抗糖鎖抗体作製のための新しいストラテジーとその応用

• 研究課題/領域番号: 22659018
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 静岡県立大学
• 研究代表者: 川島 博人 静岡県立大学, 薬学部, 准教授 (50260336)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 3,090千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2010年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
• キーワード: リンパ球ホーミング / L-セレクチン / 高内皮細静脈 / 硫酸化糖鎖 / 抗糖鎖抗体 / 糖鎖 / 免疫学

研究概要

抗糖鎖モノクローナル抗体(mAb)は生体内における複合糖質の機能解析に非常に有用であるが、その作製は困難である。その主な理由として、多様な複合糖質がマウスおよびラットに内在性に発現するため糖鎖の抗原性は一般的に低いことがあげられる。本研究で我々は、糖鎖合成酵素欠損マウスにおいてはその欠損している酵素で合成される糖鎖が高い抗原性を示すという原理に基づく効率の良い抗糖鎖mAb作製法を樹立した。その応用例として、硫酸基転移酵素欠損マウスを用いて抗硫酸化糖鎖mAbを作製し、同抗体を用いて硫酸化N-型糖鎖および硫酸化O-型糖鎖がリンパ球ホーミングと免疫監視に協調的に機能することを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Essential role of peripheral node addressin in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohmichi Y, Hirakawa J, Imai Y, Fukuda M, and Kawashima H.
  • 雑誌名: J. Exp. Med 巻: 208 号: 5 ページ: 1015-1025
  • DOI: 10.1084/jem.20101786
  • 査読あり
• [雑誌論文] Binding of L-selectin to its vascular and extravascular ligands is differentially regulated by pH (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirose M, Matsumura R, Sato K, Murai T, and Kawashima H.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 414 号: 2 ページ: 437-442
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2011.09.123
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel anti-carbohydrate antibodies reveal the cooperative function of sulfated N-and O-glycans in lymphocyte homing (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Kobayashi M, Watanabe S, Takakura A, Imai Y, Ito Y, Fukuda M, and Kawashima H.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 285 号: 52 ページ: 40864-40878
  • DOI: 10.1074/jbc.m110.167296
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelial Heparan Sulfate Controls Chemokine Presentation in Recruitment of Lymphocytes and Dendritic Cells to Lymph Nodes (2010)
  • 著者名/発表者名: Bao X, Moseman EA, Saito H, Petryanik B, Thiriot A, Hatakeyama S, Ito Y, Kawashima H, Yamaguchi Y, Lowe JB, von Andrian UH and Fukuda M.
  • 雑誌名: Immunity 巻: 33 号: 5 ページ: 817-829
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2010.10.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sulfation of colonic mucins by N-acetylglucosamine-6-O-sulfotransferase-2 and its protective function in experimental colitis in mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Tobisawa Y, Imai Y, Fukuda M, and Kawashima H.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 285 号: 9 ページ: 6750-6760
  • DOI: 10.1074/jbc.m109.067082
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two roles of mucin sulfation (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawashima H
  • 雑誌名: Trends Glycosci. Glycotechnol 巻: 22 ページ: 211-225
  • NAID: 10027893003
  • URL: http://www.jstage.jst.go.jp/article/tigg/22/127/22_211/_article
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel anti-carbohydrate antibodies reveal the cooperative function of sulfated N- and O-glycans in lymphocyte homing. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Kobayashi M, Watanabe S, Takakura A, Imai Y, Ito Y, Fukuda M, Kawashima H
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 285 ページ: 40864-40878
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelial Heparan Sulfate Controls Chemokine Presentation in Recruitment of Lymphocytes and Dendritic Cells to Lymph Nodes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Bao X, Moseman EA, Saito H, Petryanik B, Thiriot A, Hatakeyama S, Ito Y, Kawashima H, Yamaguchi Y, Lowe JB, von Andrian UH, Fukuda M
  • 雑誌名: Immunity 巻: 33 ページ: 817-829
  • 査読あり
• [雑誌論文] Two roles of mucin sulfation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawashima H
  • 雑誌名: Trends in Glycoscience and Glycotechnology 巻: 22 ページ: 211-225
  • NAID: 10027893003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of GlcNAc-6-O-sulfotransferases in lymphoid and nonlymphoid tissues. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawashima H
  • 雑誌名: Methods in Enzymology 巻: 479 ページ: 243-256
• [学会発表] リンパ球ホーミングにおける高内皮細静脈ヘパラン硫酸の機能解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 坪井康一郎、平川城太朗、關愛実子、今井康之、山口祐、福田穣、川島博人
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] Essential role of peripheral node addressin in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohmichi Y, Hirakawa J, Imai Y, Fukuda M, and Kawashima H
  • 学会等名: Keystone Symposia-Chemokines and Leukocyte Trafficking in Homeostasis and Inflammation
  • 発表場所: Breckenridge, Colorado, USA
  • 年月日: 2012-01-10
• [学会発表] Novel Anti-carbohydrate Antibodies Reveal the Cooperative Function of Sulfated N-and O-Glycans in Lymphocyte Homing (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Imai Y, and Kawashima H
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2011-11-29
