| 研究課題/領域番号 |
21K19568
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| 研究種目 |
挑戦的研究(萌芽)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
中区分56:生体機能および感覚に関する外科学およびその関連分野
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| 研究機関 | 名古屋大学 (2022-2023)
京都大学 (2021) |
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研究代表者 |
赤松 秀輔 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (20767248)
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| 研究分担者 |
佐野 剛視 京都大学, 医学研究科, 助教 (60866309)
後藤 崇之 京都大学, 医学研究科, 講師 (90806605)
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| 研究期間 (年度) |
2021-07-09 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2022年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2021年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
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| キーワード | 前立腺癌 / 神経内分泌前立腺癌 / 可塑性 / 固形癌 / スクリーニング / 神経内分泌化 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では独自に樹立した新規神経内分泌前立腺癌(NEPC)細胞株KUCaP13を用いて、NEPCにアンドロゲン受容体(AR)を再発現させる化合物をスクリーニングする。可塑性を制御して、ARを発現しないNEPCから発現する前立腺癌に細胞系統を戻し、新規AR経路阻害剤(ARPI)の感受性再獲得を目指す。本研究の成果はNEPCの治療開発に留まらず、可塑性のメカニズム解明や他癌種の新規治療開発につながると期待され、癌腫の垣根を超えた革新的な研究となる。
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| 研究実績の概要 |
独自に樹立した新規神経内分泌前立腺癌(NEPC)細胞株KUCaP13にアンドロゲン受容体（AR）活性を感知するレポーター遺伝子AREluc(androgen response element luciferase)を、レンチウイルスを用いて導入した。KUCaP13_ARElucと、ポジティブコントロールとしてそこにさらにARを強制発現させたKUCaP13_AREluc_ARを用いて96well plateでルシフェラーゼアッセイを行ったところ、KUCaP13_AREluc_ARでアンドロゲンを加えた細胞のみ発光を認めた。このことから、KUCaP13においてARElucによりAR活性を評価できることを確認した。
続いて本学の「創薬拠点コアラボ」が保持する1552種類の薬剤を用いて化合物スクリーニングを行い、30種類の化合物をヒット化合物として同定した。さらに偽陽性の除外のため2nd screeningを行ったところ、ルシフェラーゼアッセイにおいて30種類の全てのヒット化合物でアンドロゲンを加えないwellでも加えたwellと濃度依存性に同等の発光を認め、偽陽性と考えられた。一部の化合物はARとKLK3のqPCRでも検討を行ったが、ヒット化合物とアンドロゲンをともに加えてもARやKLK3の発現を認めなかった。偽陽性の原因としては化合物のルシフェラーゼ阻害作用が考えられた。
本研究においてNEPC細胞株においてARを再発現させる化合物は同定できなかったものの、NEPCにおける可塑性の可逆性を評価するスクリーニング系を開発した。
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