生体防御機構を基盤とした腸管出血性大腸菌O157感染症の予防・治療法の開発

• 研究課題/領域番号: 22590256
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 小林 英幸 産業医科大学, 医学部, 教授 (40148953)
• 研究分担者: 森井 宏幸 産業医科大学, 医学部, 准教授 (60141743) ; 藤井 潤 鳥取大学, 医学部, 教授 (60271441) ; 大原 直也 岡山大学, 医歯薬総合研究科, 教授 (70223930)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2011年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 腸管出血性大腸菌 / ベロ毒素 / 感染症 / ワクチン / BCG / 遺伝子組み換え / 生理活性ペプチド / α抗原 / 生体防御機構 / 脳微小血管

研究概要

BCGにベロ毒素のB-サブユニット遺伝子を組み込んだに対するワクチンを作成した。このワクチンをマウスに投与しておくと、腸管出血性大腸菌の経口感染による致死率が減少したことにより、このワクチンの有用性が確認された。
一方、培養ヒト脳血管内皮細胞にベロ毒素を添加すると、多種の生理活性ペプチドの発現が変化した。サイトカインの発現が大きく上昇し、ベロ毒素により脳血管内皮細胞と白血球との相互作用が変化することが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Investigation of Encephalopathy Caused by Shiga Toxin 2c-Producing Escheriohia ooli Infection in Mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Amran M. Y., Fujii J., Suzuki S. 0., Kolling G. L.,Villanueva A. M.,Kainunla M., Kobayashi H., Kanleyanla H. and Yoshida S
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8 号: 3 ページ: e58959-e58959
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0058959
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antigen 85A and mycobacterial DNA-binding protein 1 are targets of immunoglobulin G in individuals with past tuberculosis (2013)
  • 著者名/発表者名: Osada-Oka M, Tateishi Y, Hirayama Y, Ozeki Y, Niki M, Kitada S, Maekura R, Tsujimura K, Koide Y, Ohara N, Yamamoto T, Kobayashi K, Matsumoto S
  • 雑誌名: Microbiol. Immunol 巻: 57 ページ: 30-37
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antigen 85A and mycobacterial DNA-binding protein 1 are targets of immunoglobulin G in individuals with past tuberculosis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Osada-Oka M., Tateishi Y., Hirayama Y., Ozeki Y., Niki M., Kitada S., Maekura R., Tsujimura K., Koide Y., Ohara N., Yamamoto T., Kobayashi K., Matsumoto S.
  • 雑誌名: Microbiol. Immunol. 巻: 57 ページ: 30-37
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protection by recombinant Bacillus Calmette-Guerin vaccine expression Shiga toxin 2B subunit against Shiga toxin producing Escherichia coli in mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujii J., Naito M., Yutsudo T., Heatherly D., Yamada T., Kobayashi H., Yoshida S. and Obrig T
  • 雑誌名: Clin. Vac. Imnunol 巻: 19 号: 12 ページ: 1932-1937
  • DOI: 10.1128/cvi.00473-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] Current progress in tuberculosis and recombinant BCG vaccines (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohara N
  • 雑誌名: J. Oral. Biosci 巻: 54 ページ: 92-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] Current progress in tuberculosis and recombinant BCG vaccines. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohara N.
