化学遺伝学研究法を用いたヒトES細胞の未分化維持・分化制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 22590269
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 川瀬 栄八郎 京都大学, 再生医科学研究所, 講師 (70402790)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2011年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: ヒトES細胞 / 化合物ライブラリ / 未分化維持 / 分化制御

研究概要

化学遺伝学研究法を用いて、ある種の類似化学構造をもった神経伝達物質拮抗剤はヒトES細胞の未分化維持・増殖に効果があることを見出した。これらの化合物を用いることでヒトES細胞の未分化維持・増殖に不可欠な役割を果たしていると考えられているbFGFを培地中に添加することなく、ヒトES細胞の長期培養が可能になった。長期培養後も細胞は未分化状態を示し、正常染色体であり、多分化能を有していた。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of small molecules that promote human embryonic stem cell self-renewal. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kumagai, H., Suemori, H., Uesugi, M., Nakatsuji, N. and Kawase, E
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 434 号: 4 ページ: 710-716
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.03.061
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recombinant E8 fragments of human laminin isoforms support long-term culture of human pluripotent stem cells under defined and xeno-free culture conditions. (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki, T., Futaki, S., Suemori, H., Taniguchi,Y., Kawasaki, M., Hayashi, M., Kumagai,H., Nakatsuji, N., Sekiguchi, K. and Kawase, E
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 13 号: 1 ページ: 1236-1236
  • DOI: 10.1038/ncomms2243
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient and Accurate Homologous Recombination in hESCs and hiPSCs Using Helper-dependent Adenoviral Vectors (2011)
  • 著者名/発表者名: Aizawa E, Hirabayashi Y, Iwanaga Y, Suzuki K, Sakurai K, Shimoji M, Aiba K, Wada T, Tooi N, Kawase E, Suemori H, Nakatsuji N, Mitani K
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 6 号: 2 ページ: 424-431
  • DOI: 10.1038/mt.2011.266
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cardiomyocytes develop from anterior primitive streak cells induced by β-catenin activation and the blockage of BMP signaling in hESCs. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamauchi, K., Sumi, T., Minami, I., Otsuji, T.G., Kawase, E., Nakatsuji, N., Suemori, H
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 15 (12) 号: 12 ページ: 1216-1227
  • DOI: 10.1111/j.1365-2443.2010.01455.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of SOX2 in maintaining pluripotency of human embryonic stem cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Adachi, K., Suemori, H., Yasuda, S. -Y., Nakatsuji N. and Kawase, E
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 15 (5) ページ: 455-469
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient system to integrate functional genes into a defined locus in human embryonic stem cell lines (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakurai, K., Shimoji, M., Tahimic, CGT., Aiba, K., Kawase, E., Hasegawa, K, Amagai, Y., Suemori, H., Nakatsuji, N
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res 巻: 38 (7)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient system to integrate functional genes into a defined locus in human embryonic stem cell lines. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sakurai, et al.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 巻: 38
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of SOX2 in maintaining pluripotency of human embryonic stem cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Adachi, et al.
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 15 ページ: 455-469
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cardiomyocytes develop from anterior primitive streak cells induced by β-catenin activation and the blockage of BMP signaling in hESCs. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamauchi, et al.
