新規蛋白抗原検出による接合菌症の早期診断法の開発

• 研究課題/領域番号: 22591110
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 感染症内科学
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 掛屋 弘 長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (40398152)
• 研究分担者: 河野 茂 長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (80136647)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
• キーワード: 接着菌 / シグナルシークエンス / 診断キット / 接合菌

研究概要

接合菌症は主に血液疾患などの免疫抑制患者に発症する深在性真菌症であるが、現在その診断は培養と病理学的診断のみに頼らざるをえず、その予後も大変不良なため血清診断などの補助診断法の開発が期待されている。我々は接合菌症の早期診断に有用と考えられる血清診断法の開発研究を試みた。真菌研究における新しいアプローチであるシグナルシークエンストラップ法を利用し、接合菌(Rhizopus oryzae)の膜蛋白質および分泌蛋白質を網羅的に同定して、抗原蛋白の候補を選出した。最も多いクローンが検出された候補A抗原(26kDa蛋白)および2番目に多いクローンであった候補B抗原(46kDa蛋白)は、それぞれシグナルシークエンスを有し、候補Bはベータグルカン合成酵素に関連する遺伝子を有していた。本研究期間では候補A抗原を検出するELISAキットを作成し、その評価を行った。その結果、候補A 抗原はR. oryzae、R microspores、R microspores var. rhizopodiformis培養上清中およびそれらの感染マウス血清中からも検出され、新たな抗原検出法となる可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Multilocus sequence typing of Cryptococcus neoformans in non-HIV associated cryptococcosis in Nagasaki, Japan (2013)
  • 著者名/発表者名: Mihara T, Izumikawa K, Kakeya H, Ngamskulrungroj P, Umeyama T, Takazono T, Tashiro M, Nakamura S, Imamura Y, Miyazaki T, Ohno H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Miyzaki Y, Kohno S
  • 雑誌名: Med Mycol 巻: 51 ページ: 252-256
• [雑誌論文] Clinical efficacy and safety micafungin in Japanese patients with chronic pulmonary aspergillosis: a prospective observational study (2012)
  • 著者名/発表者名: Kohno S, Izumikawa K, Kakeya H, Miyazaki Y, Ogawa K, Amitani R, Niki Y, Kurashima A
  • 雑誌名: Med Mycol. 巻: 49 ページ: 688-693
  • NAID: 120006985289
• [雑誌論文] Antifungal susceptibilities of Aspergillus fumigatus clinical isolates in Nagasaki, Japan (2012)
  • 著者名/発表者名: Tashiro M, Izumikawa K, Minematsu A, Hirano K, Iwanaga N, Ide S, Mihara T, Hosogaya N, Takazono T, Morinaga Y, Nakamura S, Kurihara S, Imamura Y, Miyazaki T, Nishino T, Tsukamoto M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Yasuoka A, Tashiro T, Kohno S.
  • 雑誌名: Antimicrob Agents Chemother 巻: 56 ページ: 584-587
• [雑誌論文] Bronchoalveolar lavage galactomannan for the diagnosis of chronic pulmonary aspergillosis (2012)
  • 著者名/発表者名: Izumikawa K, Yamamoto Y, Mihara T, Takazono T, Morinaga Y, Kurihara S, Nakamura S, Imamura Y, Miyazaki T, Nishino T, Tsukamoto M, Kakeya H, Yanagihara K, Mine M, Yasuoka A, Tashiro T, Kohno S
  • 雑誌名: Med Mycol 巻: 50 ページ: 811-817
  • NAID: 120006985848
• [雑誌論文] Correlation between triazole treatment history and susceptibility in clinically isolated Aspergillus fumigatuas (2012)
  • 著者名/発表者名: Tashiro M, Izumikawa K, Hirano K, Ide S, Mihara T, Hosogaya N, Takazono T, Morinaga Y, Nakamura S, Kurihara S, Imamura Y, Miyazaki T, Nishino T, Tsukamoto M, Kakeya H, Ya ma mo t o Y, Yanagihara K, Yasuoka A, Tashiro T, Kohno S
  • 雑誌名: Antimicrob Agents Chemother 巻: 56 ページ: 4870-4875