  • 雑誌名: J. Oral. Biosci. 巻: 54 ページ: 92-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipidphenotype of two distinct subpopulations of Vayo ohaoteri um bovis Bacillus Calmette-Guerin Tokyo 172 substrain (2011)
  • 著者名/発表者名: Naka T., Maeda S., Niki M., Ohara N., Yamamoto S.,Yano I.,Maeyama J.,Ogura H., Kobayashi K.,Fujiwara N
  • 雑誌名: Biol. Chem 巻: 286 ページ: 44153-44161
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipid phenotype of two distinct subpopulations of Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin Tokyo 172 substrain (2011)
  • 著者名/発表者名: Naka T., Maeda S., Niki M., Ohara N, Yamamoto S., Yano I., Maeyama J., Ogura H., Kobayashi K., Fujiwara N.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 286 ページ: 44153-44161
  • 査読あり
• [雑誌論文] BCGワクチンの新たな活用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大原直也
  • 雑誌名: 岡山歯誌 巻: 30 ページ: 51-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppressed induction of mycobacterial antigen-specific Th1-type CD4+Tcells in the lung after pulmonary mycobacterial infection (2010)
  • 著者名/発表者名: Yahagi, A., Umemura, M., Tamura, T., Kariyone, A., Begum, M. D., Kawakami, K., Okamoto, Y., Hamada, S., Oshiro, K., Kohama, H., Arakawa, T., Ohara, N., Takatsu, K., Matsuzaki, G
  • 雑誌名: Int. Immunol 巻: 22 号: 4 ページ: 307-318
  • DOI: 10.1093/intimm/dxq010
  • 査読あり
• [雑誌論文] アグリン(キーワード解説) (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林英幸、森井宏幸
  • 雑誌名: 日薬理誌 巻: 135 ページ: 215-216
  • 査読あり
• [雑誌論文] アグリン (2010)
  • 著者名/発表者名: 小林英幸, 森井宏幸
  • 雑誌名: 日薬理誌 巻: 135 ページ: 215-216
  • NAID: 10026439433
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppressed induction of mycobacterial antigen-specific Thl-type CD4+ T cells in the lung after pulmonary mycobacterial infection.. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yahagi, A., Umemura, M., Tamura, T., Kariyone, A., Beg-um, M.D., Kawakami, K., Okamoto, Y., Hamada, S., Oshiro, K., Kohama, H., Arakawa, T., Ohara, N., Takatsu, K., Matsuzaki, G.
  • 雑誌名: Int.Immunol 巻: 22 ページ: 307-318
  • 査読あり
• [学会発表] 結核菌/BCGのストレプトマイシン耐性・依存性に関する新たな知見 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁,阿戸学,黒田誠,山崎利雄,松村隆之,関塚剛史,中山真彰,井上哲圭,本田尚子,土田耕三,小林和夫,大原直也
  • 学会等名: 第82回実験結核研究会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
  • 年月日: 2012-05-09
• [学会発表] 抗酸菌のslidingmotilityと非貧食細胞への取り込みの関連性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 岡部真裕子,大原直也,藤原永年,中崇,阿戸学,小林和夫
  • 学会等名: 第82回実験結核研究会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
  • 年月日: 2012-05-09
• [学会発表] マウスモデルを使った腸管出血性大腸菌感染O157による脳症発症メカニズムの解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤井潤、Amran MY、吉田真一
  • 学会等名: 第85回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール(長崎)
  • 年月日: 2012-03-27
• [学会発表] 腸管出血性大腸菌感染症による急性脳症の発症機序・診断と治療法の展望、シンポジウム「腸管出血性大腸菌の現状-その病態と疫学-」 (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤井潤
  • 学会等名: 平成23年度日本獣医師会獣医学術学会年次大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)(招待講演)
  • 年月日: 2012-02-03
• [学会発表] Risk factors for hemolytic uremic syndrome caused by Shiga toxin-producing Escherichia coli infection in Japan (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujii J., Mizoue T., Nakada Y.,Ugajin S.,Naya Y.,Nakamura T.,Saitoh K.,Maruyama Y., Tada Y., Okabe N. and Yoshida S
  • 学会等名: 8^<th> International Symposium on Shiga toxin (Verocytotoxin)- producing Escherichia coli infection
  • 発表場所: RAI Forum Complex, Amsterdam, The Netherlands
• [学会発表] Effectiveness azithromycin and/or Chinese medicine in the early and late stage of Shiga toxin-producing Escherichia coli-infected mouse models (2012)
  • 著者名/発表者名: Amran MY, Fujii J, Yoshida S
