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改変型ホスホリパーゼDによるホスファチジルイノシトールの位置異性体選択的合成

研究課題

研究課題/領域番号 22560770
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関名古屋大学

研究代表者

岩崎 雄吾  名古屋大学, 生命農学研究科, 准教授 (50273214)

研究期間 (年度) 2010 – 2012
研究課題ステータス 完了 (2012年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2012年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2011年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2010年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワード生体触媒工学 / ホスホリパーゼD / ホスファチジルイノシトール / 位置特異性 / 酵素反応 / 脂質
研究概要

ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼ Dのを高機能化を試みた.本酵素の 1-PI選択性を高めるため基質結合部位に変異を導入したところ,選択性を向上させることに成功した.次に本酵素の耐熱化のため揺らぎの大きな残基ランダム化したライブラリーからスクリーニングを行い,耐熱性が向上した変異体を獲得した.不安定性ループを除去した変異体を作製したところ,耐熱性はさらに向上した。

報告書

(4件)
  • 2012 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2011 実績報告書
  • 2010 実績報告書
  • 研究成果

    (39件)

すべて 2013 2012 2011 2010

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (33件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Simple and efficient profiling of phospholipids in phospholipase D-modified soy lecithin by HPLC with charged aerosol detection.2013

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovi., Hideo Nakano and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      J. Am. Oil Chem. Soc.

      巻: (in press)

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Phospholipase D as a catalyst: application in phospholipid synthesis, molecular structure and protein engineering.2013

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovi. and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      J. Biosci. Bioeng.

      巻: (in press)

    • NAID

      110009657219

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Simple and efficient profiling of phospholipids in phospholipase D-modified soy lecithin by HPLC with charged aerosol detection.2013

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovic, Hideo Nakano and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      Journal of American Oil Chemists'. Society

      巻: - 号: 7 ページ: 951-957

    • DOI

      10.1007/s11746-013-2236-x

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Phospholipase D as a catalyst: application in phospholipid synthesis, molecular structure and protein engineering.2013

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovic and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: - 号: 3 ページ: 271-280

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2013.03.008

    • NAID

      110009657219

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Improving thermostability of phosphatidylinositol-synthesizing Streptomyces phospholipase D.2012

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovi., Rie Takahashi, Atsuo Suzuki, Hideo Nakano and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      Protein Eng. Des. Sel.

      巻: 25 ページ: 415-424

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Improving thermostability of phosphatidylinositol-synthesizing Streptomyces phospholipase D.2012

    • 著者名/発表者名
      Jasmina Damnjanovic, Rie Takahashi, Atsuo Suzuki, Hideo Nakano and Yugo Iwasaki
    • 雑誌名

      Protein Engineering Design and Selection.

      巻: 25 号: 8 ページ: 415-424

    • DOI

      10.1093/protein/gzs038

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 放線菌ホスホリパーゼD の蛋白工学的機能改変2013

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      酵素工学研究会第69回講演会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 放線菌ホスホリパーゼDの蛋白工学的機能改変2013

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      酵素工学研究会 第69回講演会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Influence of surface loop (D40 loop) deletion on expression and stability of Streptomyces antibioticus phospholipase D2012

    • 著者名/発表者名
      ダムニャノビッチヤスミナ、中野秀雄、岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012大会
    • 発表場所
      京都女子大学
    • 年月日
      2012-03-24
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] 改変型ホスホリパーゼDによるホスファチジルイノシトールの酵素合成2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      学際的脂質創製研究部会
    • 発表場所
      大阪市立工業研究所(招待講演)
    • 年月日
      2012-01-27
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] 改変型ホスホリパーゼD によるホスファチジルイノシトールの酵素合成2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      学際的脂質創製研究部会
    • 発表場所
      大阪
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Influence of surface loop (D40 loop) deletion on expression and stability of Streptomyces antibioticus phospholipase D2012

    • 著者名/発表者名
      ダムニャノビッチヤスミナ,中野秀雄, 岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本農芸化学会2012 大会
    • 発表場所
      京都
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Characterization of Streptomyces antibioticus phospholipase D deletion mutant2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      The 12th Japan-China-Korea Joint Symposium on Enzyme Engineering
    • 発表場所
      Kanazawa
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Synthesis of phosphatidylinositol catalyzed by thermostable variants of Streptomyces phospholipase D2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y
    • 学会等名
      15 th European Congress of Biotechnology
    • 発表場所
      Istanbul, Turkey
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Surface loop deletion as a strategy for enzyme thermostabilization2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      日本生物工学会2012 年大会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼD においてイノシトール配向を決定するアミノ酸残基2012

    • 著者名/発表者名
      石田健,田中秀俊,Damnjanovic Jasmina, 中野秀雄, 岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本生物工学会2012年大会
    • 発表場所
      神戸
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼD におけるイノシトールの配向を決定するアミノ酸残基2012

