アデノ随伴ウイルスベクターを応用した脳神経疾患に対する細胞遺伝子療法

• 研究課題/領域番号: 22390284
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 脳神経外科学
• 研究機関: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
• 研究代表者: 岡田 尚巳 日本医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00326828)
• 研究分担者: 喜納 裕美 (喜納 裕美(早下裕美) / 早下 裕美) 日本医科大学, 大学院医学研究科 (60532728) ; 岡田 浩典 日本医科大学, 大学院医学研究科 (80416271)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 14,950千円 (直接経費: 11,500千円、間接経費: 3,450千円); 2013年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2012年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2011年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2010年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
• キーワード: 神経疾患 / 遺伝子治療 / AAVベクター / 脳神経疾患 / ウイルス / 遺伝子

研究成果の概要

脳神経疾患に対する新規治療蛋白質補充療法の開発に向け、アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターやその産生細胞を用いた脳組織への新規薬物送達システム基盤技術開発を推進した。従来のベクター精製における密度勾配超遠心操作はGMP生産やSOP管理の観点で不利であったが、イオン交換やゲル濾過クロマトグラフィーを応用し、超遠心操作の省略に成功した。純度の高いベクターを応用することで、脳組織への遺伝子導入や脳神経疾患の治療実験において、安全に効果的な遺伝子導入が可能であった。また、ベクター産生型腫瘍標的細胞の開発に向け、体性幹細胞へのベクターコンポーネント導入条件を確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Robust long-term transduction of common marmoset neuromusculartissue with rAAV1 and rAAV9. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hironori Okada, et al.
  • 雑誌名: Molecular Therapy-Nucleic Acids 巻: 2 ページ: e95-e95
  • DOI: 10.1038/mtna.2013.21
  • 査読あり
• [雑誌論文] Current challenges and future directions in recombinant AAV-mediated gene therapy of Duchenne muscular dystrophy (2013)
  • 著者名/発表者名: Okada, T., Takeda, S
  • 雑誌名: Pharmaceuticals 巻: 6 号: 7 ページ: 813-836
  • DOI: 10.3390/ph6070813
  • 査読あり
• [雑誌論文] Robust long-term transduction of common marmoset neuromuscular tissue with rAAV1 and rAAV9 (2013)
  • 著者名/発表者名: Hironori Okada
  • 雑誌名: Molecular Therapy - Nucleic Acids 巻: IN PRESS
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro cell subtype-specific transduction of adeno-associated virus in mouse and marmoset retinal explant culture (2012)
  • 著者名/発表者名: Baba Y
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 94 号: 12 ページ: 2716-22
  • DOI: 10.1016/j.biochi.2012.08.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protein-anchoring strategy for delivering acetylcholinesterase to the neuromuscular junction (2012)
  • 著者名/発表者名: Ito M, Suzuki Y, Okada T, Fukudome T, Yoshimura T, Masuda A, Takeda S, Krejci E, Ohno K
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: (印刷中) 号: 7 ページ: 1384-1392
  • DOI: 10.1038/mt.2012.34
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term Engraftment of Multipotent Mesenchymal Stromal Cells That Differentiate to Form Myogenic Cells in Dogs With Duchenne Muscular Dystrophy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuko Nitahara-Kasahara, et. al.
  • 雑誌名: Molecular Therapy 巻: 20 号: 1 ページ: 168-177
  • DOI: 10.1038/mt.2011.181
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term functional adeno-associated virus-microdystrophin expression in the dystrophic CXMDj dog (2011)
  • 著者名/発表者名: Koo T, et.al.
  • 雑誌名: J Gene Med 巻: 13 号: 9 ページ: 497-506
  • DOI: 10.1002/jgm.1602
  • 査読あり
• [雑誌論文] MURF1 deficiency suppresses unloading-induced effects on osteoblasts and osteoclasts to lead to bone loss (2011)
  • 著者名/発表者名: Kondo H, et.al.
  • 雑誌名: Gene Ther 巻: 18 号: 9 ページ: 910-919
  • DOI: 10.1038/gt.2011.36
  • 査読あり
• [雑誌論文] Local and retrograde gene transfer into primate neuronal pathways via adeno-associated virus serotype 8 and 9 (2011)
  • 著者名/発表者名: Masamizu Y, et.al.