  • 雑誌名: Genes to Cells 巻: 15 ページ: 1216-1227
  • 査読あり
• [学会発表] ラミニンE8フラグメントを用いたヒトES/iPS細胞の単一分散培養法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 宮崎隆道、二木杉子、末盛博文、山田雅司、川崎美和、林麻利亜、熊谷英明、中辻憲夫、関口清俊、川瀬栄八郎
  • 学会等名: 第12回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-23
• [学会発表] Fluorescent Chemical Probes for Human Stem Cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Nao Hirata, Masato Nakagawa, Yuto Fujibayashi, Kaori Yamauchi, Asako Murata,Itsunari Minami, Maiko Tomioka, Takayuki Kondo, Ting-Fang Kuo, Hiroshi Endo,Haruhisa Inoue, Shin-ichi Sato, Shin Ando,Yoshinori Kawazoe, Kazuhiro Aiba, Koh
  • 学会等名: Cira International Symposium
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2013-03-11
• [学会発表] Fluorescent Chemical Probes for Human Stem Cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nao Hirata et al.,
  • 学会等名: 2013 Cira International Symposium
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] RECOMBINANT HUMAN LAMININ E8 FRAGMENTS (LM-E8s) SUPPORT THE EFFICIENT ADHESION AND EXPANSION OF DISSOCIATED HUMAN PLURIPOTENT STEM CELLS UNDER DEFINED AND XENO-FREE CONDITION (2012)
  • 著者名/発表者名: Takamichi Miyazaki, Sugiko Futaki, Hirofumi Suemori, Yukimasa Taniguchi, Masashi Yamada, Miwa Kawasaki, Maria Hayashi, Hideaki Kumagai, Norio Nakatsuji, Kiyotoshi Sekiguchi, Eihachiro Kawase
  • 学会等名: 2012 World Stem Cell Summit
  • 発表場所: West Palm Beach, USA
  • 年月日: 2012-12-03
• [学会発表] Recombinant E8 fragments of human laminin isoforms support the efficient adhesion and expansion of dissociated human pluripotent stem cells under defined and xeno-free condition. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takamichi Miyazaki, Sugiko Futaki, Hirofumi Suemori, Yukimasa Taniguchi, Masashi Yamada, Miwa Kawasaki, Maria Hayashi, Hideaki Kumagai, Norio Nakatsuji, Kiyotoshi Sekiguchi, Eihachiro Kawase
  • 学会等名: 10thInternational Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 2012-06-15
• [学会発表] Manufacturing and banking of clinical-garade human embryonic stem cell lines in a GMP facility (2012)
  • 著者名/発表者名: Takada, Kei, Hirai, Masako, Kawase, Eihachiro, Hamao, Mari, Kashigi, Fumi, Suemori, Hirofumi, Nakatsuji, Norio, Takahashi, Tsuneo A
  • 学会等名: 10thInternational Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 2012-06-15
• [学会発表] Applications of scalable culture system for clinical-grade undifferentiated human embryonic stem cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawase E
  • 学会等名: Wednesday Industry Symposia, 10thInternational Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 2012-06-13
• [学会発表] RECOMBINANT HUMAN LAMININ E8 FRAGMENTS (LM-E8s) SUPPORT THE EFFICIENT ADHESION AND EXPANSION OF DISSOCIATED HUMAN PLURIPOTENT STEM CELLS UNDER DEFINED AND XENO-FREE CONDITION. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawase, E. et al.,
  • 学会等名: 2012 World Stem Cell Summit
  • 発表場所: West Palm Beach、アメリカ合衆国
• [学会発表] Recombinant E8 fragments of human laminin isoforms support the efficient adhesion and expansion of dissociated human pluripotent stem cells under defined and xeno-free condition. (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki, T. et al.,
  • 学会等名: 10th International Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
• [学会発表] Manufacturing and banking of clinical-garade human embryonic stem cell lines in a GMP facility. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takada, K. et al.,
  • 学会等名: 10th International Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
• [学会発表] Applications of scalable culture system for clinical-grade undifferentiated human embryonic stem cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawase, E.
  • 学会等名: Wednesday Industry Symposia, 10th International Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Yokohama
  • 招待講演
• [学会発表] Fluorescent chemical probes for human stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nao Hirata,Masato Nakagawa,Yuto Fujibayashi, Kaori Yamauchi, Asako Murata, Eihachiro Kawase, Shin-ichi Sato, Shin Ando,Young-Tae Chang, Hirofumi Suemori,Norio Nakatsuji,Kazumitsu Ueda, Shinya Yamanaka, Motonari Uesugi.
