培養細胞とキメラ分子を用いたタンパク質のアトグラム検出システムの開発に関する研究

• 研究課題/領域番号: 22659027
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 環境系薬学
• 研究機関: 国立医薬品食品衛生研究所
• 研究代表者: 中村 亮介 国立医薬品食品衛生研究所, 代謝生化学部, 主任研究官 (50333357)
• 研究協力者: 中村 里香 (40643333)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,050千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 450千円); 2012年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
• キーワード: 食品衛生学 / 高感度測定 / IgE受容体 / ルシフェラーゼ / EXiLE法 / キメラ分子 / 遺伝子組換作物 / 遺伝子組換え作物

研究概要

高親和性IgE 受容体をヒト化したラット培養マスト細胞株に、さら にルシフェラーゼのレポーター遺伝子を安定的に組み込んだRS-ATL8 細胞を用い、加水分解 小麦由来アレルゲンの検出を試みて、アトグラムレベルのタンパク質の検出に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Evaluation of allergenicity of acidhydrolyzed wheat protein using an in vitro elicitation test (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Nakamura, R., Adachi, R., Itagaki, Y., Fukutomi, Y., Teshima, R
  • 雑誌名: nternational Archives of Allergy and Immunology 巻: 160 号: 3 ページ: 259-264
  • DOI: 10.1159/000341671
  • 査読あり
• [雑誌論文] 特集「アレルギー疾患における特異抗体の意義」. II.アレルゲン特異IgE 抗体の新しい測定方法「4.EXiLE法」 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介、手島玲子
  • 雑誌名: アレルギー・免疫 巻: 20 ページ: 63-73
• [雑誌論文] 特集「アレルギー疾患における特異抗体の意義」. II.アレルゲン特異IgE抗体の新しい測定方法「４．EXiLE法」 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 雑誌名: アレルギー・免疫 巻: 20 ページ: 63-73
• [雑誌論文] Evaluation of the Luciferase Assay-Based <i>In Vitro</i> Elicitation Test for Serum IgE (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Ishiwatari, A., Higuchi, M., Uchida, Y., Nakamura, R., Kawakami, H., Urisu, A., Teshima, R
  • 雑誌名: Allergology International 巻: 61 号: 3 ページ: 431-437
  • DOI: 10.2332/allergolint.11-OA-0407
  • NAID: 130004477146
  • ISSN: 1323-8930, 1440-1592
  • 査読あり
• [雑誌論文] 培養肥満細胞を用いた新規血清検査法 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 雑誌名: アレルギーの臨床 巻: 31(11) ページ: 67-70
• [雑誌論文] 古代米(赤米・黒米)のアレルゲン発現プロテオミクス解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村里香、中村亮介、手島玲子
  • 雑誌名: 日本食品化学学会誌 巻: 18(3) ページ: 143-149
  • NAID: 110008897467
  • 査読あり
• [雑誌論文] 有機リン系農薬クロルピリホスおよびメタミドホスの周産期暴露が発達期免疫系に及ぼす影響について (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 木村美恵, 松岡英樹, 蜂須賀暁子, 中村里香, 中村厚, 渋谷淳, 手島玲子
  • 雑誌名: Bull.Natl.Inst.Health Sci. 巻: 129 ページ: 105-110
  • 査読あり
• [雑誌論文] 2D-DIGE analysis of rice proteins from different cultivars (2010)
  • 著者名/発表者名: Teshima, R., Nakamura, R., Satoh, R., Nakamura, R
  • 雑誌名: Regulatory Toxicology Pharmacology 巻: 58 号: 3 ページ: S30-S35
  • DOI: 10.1016/j.yrtph.2010.05.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] A convenient and sensitive allergy test : IgE cross linking-inducedluciferase expression in cultured mast cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura R., Uchida Y., Higuchi M., Nagokamura R., Teshima R.
  • 雑誌名: Allergy 巻: 65 号: 10 ページ: 1266-1266
  • DOI: 10.1111/j.1398-9995.2010.02363.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of propolis from different areas on mast cell degranulation and identification of the effective components in propolis (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Nakamura R., Watanabe, K., Oka, K., Ohta, S., Mishima, S., Teshima, R
  • 雑誌名: Internationial Immunopharmacology 巻: 10 号: 9 ページ: 1107-1112
  • DOI: 10.1016/j.intimp.2010.06.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allergenicity study of EGFP-transgenic chicken meat by serological and 2D-DIGE analysis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Nakamura, R., Nakano, M., Arisawa, K., Ezaki, R., Horiuchi, H., Teshima, R.
  • 雑誌名: Food and Chemical Toxicology 巻: 48 ページ: 1302-1310
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immunoproteomic and 2D-DIGE analysis of Arabidopsis DREB1A-trans-genic potato. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Satoh, R., Nakamura, R., Shimazaki, T., Kasuga, M., YamaguchiI-Shinozaki, K., Kikuchi, A., Watanabe, K.N., Teshima, R.