  • 学会等名: 8^<th> International Symposiunl on Shiga toxin (Verocytotoxin)-producing Escherichia coli infection
  • 発表場所: RAI Forum Complex, Amsterdam, The Netherlands
• [学会発表] ストレプトマイシン依存性結核菌18bの依存性に関与する遺伝子変異の解明と新たなストレプトマイシン耐性を誘導する変異の発見 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁,山崎利雄,小林和夫,大原直也
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] BCG Tokyo type I, II株の形態及び脂質分子の分布と機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤原永年,中崇,前田伸司,柴田満,仁木満美子,大原直也,前山順一,矢野郁也,山本三郎
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] Mycobacterium avium 亜種 (avium・hominissuis)間での酸性環境下における菌体外pH上昇に関与するアンモニア産生経路の研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 花村菜.月,堀田康弘,小川賢二,八木哲也,西森敬,大原直也,藤原永年,前田伸司,山崎利雄,伊藤佐生智,瀧井猛将
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] Lipid Phenotypes of Two Distinct Subpopulations of Mycobacterium bovis Bacillus Calnlette-Guerin Tokyo 172 Substrain and their Host Responses (2012)
  • 著者名/発表者名: Naka, T.,Maeda S.,Niki M., Ohara N.,Yamamoto S.,Yano I.,Maeyama J.,Ogura H.,Kobayashi K., Shibata M., and Fujiwara N
  • 学会等名: American Society for Microbiology 112th General Meeting
  • 発表場所: Moscone Center, San Francisco, U.S.A
• [学会発表] Investigation of acute encephalopathy caused by Shiga toxin 2c-producing enterohemorrhagic E. coli 0157 in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujii J, Amran MY, Yoshida S
  • 学会等名: U.S.-Japan cooperarive medical science program
  • 発表場所: Chiba University, Chiba Japan
• [学会発表] Risk factors for hemolytic uremic syndrome caused by Shiga toxin-producing Escherichia coli infection in Japan. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujii J., Mizoue T., Nakada Y., Ugajin S., Naya Y., Nakamura T., Saitoh K., Maruyama Y., TadaY., Okabe N., Yoshida S.
  • 学会等名: 8th International Symposium on Shiga toxin (Verocytotoxin)- producing Escherichia coli infection
  • 発表場所: RAI Forum Complex, Amsterdam, The Netherlands
• [学会発表] Effectiveness azithromycin and/or Chinese medicine in the early and late stage of Shiga toxin-producing Escherichia coli-infected mouse models. (2012)
  • 著者名/発表者名: Amran M.Y., Fujii J., Yoshida S.
  • 学会等名: 8th International Symposium on Shiga toxin (Verocytotoxin)-producing Escherichia coli infection
  • 発表場所: RAI Forum Complex, Amsterdam, The Netherlands
• [学会発表] 結核菌／BCGのストレプトマイシン耐性・依存性に関する新たな知見． (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁，阿戸学，黒田誠，山崎利雄，松村隆之，関塚剛史，中山真彰，井上哲圭，本田尚子，土田耕三，小林和夫，大原直也
  • 学会等名: 第82回実験結核研究会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] 抗酸菌のsliding motilityと非貪食細胞への取り込みの関連性． (2012)
  • 著者名/発表者名: 岡部真裕子，大原直也，藤原永年，中崇，阿戸学，小林和夫
  • 学会等名: 第82回実験結核研究会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] ストレプトマイシン依存性結核菌18bの依存性に関与する遺伝子変異の解明と新たなストレプトマイシン耐性を誘導する変異の発見． (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁，山崎利雄，小林和夫，大原直也
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] BCG Tokyo type I, II株の形態及び脂質分子の分布と機能． (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤原永年，中崇，前田伸司，柴田満，仁木満美子，大原直也，前山順一，矢野郁也，山本三郎
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] Mycobacterium avium亜種（avium・hominissuis）間での酸性環境下における菌体外pH上昇に関与するアンモニア産生経路の研究． (2012)
  • 著者名/発表者名: 花村菜月，堀田康弘，小川賢二，八木哲也，西森敬，大原直也，藤原永年，前田伸司，山崎利雄，伊藤佐生智，瀧井猛将
  • 学会等名: 第87回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場、広島
• [学会発表] Lipid Phenotypes of Two Distinct Subpopulations of Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin Tokyo 172 Substrain and their Host Responses. (2012)
  • 著者名/発表者名: Naka T., Maeda S., Niki M., Ohara N., Yamamoto S., Yano I., Maeyama J., Ogura H., Kobayashi K., Shibata M., Fujiwara N.