• [学会発表] Novel Anti-carbohydrate Antibodies Reveal the Cooperative Function of Sulfated N- and O-Glycans in Lymphocyte Homing (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Imai Y, Kawashima H
  • 学会等名: 第40回日本免疫学会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2011-11-29
• [学会発表] 大腸特異的Atg7欠損マウスにおけるデキストラン硫酸誘発性大腸炎の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 坪井康一郎、高倉惇、今井康之、小松雅明、川島博人
  • 学会等名: 第84回日本生化学会年会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 大腸特異的Atg7欠損マウスにおけるデキストラン硫酸誘発性大腸炎の増悪化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 坪井康一郎、高倉惇、今井康之、小松雅明、川島博人
  • 学会等名: 第75回日本生化学会中部支部例会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2011-05-28
• [学会発表] Novel Anti-Carbohydrate Antibodies Reveal the Cooperative Function of Sulfated N-and O-Glycans in Lymphocyte Homing (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Kobayashi M, Watanabe S, Takakura A, Imai Y, Ito Y, Fukuda M, and Kawashima H
  • 学会等名: Keystone Symposia-New Frontiers at the Interface of Immunity and Glycobiology
  • 発表場所: Lake Louise, Alberta, Canada
  • 年月日: 2011-03-08
• [学会発表] Essential role of peripheral node addressin in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohmichi Y, Hirakawa J, Imai Y, Fukuda M, and Kawashima H
  • 学会等名: Keystone Symposia-New Frontiers at the Interface of Immunity and Glycobiology
  • 発表場所: Lake Louise, Alberta, Canada
  • 年月日: 2011-03-08
• [学会発表] Essential role of peripheral node addressin in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawashima H.
  • 学会等名: Keystone Symposia-New Frontiers at the Interface of Immunity and Glycobiology
  • 発表場所: Lake Louise, Alberta, Canada
  • 年月日: 2011-03-08
• [学会発表] Novel Anti-Carbohydrate Antibodies Reveal the Cooperative Function of Sulfated N- and O-Glycans in Lymphocyte Homing. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Kobayashi M, Watanabe S, Takakura A, Imai Y, Ito Y, Fukuda M, Kawashima H
  • 学会等名: Keystone Symposia-New Frontiers at the Interface of Immunity and Glycobiology
  • 発表場所: Lake Louise, Alberta, Canada
  • 年月日: 2011-03-07
• [学会発表] 各種SH3ドメインとN-WASPプロリンリッチ部位の相互作用の相違によりN-WASPのアクチンフィラメント形成と細胞運動の相違が生じる (2011)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬まゆみ、川島博人、村井稔幸、川上和之、源利成、岡田雅人、末次志郎、竹縄忠臣、中川敦史
  • 学会等名: 第63回日本細胞生物学会大会
  • 発表場所: 北海道
• [学会発表] Minamoto. Elevation of rat plasma P-selectin in acute lung injury (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirose M, Kawashima H, Murai T, Kawakami K
  • 学会等名: 日本分子生物学会・第11回春季シンポジウム、金沢国際がん生物学シンポジウム
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] 各種SH3ドメインとN-WASPプロリンリッチ部位の相互作用の相違によりN-WASPのアクチンフィラメント形成と細胞運動の相違が生じる (2011)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬まゆみ、川島博人、村井稔幸、川上和之、源利成、岡田雅人、末次志郎、竹縄忠臣、中川敦史
  • 学会等名: 第63回日本細胞生物学会大会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Elevation of rat plasma P-selectin in acute lung injury (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirose M, Kawashima H, Murai T, Kawakami K, Minamoto
  • 学会等名: 日本分子生物学会・第11回春季シンポジウム
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] B16メラノーマの肺転移に及ぼすケモカイン強制発現の影響 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加賀正基, 渡部草太, 平川城太朗, 今井康之, 川島博人
  • 学会等名: 平成22年度日本薬学会東海支部例会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2010-11-28
• [学会発表] 新しい抗糖鎖抗体作製法の樹立に基づく硫酸化糖鎖のリンパ球ホーミングにおける機能の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 川島博人
  • 学会等名: CREST「代謝調節機構解析に基づく細胞機能制御基盤技術」平成22年度第3回公開シンポジウム
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-10-21
• [学会発表] Deficiency of L-selectin ligand biosynthesis by knocking out of GlcNAc6ST-1 and-2 suppresses asthmatic response in murine model of asthma (2010)
  • 著者名/発表者名: Bao X, Nakayama J, Miller M, Pham A, Kobayashi M, Kawashima H, Broide D, Fukuda M
  • 学会等名: Glycobiology2010
  • 発表場所: USA
• [学会発表] CRIBドメインとWHドメインを介した特定のN-WASP多量体がアクチン骨格形成におよび細胞運動に寄与している (2010)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬まゆみ、川島博人、村井稔幸、竹縄忠臣、末次志郎、中川敦史
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] ケモカインCXCL10の強制発現によるB16メラノーマの肺転移抑制 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加賀正基、渡部草太、平川城太朗、今井康之、川島博人
  • 学会等名: 第83回日本生化学会年会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Deficiency of L-selectin ligand biosynthesis by knocking out of GlcNAc6ST-1 and -2 suppresses asthmatic response in murine model of asthma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Bao X, Nakayama J, Miller M, Pham A, Kobayashi M, Kawashima H, Broide D, Fukuda M
  • 学会等名: Glycobiology2010
  • 発表場所: St.Pete Beach, FL, USA
• [図書] Roles of GlcNAc-6-O-sulfotransferases in lymphoid and nonlymphoid tissues. Methods in Enzymology (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawashima H
• [備考]
• [備考]
  • URL: http://sys.u-shizuoka-ken.ac.jp/~bisei/
• [備考]
  • URL: http://sys.u-shizuoka-ken.ac.jp/~bisei/