  • 雑誌名: Neuroscience 巻: 193 ページ: 249-258
  • DOI: 10.1016/j.neuroscience.2011.06.080
  • 査読あり
• [雑誌論文] Improvement of cardiac fibrosis in dystrophic mice by rAAV9-mediated microdystrophin transduction. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shin J.H, et.al.
  • 雑誌名: Gene Therapy 巻: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antisense PMO Found in Dystrophic Dog Model Was Effective in Cells from Exon 7-Deleted DMD Patient. (2010)
  • 著者名/発表者名: Saito T, et.al.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient gene transfer into neurons in monkey brain by adeno-associated virus 8. (2010)
  • 著者名/発表者名: Masamizu Y, et.al.
  • 雑誌名: Neuroreport 巻: 21 ページ: 447-451
  • 査読あり
• [学会発表] Effective Transduction of Connon Marmoset with rAAV1 and 9 To Generate NHP Model of Muscular Dystrophy (2013)
  • 著者名/発表者名: 1. Okada H, Ishibashi H, Hayashita-Kinoh H, Chiyo T, Nitahara-Kasahara Y, Okada T, Takeda S
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 16th Annual meeting
  • 発表場所: Salt Lake City,Utah,USA
• [学会発表] Immune Tolerance Induction in Canine X-LinkedMuscular Dystrophy with Trans-Placental rAAV9-Microdystrophin Transduction (2013)
  • 著者名/発表者名: Hayashita-Kinoh H, Okada H, Nitahara-Kasahara Y, Chiyo T, Yugeta N, Okada T, Takeda S
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 16th Annual meeting
  • 発表場所: Salt Lake City,Utah,USA
• [学会発表] AAV vector-mediated micro-dystrophin transduction with immune-modulation to improve DMD phenotype (2012)
  • 著者名/発表者名: Takashi Okada
  • 学会等名: 9th Japanese-French Symposium for muscular dystrophy
  • 発表場所: Tokyo, JA Kyosai Building Conference Hall
  • 招待講演
• [学会発表] rAAV9-Mediated Microdystrophin Gene Transfer with Immune Tolerance Induction Improves Dystrophic Phenotype of Canine X-Linked Muscular Dystrophy (2012)
  • 著者名/発表者名: Hiromi Hayashita-Kinoh
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 15th Annual meeting
  • 発表場所: Philadelphia, USA; Pennsylvania Convention Center
• [学会発表] Strategy for rAAV9-Mediated Transduction of Common Marmoset Skeletal Muscle To Generate NHP DMD (2012)
  • 著者名/発表者名: Hironori Okada
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 15th Annual meeting
  • 発表場所: Philadelphia, USA; Pennsylvania Convention Center
• [学会発表] rAAV8/9-Mediated Muscle Transduction with Tacrolimus in Non-Human Primate (2012)
  • 著者名/発表者名: Akiko Ishii
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 15th Annual meeting
  • 発表場所: Philadelphia, USA; Pennsylvania Convention Center
• [学会発表] 筋ジストロフィーモデルマーモセットの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 精神・神経疾患開発費「精神・神経・筋疾患の解明のための霊長類モデル開発に関する研究」(主任研究者関和彦)平成23年度班会議
  • 発表場所: NCNP,東京
  • 年月日: 2011-12-21
• [学会発表] AAVベクターを用いた筋ジストロフィー犬免疫寛容誘導療法と機能解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 喜納裕美
  • 学会等名: 精神・神経疾患研究開発費「筋ジストロフィーに対するトランスレーショナル・リサーチ」(主任研究者武田伸一)平成23年度班会議
  • 発表場所: JA共済ビル,東京
  • 年月日: 2011-12-02
• [学会発表] Effective transgene expression in non-human primate muscle with AVV type9 vectors following immune suppression (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishii A
  • 学会等名: 第17回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂,福岡
  • 年月日: 2011-07-17
• [学会発表] AVV empty capsids mediate effective nuclear transportation of moroholino in the muscle cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Hayashita-Kinoh H