  • 学会等名: American Society for Microbiology 112th General Meeting
  • 発表場所: Moscone Center, San Francisco，U.S.A.
• [学会発表] Investigation of acute encephalopathy caused by Shiga toxin 2c-producing enterohemorrhagic E. coli O157 in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujii J., Amran M.Y., Yoshida S.
  • 学会等名: U.S.-Japan cooperarive medical science program
  • 発表場所: Chiba University, Chiba
• [学会発表] Analysis of the 16S rRNA gene of the streptomycin-dependent Mycobacterium tuberculosis strain 18b and phenolypic revenant strains (2011)
  • 著者名/発表者名: Sato N., Ato M., Yamazaki T., Kuroda M., Matsumura T., Sekizuka T., Nakayama M., Honda, N., Tsuchida, K., Kobayashi K., Ohara N
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(横浜)
  • 年月日: 2011-12-16
• [学会発表] Successful azithromycin and Daiou combination treated of mouse model orally infected with Shiga toxin-producing Escherichia coli (2011)
  • 著者名/発表者名: Amran MY, Fujii J, Yoshida S
  • 学会等名: 46^<nd> Annual joint panel meeting, Cholera and other bacterial enteric infections, U.S.-Japan cooperarive medical science program
  • 発表場所: Hyatt Regency Hotel (Kolkata)
  • 年月日: 2011-12-12
• [学会発表] Streptomycin依存性結核菌における遺伝子変異の解明とStreptomycin耐性を誘導する新たな遺伝子変異 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁、阿戸学、松村隆之、山崎利雄、関塚剛史、黒田誠、中山真章、井上哲圭、本田尚子、土田耕三、小林和夫、大原直也
  • 学会等名: 第64回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: 岡山大学(岡山)
  • 年月日: 2011-10-22
• [学会発表] Proteomic analysis of urine of rats infected with Leptospira interogans serovar Manilae (2011)
  • 著者名/発表者名: Segawa T, Nomura K, Villanueva SYAM, Fujii J, Yoshida S
  • 学会等名: International Leptosirosis Society
  • 発表場所: Unversidad AutOnoma de Yucatan (Yucatan)
  • 年月日: 2011-09-19
• [学会発表] Successful azithromycin treatment of a fatal neurological mouse model orally infected with and Shiga toxin 2c-producing Escherichia coli O157:H (2011)
  • 著者名/発表者名: Amran MY, Fujii J., Yoshida S
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] Proteomic analysis of urine of rats infected with Leptospira interogans serovar Manilae (2011)
  • 著者名/発表者名: Segawa T., Nomura K., Villanueva SYA, Nomura K, Fujii J, Yoshida S
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies 2011 Congress
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] Identification of the novel mutations in 16S rRNA gene of the substrains of a streptomycin-dependent Mycobacterium tuberculosis Strain18b which confer streptomycin resistance in Mycobacterium (2011)
  • 著者名/発表者名: Sato N., Ato M., Matsumura T., Yamazaki T., Sekizuka T., Kuroda M., Nakayama M., Kobayashi K., Ohara N
  • 学会等名: XIII International Congress of Bacteriology and Applied Microbiology. International Union of Microbiological Societies