    • 著者名/発表者名
      石田健,田中秀俊,ダムニャノビッチ・ヤスミナ,中野秀雄,岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第165回例会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 放線菌ホスホリパーゼD の基質特異性改変2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      2012年度酵素補酵素研究会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 改変型ホスホリパーゼD によるホスファチジルイノシトールの合成2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      第11回ホスファチジルセリン研究会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Characterization of Streptomyces antibioticus phospholipase D deletion mutant.2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      The 12th Japan-China-Korea Joint Symposium on Enzyme Engineering
    • 発表場所
      金沢エクセルホテル東急(金沢)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 放線菌ホスホリパーゼDの基質特異性改変 平成24年7月、名古屋2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      2012年度酵素補酵素研究会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Synthesis of phosphatidylinositol catalyzed by thermostable variants of Streptomyces phospholipase D.2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      15th European Congress of Biotechnology
    • 発表場所
      The Grand Cevahir Hotel (Istanbul, Turkey)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Surface loop deletion as a strategy for enzyme thermostabilization.2012

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      日本生物工学会2012年度大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場(神戸)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼDにおいてイノシトール配向を決定するアミノ酸残基2012

    • 著者名/発表者名
      石田健,田中秀俊,Damnjanovic Jasmina、 中野秀雄,岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本生物工学会2012年度大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場(神戸)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼDにおいてイノシトール配向を決定するアミノ酸残基2012

    • 著者名/発表者名
      石田健,田中秀俊,Damnjanovic Jasmina、 中野秀雄,岩崎雄吾
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第165回例会
    • 発表場所
      名古屋大学(名古屋)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 改変型ホスホリパーゼDによるホスファチジルイノシトールの合成2012

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      第11回ホスファチジルセリン研究会
    • 発表場所
      東京海洋大学(東京)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Enzymatic synthesis of phosphatidylinositols by phospholipase D2011

    • 著者名/発表者名
      岩崎雄吾
    • 学会等名
      7th International Symposium on Biocatalysis and Agricultural Biotechnology
    • 発表場所
      京都大学(招待講演)
    • 年月日
      2011-10-11
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] A rapid and efficient HPLC method for profiling of phospholipids from soy lecithin used as substrate for 1(3)-PI synthesis catalyzed by mutant phospholipase D2011

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Takahashi, R., Nakano, H., Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      9th Euro Fed Lipid Congress
    • 発表場所
      Amsterdamオランダ
    • 年月日
      2011-09-19
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Enzymatic synthesis of phosphatidylinositols by phospholipase D2011

    • 著者名/発表者名
      Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      7th International Symposium on Biocatalysis and Agricultural Biotechnology
    • 発表場所
      Kyoto
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Phosphatidylinositol (PI) synthesis using thermostable Streptomyces antibioticus phospholipase D (PLD) mutants2011

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Takahashi, R., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
    • 発表場所
      Sapporo
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] A rapid and efficient HPLC method for profiling of phospholipids from soy lecithin used as substrate for catalyzed by mutant phospholipase D2011

    • 著者名/発表者名
      Damnjanovic, J., Takahashi, R., Nakano, H. and Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      9th Euro Fed Lipid Congress
    • 発表場所
      Amsterdam, Netherland
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Altering substrate specificity of phospholipase D by protein engineering.2010

    • 著者名/発表者名
      Yugo Iwasaki, Atsushi Masayama, Hideo Nakano
    • 学会等名
      International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2010
    • 発表場所
      ホノルル、アメリカ
    • 年月日
      2010-12-17
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] Streptomyces phospholipase D with altered substrate specificity capable of synthesizing phosphatidylinositols2010

    • 著者名/発表者名
      Yugo IWASAKI
    • 学会等名
      8th Euro Fed Lipid Congress
    • 発表場所
      ミュンヘン、ドイツ
    • 年月日
      2010-11-23
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] ボスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼDの位置選択性の解析2010

    • 著者名/発表者名
      尾崎朱里、岩崎雄吾、中寿秀雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第159回例会
    • 発表場所
      名古屋大学(愛知県)
    • 年月日
      2010-10-30
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] ホスホリパーゼを用いたホスファチジルイノジトール異性体の選択的合成2010

    • 著者名/発表者名
      永坂和寛、岩崎雄吾、中野秀雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第159回例会
    • 発表場所
      名古屋大学(愛知県)
    • 年月日
      2010-10-30
    • 関連する報告書
      2010 実績報告書
  • [学会発表] ホスファチジルイノシトール合成型ホスホリパーゼD の位置選択性の解析2010

    • 著者名/発表者名
      尾崎朱里,岩崎雄吾,中野秀雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第159回例会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] ホスホリパーゼを用いたホスファチジルイノシトール異性体の選択的合成2010

    • 著者名/発表者名
      永坂和寛,岩崎雄吾,中野秀雄
    • 学会等名
      日本農芸化学会中部支部第159回例会
    • 発表場所
      名古屋
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Streptomyces phospholipase D with altered substrate specificity capable of synthesizing phosphatidylinositols2010

    • 著者名/発表者名
      Iwasaki, Y.
    • 学会等名
      8th Euro Fed Lipid Congress
    • 発表場所
      Munchen, Germany
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Altering substrate specificity of phospholipase D by protein engineering2010

    • 著者名/発表者名
      Iwasaki, Y., Masayama, A. and Nakano H.
    • 学会等名
      International Chemical Congress of Pacific Basin Societies 2010
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書

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公開日: 2010-08-23   更新日: 2019-07-29  

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