  • 雑誌名: Biological & Pharmaceutical Bulletin 巻: 33 ページ: 1418-1425
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of propolis from different areas on mast cell degranulation and identification of the effective components in propolis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Nakamura R., Watanabe, K., Oka, K., Ohta, S., Mishima, S., Teshima, R.
  • 雑誌名: International Immunopharmacology 巻: 10 ページ: 1107-1112
  • 査読あり
• [雑誌論文] A convenient and sensitive allergy test : IgE crosslinking-induced luciferase expression in cultured mast cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Uchida, Y., Higuchi, M., Nakamura, R., Tsuge, I., Urisu, A., Teshima, R.
  • 雑誌名: Allergy 巻: 65 ページ: 1266-1273
  • 査読あり
• [雑誌論文] アレルギー試験法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 雑誌名: ぶんせき 巻: 10 ページ: 506-509
  • NAID: 10026787782
  • 査読あり
• [雑誌論文] 食品中のアレルゲンの予測 (2010)
  • 著者名/発表者名: 手島玲子, 中村亮介
  • 雑誌名: 食品衛生学雑誌 巻: 52 ページ: 1-9
  • NAID: 130000671804
  • 査読あり
• [学会発表] EXiLE 法における抗原の固相化の影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 中村里香, 手島玲子
  • 学会等名: 日本薬学会第133 年会
• [学会発表] EXiLE法における抗原の固相化の影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ストレス耐性遺伝子を導入した遺伝子組換えイネ種子のアレルゲン性評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村里香, 中村亮介, 小関良弘, 手島玲子
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-31
• [学会発表] 経口摂取ナノシリカ粒子のマウス免疫影響について (2012)
  • 著者名/発表者名: 蜂須賀暁子, 木村美恵, 中村亮介, 松岡英樹, 穐山浩, 手島玲子
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-31
• [学会発表] In vitro provocation study (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R.
  • 学会等名: The 51st meeting of Society of Toxicology
  • 発表場所: San Francisco(招待講演)
  • 年月日: 2012-03-14
• [学会発表] EXiLE 法による加水分解小麦のアレルゲン性における分子サイズの影響の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 中村里香, 酒井信夫, 安達玲子, 福冨友馬, 手島玲子
  • 学会等名: 第85回日本生化学会
• [学会発表] In vitro provocation study (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R
  • 学会等名: The 51st meeting of Society of Toxicology
• [学会発表] EXiLE法による加水分解小麦のアレルゲン性における分子サイズの影響の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 第85回日本生化学会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 酸加水分解小麦含有石鹸に感作された患者血清IgE反応性の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 第19回日本免疫毒性学会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 培養マスト細胞株を用いたアレルギー試験（EXiLE法）による 抗アレルギー活性物質のスクリーニング (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 日本食品化学学会第18回総会・学術大会
  • 発表場所: 北海道
• [学会発表] 酸加水分解小麦含有石鹸で感作された患者IgEのin vitro活性化試験による交差反応性の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 第24回日本アレルギー学会春季臨床大会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 培養細胞を用いたアレルギー試験(EXiLE法)への抗アレルギー薬の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 石渡亜耶乃, 川上浩, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第61回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] 食物アレルゲンの消化と抗原性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 手島玲子, 中村亮介
  • 学会等名: 第61回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-11-10
• [学会発表] 培養マスト細胞の活性化に基づくアレルゲン交差反応性の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石渡亜耶乃, 中村亮介, 中村厚, 酒井信夫, 安達玲子, 川上浩, 近藤康人, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第48回全国衛生化学技術協議会年会
  • 発表場所: 長野
  • 年月日: 2011-11-10
• [学会発表] Proteomic analysis of rice allergens in red rice and black rice (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村里香, 中村亮介, 手島玲子
  • 学会等名: 3rd International Symposium on "Frontiers in Agriculture Proteome Research"
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2011-11-08
• [学会発表] EXiLE : a novel reporter assay-based allergy test (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Ishiwatari, A., Nakamura, R., Kawakami, H., Tsuge, I., Urisu, A., Teshima, R.