• [雑誌論文] The glycosylphosphatidylinositol-linked aspartyl protease Yps1 is transcriptionally regulated by the calcineurin-Crz1 and Slt2 MAPK pathways in Candida glabrata (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki T, Izumikawa K, Yamauchi S, Inamine T, Nagayoshi Y, Saijo T, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Miyazaki Y, Yasuoka A, Kohno S
  • 雑誌名: FEMS Yeast Res 巻: 11 ページ: 449-456
  • NAID: 120006984996
• [雑誌論文] Evaluation of the Cica Fungi Te st Candida, a novel serum Candida mannan antigen kit, and its comparison with Cand-Tec in candidemia patients (2011)
  • 著者名/発表者名: Takazono T, Izumikawa K, Nagayoshi Y, Tanaka A, Mihara T, Kosai K, Saijo T, Imamura Y, Miyazaki T, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Kamihira S, Kohno S
  • 雑誌名: Jpn J Infect Dis 巻: 64 ページ: 116-120
  • NAID: 120006985095
• [雑誌論文] Synergistic antifungal effect of lactoferrin with azole antifungals against Candida albicans and a proposal for a new treatment method for invasive candidiasis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Kakeya H, Miyazaki T, Izumikawa K, Yanagihara K, Ohno H, Yamamoto Y, Tashiro T, Kohno S
  • 雑誌名: Jpn J Infect Dis 巻: 64 ページ: 292-296
  • NAID: 40018924977
• [雑誌論文] Functional characterization of the regulators of calcineurin in Candida glabrata (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki T, Izumikawa K, Nagayoshi Y, Saijo T, Yamauchi S, Morinaga Y, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Miyazaki Y, Kohno S
  • 雑誌名: FEMS Yeast Res 巻: 11 ページ: 621-630
  • NAID: 120006985354
• [雑誌論文] Diagnostic significance of Aspergillus species isolated from respiratory samples in an adult pneumology ward (2011)
  • 著者名/発表者名: Tashiro T, Izumikawa K, Tashiro M, Takazono T, Morinaga Y, Yamamoto K, Imamura Y, Miyazaki T, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Yasuoka A, Kohno S
  • 雑誌名: Med Mycol 巻: 49 ページ: 581-585
  • NAID: 120006985275
• [雑誌論文] Skn7p is required for oxidative stress response and virulence in Candida glabrata (2010)
  • 著者名/発表者名: Saijo T, Miyazaki T, Izumikawa K, Mihara T, Takazono T, Kosai K, Imamura Y, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Kohno S
  • 雑誌名: Mycopathologia 巻: 169 ページ: 81-90
• [雑誌論文] Roles of calcineurin and Crz1 in antifungal susceptibility and virulence of Candida glabrata (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki T, Inamine T, Yamauchi S, Nagayoshi Y, Saijo T, Izumikawa K, Seki M, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Miyazaki Y, Kohno S
  • 雑誌名: Antimicrob Agents Chemother 巻: 54 ページ: 1639-1643
  • NAID: 120006984565
• [雑誌論文] Intravenous micafungin versus voriconazole for chronic pulmonary aspergillosis: a multicenter trial in Japan (2010)
  • 著者名/発表者名: Kohno S, Izumikawa K, Ogawa K, Kurashima A, Okimoto N, Amitani R, Kakeya H, Niki Y, Miyazaki Y
  • 雑誌名: J Infecion 巻: 61 ページ: 410-418
  • NAID: 120006984951
• [学会発表] 新規蛋白抗原を使用した接合菌症の早期診断法開発の試み (2013)
  • 著者名/発表者名: 掛屋 弘、他
  • 学会等名: 第14回真菌症フォーラム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-02-16
• [学会発表] 新規蛋白抗原を使用した接合菌症の早期診断法開発の試み
  • 著者名/発表者名: 掛屋 弘
  • 学会等名: 第14回真菌症フォーラム
  • 発表場所: 東京