| 研究課題/領域番号 |
22580375
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
環境農学
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
金尾 忠芳 岡山大学, 大学院・環境生命科学研究科, 准教授 (40379813)
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| 連携研究者 |
上村 一雄 岡山大学, 大学院・環境生命科学研究科, 教授 (80294445)
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| 研究期間 (年度) |
2010 – 2012
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| 研究課題ステータス |
完了 (2012年度)
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| 配分額 *注記 |
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2010年度: 2,730千円 (直接経費: 2,100千円、間接経費: 630千円)
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| キーワード | 遺伝子資源 / 無機硫黄化合物 / 硫黄代謝 / 硫黄酸化細菌 / 酵素化学 / 好酸性細菌 / 酵素の結晶化 / refolding / 構造解析 |
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| 研究概要 |
本研究は、硫黄酸化細菌に存在する無機硫黄化合物を基質とした酵素について詳細な解析を行い、この様な細菌の硫黄代謝に対する理解を深めるとともに、「無機硫黄の酵素化学」という新たな学問領域への知見の蓄積を目的とする。鉄硫黄酸化細菌 Acidithiobacillus ferrooxidans を研究の対象とし、硫黄化合物を代謝する酵素であるテトラチオン酸ハイドロラーゼ(4THase)について詳細な研究を行った。本研究課題において、4THaseをコードした遺伝子(Af-tth)が同定され、大腸菌による組換え発現と封入体による回収、新規な酸性条件下でのrefolding法を開発し、これによる活性型酵素を獲得した。さらにこの活性型酵素を高度に精製し、4THaseの結晶化に成功した。本酵素結晶へのX-線照射により2.15Aの回折像を得た。またMAD/SAD法による位相決定のため、セレノメチオニン(Se-Met)置換した本酵素の結晶の作製を行い、2.8 Aの回折像を得た。これらのデータを基に本酵素の立体構造を決定する作業を行っている。
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