  • 学会等名: 第17回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂,福岡
  • 年月日: 2011-07-17
• [学会発表] Distruption of common marmoset dystrophin mRNA to generate non-human primate DMD model (2011)
  • 著者名/発表者名: Okada H
  • 学会等名: 第17回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂,福岡
  • 年月日: 2011-07-16
• [学会発表] Protein-anchoring therapy for delivering acetylcholinesterase to the neuromuscular junction (2011)
  • 著者名/発表者名: Ito M
  • 学会等名: 第17回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂,福岡
  • 年月日: 2011-07-15
• [学会発表] Dystrophic mdx mice are severely compromised with cardiac and respiratory dysfunction by genetic ablation of anti-inflammatory cytokine IL-10 (2011)
  • 著者名/発表者名: Nitahara-Kasahara Y
  • 学会等名: 第17回日本遺伝子治療学会学術集会
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂,福岡
  • 年月日: 2011-07-15
• [学会発表] Immune tolerance induction in canine X-linked muscular dystrophy with rAAV9-microdystrophin transduction (2011)
  • 著者名/発表者名: Kinoh H
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 14^<th> Annual meeting
  • 発表場所: Washington State Convention & Trade Center Seattle, USA
  • 年月日: 2011-05-21
• [学会発表] Long-term engraftment of mesenchymal stromal cells that can differentiate to form myogenic cells in dog with Duchenne muscular dystrophy (2011)
  • 著者名/発表者名: Kasahara Y
  • 学会等名: American society of gene & cell therapy 14^<th> Annual meeting
  • 発表場所: Washington State Convention & Trade Center Seattle, USA
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] 9型AAVベクターを用いた筋ジストロフィー犬胎仔への遺伝子導入と免疫寛容の誘導 (2011)
  • 著者名/発表者名: 喜納裕美
  • 学会等名: 国立精神・神経医療研究センター神経研究所研究所発表会
  • 発表場所: NCNP,東京
  • 年月日: 2011-05-09
• [学会発表] IL-10欠損mdxマウスの作出と病態解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 笠原優子
  • 学会等名: 国立精神・神経医療研究センター神経研究所研究所発表会
  • 発表場所: NCNP,東京
  • 年月日: 2011-05-09
• [学会発表] 遺伝子治療基盤技術の開発と応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: NCNPてんかんセンターリサーチカンファランス
  • 発表場所: NCNP,東京
  • 年月日: 2011-04-14
• [学会発表] 遺伝子治療基盤技術の開発と神経筋疾患治療への応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 国立精神・神経医療研究センター病院ニューロサイエンスセミナー
  • 発表場所: 国立精神・神経医療研究センター/小平
  • 年月日: 2011-01-31
• [学会発表] AAVベクターを用いた筋ジストロフィー犬胎仔遺伝子導入と機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 武田伸一
  • 学会等名: 厚生労働省精神・神経疾患研究委託費筋ジストロフィーに対するトランスレーショナルリサーチ 平成22年度研究班会議
  • 発表場所: 都市センターホテル/千代田区
  • 年月日: 2010-12-14
• [学会発表] ウイルスベクターを用いたコモンマーモセット筋ジストロフィーモデル動物の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 精神・神経疾患研究開発費「精神神経疾患の解明のための霊長類モデル開発に関する研究」(主任研究者 中村克樹)平成22年度班会議
  • 発表場所: 京都大学 霊長類研究所/犬山
  • 年月日: 2010-11-11
• [学会発表] AAVベクターを用いた筋ジストロフィー犬胎児遺伝子導入と機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 喜納裕美
  • 学会等名: 第5回筋ジストロフィー研究合同発表会
  • 発表場所: 元祖うなぎ湯の宿 ゆさや/鳴子
  • 年月日: 2010-10-30
• [学会発表] Induction, of oral immunotolerance to rAAV9-microdystrophin in canine X-linked muscular dystrophy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiromi Hayashita-Kinoh
  • 学会等名: Japan Society of Gene Therapy 16^<th> Annual Meeting
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター/宇都宮
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] Feasibility of adeno-associated virus(AAV)vector-mediated gene therapy for muscular dystrophy : efficacy and safety of AAV serotype 2,8, and 9 in normal primate (2010)
  • 著者名/発表者名: Ayako Ishii
