生物発光検出による新規テロメラーゼ活性測定法の開発とそのがん診断への応用

• 研究課題/領域番号: 22590537
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 昭和大学
• 研究代表者: 荒川 秀俊 昭和大学, 薬学部, 教授 (70129807)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2012年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: テロメラーゼ / 生物発光 / ピロリン酸 / ルシフェラーゼ / 腫瘍 / テロメア / ガン診断

研究概要

本研究は、ガン診断を目的とした腫瘍マーカーとしての新規テロメラーゼ分析法の開発を主として検討を行った。研究方法は、細胞由来のテロメラーゼ活性をテロメア修復反応とPCRで生じるピロリン酸に着目し、ルシフェリン-ルシフェラーゼ発光により測定する新規な分析法を検討した。その結果、Pisitive、Inactive、Negativeを明瞭に判別することが可能であった。本法により1 cellでもテロメラーゼ活性の検出が可能であった。次にヒトがん由来細胞に本法を適応したところ、ヒト繊維肉腫細胞株とヒト膵臓がん細胞株の2種類共にテロメラーゼ活性を迅速に、かつ正確に検出することが可能であった。

研究成果

• [雑誌論文] Development of novel telomerase assay using PPDK-luciferin-luciferase detection system (2013)
  • 著者名/発表者名: K. Karasawa, Y. Sano, H. Arakawa
  • 雑誌名: Luminescence 巻: － 号: 1 ページ: 52-57
  • DOI: 10.1002/bio.2501
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of bioluminescent enzyme immnoassay for S-Equol using firefly luciferase and its application to the assessment of Equol-priducer status (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Minekawa, A. Kambegawa, K. Shindome, H. Ohkuma, K. Abe, H. Maekawa and H. Arakawa
  • 雑誌名: Chem. Pharm. Bull 巻: 59 ページ: 84-87
• [雑誌論文] Bioluminescent assay for nitric oxide utilizing the biological enzyme activity of soluble guanylate cyclase (2011)
  • 著者名/発表者名: Y. Sano, M. Seki, S. Abe, S. Suzuki and H. Arakawa
  • 雑誌名: Analytical Letters 巻: 44 ページ: 2832-2840
• [雑誌論文] Practical application of bioluminescence enzyme immunoassay using enhancer for firefly luciferin-luciferase bioluminescence (2011)
  • 著者名/発表者名: T. Minekawa, H. Ohkuma, K. Abe, H. Maekawa and H. Arakawa
  • 雑誌名: Luminescence 巻: 26 ページ: 167-171
• [雑誌論文] Development of bioluminescent enzyme immnoassay for S-Equol using firefly luciferase and its application to the assessment of Equol- (2011)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Minekawa
  • 雑誌名: Chem.Pharm.Bull. 巻: 59 ページ: 84-87
  • 査読あり
• [学会発表] (2012)
  • 学会等名: 日本臨床化学会(招待講演)
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2012-09-06
• [学会発表] (2012)
  • 学会等名: 第25回バイオメデカル分析科学シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-08-08
• [学会発表] (2012)
  • 学会等名: 17thInternational Symposium on Bioluminescence and Chemiluminescence
  • 発表場所: カナダ
  • 年月日: 2012-05-28
• [学会発表] 新規腫瘍マーカー・テロメラーゼ分析法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 荒川秀俊
  • 学会等名: 第２５回バイオメデイカル分析科学シンポジウム
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 先端分析によるテロメラーゼ測定法 (2012)
  • 著者名/発表者名: 荒川秀俊
  • 学会等名: 日本臨床化学会
  • 発表場所: 盛岡市
  • 招待講演
• [学会発表] Development of novel telomerase assay by bioluminescent detection method (2012)
  • 著者名/発表者名: Hidetoshi Arakawa
  • 学会等名: 17th International Symposium on Bioluminescence and Chemiluminescence
  • 発表場所: カナダ、トロント
• [学会発表] (2011)
  • 学会等名: Molecular diagnostics summit Europe
  • 発表場所: ドイツ
  • 年月日: 2011-10-12
• [学会発表] Development of ultra sensitive bioluminescence EIA for biomarkers (2011)
  • 著者名/発表者名: Hidetoshi Arakawa
  • 学会等名: Molecular Diagnostics Summit Europe
  • 発表場所: ドイツ(ハノーファー)
  • 年月日: 2011-10-12