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] Gene expression profile of in a thymidine synthase ThyX-deletion mutant of Mycobacterium bovis BCG (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohara N., Satoh N., Nakayama M., Okabe M, Kobayashi K
  • 学会等名: XIII International Congress of Bacteriology and Applied Microbiology. International Union of Microbiological Societies
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(札幌)
  • 年月日: 2011-09-10
• [学会発表] わが国において成人女性は腸管出血性大腸菌感染による溶血性尿毒症症候群のリスク要因である (2011)
  • 著者名/発表者名: 藤井潤、溝上哲也、北敏郎、城宏輔、岸本宏志、名矢結香、中村勤、中田友里、宇賀神貞夫、斎藤京子、丸山保夫、多田有希、岡部信彦、吉田真一
  • 学会等名: 第15回腸管出血性大腸菌感染症研究会
  • 発表場所: 北浜フォーラム(大阪)
  • 年月日: 2011-07-15
• [学会発表] 抗酸菌におけるセカンドメッセンジャーの利用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐藤法仁、中山真彰, 岡部真裕子, 小林和夫、大原直也
  • 学会等名: 第86回実験結核研究会
  • 発表場所: 大妻講堂(東京)
  • 年月日: 2011-06-01
• [学会発表] 抗酸菌のチミジル酸合成酵素の研究と新たなBCGワクチン作製の試み (2010)
  • 著者名/発表者名: 大原直也
  • 学会等名: 第690回獣医学研究談話会
  • 発表場所: 北海道大学(札幌)
  • 年月日: 2010-10-14
• [学会発表] マイコバクテリアのチミジル酸合成酵素と組換えBCGワクチンシンポジウム口腔と関連器官の感染症5W1Hなぜわたしはこの研究をしているのか (2010)
  • 著者名/発表者名: 大原直也
  • 学会等名: 第52回歯科基礎医学会学術大会
  • 発表場所: タワーホール船堀(東京)
  • 年月日: 2010-09-22
• [学会発表] Analysis of RD16 locus in the BCG Tokyo 172 genome.Forty-fifth Joint Research Conference on Leprosy and Tuberculosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohara, N., Okabe, M., Yamamoto, S., Takii, T., Fujiwara, N., Maeyama, J., Nakayama, M., Kobayashi, K.
  • 学会等名: The United State-Japan Cooperative Medical Science Program
  • 発表場所: Broad Institute (Cambridge, Massachusetts, U.S.A.)
  • 年月日: 2010-07-15
• [学会発表] Isolation and characterization of a rpoZ mutant of Mycobacterium smegmatis.Forty-fifth Joint Research Conference on Leprosy and Tuberculosis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Taniguchi, H., Nomoto, M., Ogawa, M., Fukuda, K., Ohara, N., Fujiwara, N.
  • 学会等名: The United State-Japan Cooperative Medical Science Program
  • 発表場所: Broad Institute (Cambridge, Massachusetts, U.S.A.)
  • 年月日: 2010-07-14
• [学会発表] 形態の異なるBCG Tokyo 172亜種間の脂質生化学的比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 藤原永年, 前田伸司, 吉村満美子, 大原直也, 前山順一, 瀧井猛将, 矢野郁也, 山本三郎
  • 学会等名: 第85回日本結核病学会総会
  • 発表場所: 京都テルサ(京都)
  • 年月日: 2010-05-20
• [学会発表] BCG Tokyo 172株に存在するサブポピュレーション間の遺伝子発現の比較発現の比較検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大原直也, 岡部真裕子, 山本三郎, 瀧井猛将, 藤原永年, 前山順一, 佐藤法仁, 井上哲圭, 小林和夫
  • 学会等名: 第80回実験結核研究会
  • 発表場所: 京都テルサ(京都)
  • 年月日: 2010-05-19
• [学会発表] DNAマイクロアレイを用いたBCG Tokyo 172-1に存在するサブポピュレーションの遺伝子発現の比較検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大原直也, 山本三郎, 瀧井猛将, 藤原永年, 前山順一, 小林和夫
  • 学会等名: 第80回実験結核研究会
  • 発表場所: 京都テルサ(京都)
  • 年月日: 2010-05-19