  • 学会等名: Japan Society of Gene Therapy 16^<th> Annual Meeting
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター/宇都宮
  • 年月日: 2010-07-03
• [学会発表] Attractive features of AAV vectors and methods for efficient production. (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 第16回日本遺伝子治療学会
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター/宇都宮
  • 年月日: 2010-07-02
• [学会発表] Scalable purification of AAV1 and AAV8 vectors using dualion-exchange adsorptive membranes. (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 遺伝子治療研究奨励賞講演,第16回日本遺伝子治療学会
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター/宇都宮
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] Long-term engraftment and survival of allogeneic transplantated mesenchymal stromal cells in Duchenne muscular dystrophy dog without immunosuppressant (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuko Nitahara-Kasahara
  • 学会等名: Japan Society of Gene Therapy 16th Annual Meeting
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター/宇都宮
  • 年月日: 2010-07-01
• [学会発表] 遺伝性筋疾患に対する幹細胞治療の現状とこれから～幹細胞で何ができるのか～ (2010)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 学会等名: 世界脳週間2010公開講座
  • 発表場所: ルネこだいら/小平
  • 年月日: 2010-05-22
• [学会発表] Induction of oral immunotolerance to rAAV9-microdystrophin in canine X-linked muscular dystrophy. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiromi Hayashita-Kinoh
  • 学会等名: American Society of Gene & Cell Therapy 13^<th> Annual Meeting
  • 発表場所: Marriot Wardman Park Hotel/Washington D.C
  • 年月日: 2010-05-22
• [学会発表] Cell therapeutic approach to Duchenne muscular dystrophy dog using myogenic differentiation of multipotent mesenchymal stromal cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuko Nitahara-Kasahara
  • 学会等名: American Society of Gene and Cell Therapy 13th Annual Meeting
  • 発表場所: Marriot Wardman Park Hotel/Washington D.C
  • 年月日: 2010-05-20
• [図書] Gene Therapy - Tools and Potential Applications (2013)
  • 著者名/発表者名: Okada, T.
  • 総ページ数: 744
  • 出版者: InTech
• [図書] Efficient AAV vector production system: Towards gene therapy for Duchenne muscular dystrophy (2013)
  • 著者名/発表者名: Takashi Okada
  • 総ページ数: 21
  • 出版者: InTech
• [図書] Progress and Challenges in AAV-Mediated Gene Therapy for Duchenne Muscular Dystrophy (2011)
  • 著者名/発表者名: Okada T, et.al.
  • 出版者: Viral Gene Therapy (ed.by Ke Xu), InTech
• [図書] BIO Clinica (2011)
  • 著者名/発表者名: 岡田尚巳
  • 出版者: 筋疾患の遺伝子治療
• [図書] Gene Therapy and Regulation(ed.by Roger.Bertolotti) (2010)
  • 著者名/発表者名: Okada T, et.al.
  • 出版者: Advances in molecular therapy research on dystrophin-deficient muscular dystrophy.
• [図書] A Guide to Human Gene Therapy(ed.by Roland W.Herzog, Sergei Zolotukhin)
  • 著者名/発表者名: Okada T, et.al.
  • 出版者: Gene therapy for Duchenne muscular dystrophy in press
• [産業財産権] 薬剤取り込み増強剤 (2013)
  • 発明者名: 岡田尚巳、千代智子、武田伸一
  • 権利者名: 国立精神･神経医療研究センター
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2013-03-29
• [産業財産権] 薬剤送達粒子及びその製造方法 (2012)
  • 発明者名: 岡田尚巳，武田伸一，喜納裕美
  • 権利者名: 国立精神･神経医療研究センター
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2012-04-16
• [産業財産権] 薬剤取り込み増強剤 (2012)
  • 発明者名: 岡田尚巳, 千代智子, 武田伸一
  • 権利者名: NCNP
  • 産業財産権番号: 2012-078035
  • 出願年月日: 2012-03-29
• [産業財産権] 薬剤送達粒子及びその製造方法 (2011)
  • 発明者名: 岡田尚巳, 武田伸一, 喜納裕美
  • 権利者名: NCNP
  • 産業財産権番号: 2011-092252
  • 出願年月日: 2011-04-18