  • 学会等名: AIMECS11 8thAFMC International Medical Chemistry Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2011-11-29
• [学会発表] Fluorescent chemical probes for human stem cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Nao Hirata, et al
  • 学会等名: IMECS11 8th AFMC International Medical Chemistry Symposium
  • 発表場所: Tokyo
  • 年月日: 2011-11-29
• [学会発表] Homologous Recombination in human pluripotent stem cells using helper-dependent adenovirua vectors (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, K., Hirabayashi, Y., Aizawa, E., Iwanaga, Y., Tokumitsu, A., Sakurai, K., Shimoji, M., Aiba, K., Wada, T., Tooi, N., Kawase, E. Suemori, H., Nakatsuji, N. and Mitani, K
  • 学会等名: 9thInternational Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Toronto, Canada
  • 年月日: 2011-06-17
• [学会発表] Homologous Recombination in human pluripotent stem cells using helper-dependent adenovirua vectors (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, K., et al
  • 学会等名: 9th International Society for Stem Cell Research
  • 発表場所: Toronto(カナダ)
  • 年月日: 2011-06-17
• [学会発表] ヒトES細胞の未分化維持因子の探索を (2011)
  • 著者名/発表者名: 熊谷英明、末盛博文、上杉志成、中辻憲夫、川瀬栄八郎
  • 学会等名: 第10回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-03-01
• [学会発表] ヒトES細胞の未分化維持因子の探索を目的としたHigh content analysis (HCA) (2011)
  • 著者名/発表者名: 熊谷英明、末盛博文、上杉志成、中辻憲夫、川瀬栄八郎
  • 学会等名: 第10回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-03-01
• [学会発表] β-cateninの活性化およびBMPシグナルの抑制による原条前側領域の形成を経由したヒトES細胞から心筋細胞への分化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山内香織、角智行、南一成、尾辻智美、川瀬栄八郎、中辻憲夫、末盛博文
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] High Content Analysis (HCA)によるヒトES細胞の未分化維持因子の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 熊谷英明、末盛博文、上杉志成、中辻憲夫、川瀬栄八郎
  • 学会等名: High Content Analysis (HCA)によるヒトES細胞の未分化維持因子の探索
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] High Content Analysis (HCA)によるヒトES細胞の未分化維持因子の探索 (2010)
  • 著者名/発表者名: 熊谷英明、末盛博文、上杉志成、中辻憲夫、川瀬栄八郎
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] Gene targeting in human pluripotent stem cells with adeno-associated virus vectors (2010)
  • 著者名/発表者名: Ko Mitani, Kaoru Mitsui, Keiichiro Suzuki, Emi Aizawa, Haruka Shiiba, Eihachiro Kawase, Hirofumi Suemori, Norio Nakatsuji
  • 学会等名: 第16回日本遺伝子治療学会
  • 発表場所: 栃木
  • 年月日: 2010-07-01
• [図書] 実験医学4月号 (2013)
  • 著者名/発表者名: 川瀬栄八郎、宮崎隆道、関口清俊
  • 総ページ数: 31
• [図書] 「ラミニンE8を用いた安全で効率的なヒト多能性幹細胞培養法の開発」in 「実験医学」4月号カレントトピックス (2013)
  • 著者名/発表者名: 川瀬栄八郎
  • 総ページ数: 5
  • 出版者: 羊土社
• [図書] Stem Cells in Clinic and Research (2011)
  • 著者名/発表者名: Ali Gholamrezanezhad
  • 出版者: InTech
• [図書] The role of SOX2 in maintaining pluripotency and differentiation of human embryonic stem "Stem Cells in Clinic and Research" pp.169-184 (Ed.Ali Gholamrezanezhad) (2011)
  • 著者名/発表者名: Adachi, K., et al
  • 総ページ数: 16
  • 出版者: InTech
• [備考] 細胞接着タンパクを用い安全・高効率なヒトES/iPS細胞の培養法を開発
  • URL: http://www.icems.kyoto-u.ac.jp/j/pr/2012/12/05-nr.html
• [備考] 細胞接着タンパクを用い、 安全・高効率なヒトES/iPS細胞の培養法を開発
  • URL: http://www.kyoto-u.ac.jp/ja/news_data/h/h1/news6/2012/121205_1.htm
• [備考] 細胞接着タンパクを用い安全・高効率なヒトES/iPS細胞の培養法を開発
  • URL: http://www.icems.kyoto-u.ac.jp/j/pr/2012/12/05-nr.html
• [備考] 細胞接着タンパクを用い、 安全・高効率なヒトES／iPS細胞の培養法を開発
  • URL: http://www.kyoto-u.ac.jp/ja/news_data/h/h1/news6/2012/121205_1.htm