  • 学会等名: Joint Congress of APAPAEI 2011 & 48th JSPACI
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2011-10-29
• [学会発表] T細胞サブポピュレーション変化を指標とした有機リン系農薬の発達期免疫影響解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 木村美恵, 松岡英樹, 蜂須賀暁子, 中村里香, 中村厚, 渋谷淳, 手島玲子
  • 学会等名: 第84回日本生化学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] プロテオミクスを用いたコメアレルゲンタンパク質アイソフォームの解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村里香, 佐藤里絵, 中村亮介, 手島玲子
  • 学会等名: 第84回日本生化学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] プロテオミクス手法を用いたArabidopsis DREB1A-組換えジャガイモのアレルゲン性試験 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村里香, 佐藤里絵, 中村亮介, 島崎高嘉, 春日美江, 篠崎和子, 菊池彰, 渡邊和男, 手島玲子
  • 学会等名: 第18回日本免疫毒性学会学術大会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2011-09-09
• [学会発表] 培養細胞を用いた加熱卵白のアレルゲン性の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石渡亜耶乃, 中村亮介, 樋口雅一, 内田好海, 中村里香, 川上浩, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第18回日本免疫毒性学会学術大会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2011-09-09
• [学会発表] 子どもと免疫:小児食物アレルギー試験の観点から (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 第18回日本免疫毒性学会学術大会
  • 発表場所: 千葉
  • 年月日: 2011-09-08
• [学会発表] マクロファージLPS耐性変異株におけるIL-1β産生異常の機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 天野富美夫, 藤森功, 大西瑛子, 南徳子, 中村亮介, 手島玲子
  • 学会等名: 第12回Pharmaco-Hematologyシンポジウム
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2011-06-18
• [学会発表] 甲殻類アレルギー患者における甲殻類および昆虫由来トロポミオシンの交差反応性に関する研究 (2011)
  • 著者名/発表者名: 石渡亜耶乃, 中村亮介, 中村厚, 酒井信夫, 安達玲子, 川上浩, 手島玲子
  • 学会等名: 日本食品化学学会第17回総会・学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] 赤米・黒米におけるアレルゲンタンパク質発現量の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村里香, 中村亮介, 手島玲子
  • 学会等名: 日本食品化学学会第17回総会・学術大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] 新しいアレルギー試験法EXiLE法による加熱卵白アレルゲンのIgE応答性の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 石渡亜耶乃, 樋口雅一, 中村里香, 川上浩, 手島玲子
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: ツインメッセ静岡(静岡)
  • 年月日: 2011-03-29
• [学会発表] EXiLE: a novel reporter assay-based allergy test (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Ishiwatari, A., Nakamura, R., Kawakami, H., Tsuge,I., Urisu, A., Teshima, R
  • 学会等名: Joint Congress of APAPARI 2011 & 48th JSPACI
• [学会発表] 培養細胞のルシフェラーゼ発現を指標とするアレルギー試験法 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 石渡亜耶乃, 川上浩, 手島玲子
  • 学会等名: 第4回食品薬学シンポジウム
• [学会発表] 子どもと免疫: 小児食物アレルギー試験の観点から (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介
  • 学会等名: 第18回日本免疫毒性学会学術大会
• [学会発表] 新しいアレルギー試験法EXiLE 法による加熱卵白アレルゲンのIgE 応答性の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 石渡亜耶乃, 樋口雅一, 中村里香, 川上浩, 手島玲子
  • 学会等名: 日本薬学会第131 年会
• [学会発表] 甲殻類アレルギー患者血清中IgE抗体による培養マスト細胞活性化試験 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 石渡亜耶乃, 酒井信夫, 中村厚, 穐山浩, 安達玲子, 川上浩, 手島玲子
  • 学会等名: BMB 2010
  • 発表場所: ポートアイランド(神戸)
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 培養細胞を用いた新規アレルギー試験法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 樋口雅一, 内田好海, 中村里香, 柘植郁哉, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第60回日本アレルギー学会秋季学術大会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム(東京)
  • 年月日: 2010-11-25
• [学会発表] EXiLE法を用いたアレルゲン交差反応性の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 樋口雅一, 中村里香, 近藤康人, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第17回日本免疫毒性学会学術大会
  • 発表場所: 国立環境研(つくば)
  • 年月日: 2010-09-10
• [学会発表] IgE crosslinking-induced luciferase expression (EXiLE) as a sensitive in dicator for serum-based allergy test (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Uchida, Y., Higuchi, M., Nakamura, R., Teshima, R.
  • 学会等名: EAACT2010
  • 発表場所: ExCeL London(ロンドン)
  • 年月日: 2010-06-07
• [学会発表] 培養細胞を用いた新規アレルギー試験法の開発. (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 樋口雅一, 内田好海, 中村里香, 柘植郁哉, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第60回日本アレルギー学会秋季学術大会
• [学会発表] EXiLE 法を用いたアレルゲン交差反応性の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 中村亮介, 樋口雅一, 中村里香, 近藤康人, 宇理須厚雄, 手島玲子
  • 学会等名: 第17回日本免疫毒性学会学術大会
• [学会発表] IgE crosslinking- induced luciferase expression (EXiLE) as a sensitive indicator for serum-based allergy test (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, R., Uchida, Y., Higuchi, M., Nakamura, R., Teshima, R
  • 学会等名: EAACI2010