| 研究課題/領域番号 |
21K20670
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| 研究種目 |
研究活動スタート支援
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
0702:細胞レベルから個体レベルの生物学およびその関連分野
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| 研究機関 | 京都大学 (2022-2023)
公益財団法人神戸医療産業都市推進機構 (2021) |
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研究代表者 |
森 真弓 京都大学, 医学研究科, 特定講師 (70710060)
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| 研究期間 (年度) |
2021-08-30 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
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| キーワード | がん免疫 / 免疫老化 / 代謝 / T細胞 / 老化 / 免疫 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
加齢に伴う生体の変化をもたらすものは、食事・運動・睡眠などの生活そのものから生ずると考えられるが、疾患に直接関与し、かつ外部から調節可能なものは食事と代謝である。老化と代謝が免疫系の中心である T 細胞にどう影響を与えるかを知れば、加齢に伴って増える癌などの疾患に対して T 細胞免疫による抑制手段を考えることができる。実験ではマウスの T 細胞や癌に対し様々な代謝関連の薬剤を用いて効果を解析する。
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| 研究実績の概要 |
本研究では、癌を標的とした免疫細胞における老化因子または抗老化因子を同定し、特にT細胞免疫による癌除去機能に関与する細胞代謝因子の影響を明らかにすることを目標とした。
まず初年度には、抗原特異的なT細胞活性における代謝経路の影響を調べるため、OT-IまたはOT-II TCRトランスジェニックマウス脾臓からT細胞を単離し、各々のTCR特異抗原ペプチド等を用いて刺激した。同時に代謝関連薬剤で処理し、PD1やCD153などの老化指標を比較した。その結果、様々な代謝経路に関わる重要な因子として、まずビタミンDに着目した。
その後はOT-I TCRを持つCD8T細胞に着目してさらに解析することにした。ビタミンDによって、T細胞の生存率や抗原反応と活性化、老化マーカーや細胞増がどう変化するかをフローサイトメトリーにより解析した。またさらに、このT細胞からRNAを抽出し、QPCRによって老化と関わる細胞周期調節因子などの発現を定量的に調べた。
一方、マウス生体実験では、癌抗原特異的なT細胞免疫に対するビタミンDの影響を評価するため、特異抗原を発現するマウス癌細胞株EG7をLy5.1(CD45.1+)マウスに皮下移植し、同時にOT-I T細胞を尾静注して癌を認識させた。培養中のEG7癌細胞の増殖や生存はビタミンDにより直接影響を受けることがわかったため、癌移植マウスにビタミン投与する代わりに、OT-I T細胞をトランスジェニックマウスから単離して培養中にビタミンD処理したものとしていないもので比較解析した。移植癌細胞の増殖とその抑制を、腫瘍体積や重量、癌組織に浸潤したOT-I T細胞数を基準として評価した。
最終年度はこの移植実験を繰り返し、ビタミンDを与えたT細胞がそうでない細胞と同等かそれ以上に癌を縮小させる再現性を確認した。
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