (LON)には両性と単為生殖系が存在し、多くの両性系株にはR. longicornii (Rlon)が存在し、経卵感染で安定に維持されている。本研究では10年以上にわたって継代されているLON飼育系を利用して、Rlon保有・非保有系を確立し、Rlon共生によるマダニの特性変化を解析するとともに、発育ステージの進行でholotranscriptome解析を行いって両者の共生関係の実態解明と関連遺伝子群の同定を行い、これをモデル系としてマダニと病原体の共生関係の実態解明という研究分野の開拓を目指している。昨年度までにRlonを両性及び単為生殖系LONに腹腔接種し、生き残った個体の一部をウサギに吸血させて産卵させ、産卵・幼ダニの孵化を経て（途中段階でRlon保有をnested PCRで解析）、若ダニを得た。この若ダニ群からランダムに選択した個体のPCR解析の結果ははっきりしなかったが、残りの若ダニを吸血させ、成ダニの取得を目指した。しかし、この段階で大部分の若ダニが死亡し、両性系の雌３個体と雄１個体のみが生き残った。これらを吸血させた結果、いずれも成ダニとなり、雌個体が産卵したため、孵化させた後、幼ダニを経て若ダニを得た。PCRでRlon保有個体が含まれることが確認できたため、140個体を吸血させた結果、110個体の成ダニが得られたが、全て雌であった（10個体につては PCRでRlon保有を確認）。従って、Rlonを接種した両性LONから増殖サイクルを１サイクル回すことができた。しかし、Rlon陽性ダニのtranscriptome解析を行うためには、もう１サイクル回して、確実にRlon陽性となった系統を得る必要があるため、その解析には至らなかった。
|
