RNAi複合体積み込み因子の同定と機能解析

• 研究課題/領域番号: 22687014
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 分子生物学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 泊 幸秀 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (90447368)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 24,700千円 (直接経費: 19,000千円、間接経費: 5,700千円); 2012年度: 7,540千円 (直接経費: 5,800千円、間接経費: 1,740千円); 2011年度: 7,670千円 (直接経費: 5,900千円、間接経費: 1,770千円); 2010年度: 9,490千円 (直接経費: 7,300千円、間接経費: 2,190千円)
• キーワード: 核酸 / 蛋白質 / 発現制御 / 生体分子 / 遺伝子

研究概要

siRNAやmicroRNAなどの小分子RNAは、Argonauteと呼ばれるタンパク質とRISCと呼ばれるエフェクター複合体を形成して機能する。本研究では、小分子RNA二本鎖をArgonauteに取り込まれる際に、Hsc70/Hsp90を中心とするシャペロンマシナリーの働きが必須であることを示し、さらに、シャペロンを含む7つの因子によってRISCの形成過程を試験管内で再構成することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] miRNA-like duplexes as RNAi triggers with improved specificity. (2012)
  • 著者名/発表者名: Betancur JG, Yoda M.
  • 雑誌名: Front Genet. 巻: 3(127) ページ: 127-127
  • DOI: 10.3389/fgene.2012.00127
  • 査読あり
• [雑誌論文] microRNAs mediate gene silencing via multiple different pathways in Drosophila. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukaya T, *Tomari Y.
  • 雑誌名: Mol Cell. 巻: 48(6) 号: 6 ページ: 825-836
  • DOI: 10.1016/j.molcel.2012.09.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dicer is dispensable for asymmetric RISC loading in mammals (2012)
  • 著者名/発表者名: Betancur JG, et al.
  • 雑誌名: RNA 巻: 18 号: 1 ページ: 24-30
  • DOI: 10.1261/rna.029785.111
  • 査読あり
• [雑誌論文] Native gel analysis for RISC assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawamata T, *To mari Y
  • 雑誌名: Methods Mol Biol 巻: 725 ページ: 91-105
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of the pre-miRNA structure by Drosophila Dicer-1 (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumi A, Kawamata T, Izumi N, Seitz H, *Tomari Y
  • 雑誌名: Nat Struct Mol Biol 巻: 18 ページ: 1153-1158
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multilayer checkpoints for microRNA authenticity during RISC assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: 川俣朋子、依田真由子、泊幸秀
  • 雑誌名: EMBO Reports 巻: 12(9) 号: 9 ページ: 944-949
  • DOI: 10.1038/embor.2011.128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Native Gel Analysis for RISC Assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: 川俣朋子、泊幸秀
  • 雑誌名: Methods in Molecular Biology 巻: 725 ページ: 91-105
  • DOI: 10.1007/978-1-61779-046-1_7
  • ISBN: 9781617790454, 9781617790461
  • 査読あり
• [雑誌論文] Making RISC. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kawamata T, *Tomari Y
  • 雑誌名: Trends Biochem Sci 巻: 35 ページ: 368-376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hsc70/Hsp90 chaperone machinery mediates ATP-dependent RISC loading of small RNA duplexes (2010)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki S, Kobayashi M, Yoda M, Sakaguchi Y, Katsuma S, Suzuki T, Tomari Y
  • 雑誌名: Mol Cell 巻: 39 ページ: 292-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hsc70/Hsp90 chaperone machinery mediates ATP-dependent RISC loading of small RNA duplexes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki S, et al.
  • 雑誌名: Mol Cell. 巻: 39 ページ: 292-299
  • 査読あり
• [学会発表] How to make RISC (2012)
  • 著者名/発表者名: 泊幸秀
  • 学会等名: FURANO Conference
  • 発表場所: 富良野市(招待講演)
  • 年月日: 2012-03-06
• [学会発表] RNAサイレンシング複合体の形成と機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 泊 幸秀
  • 学会等名: アンチセンス・遺伝子・デリバリー合同シンポジウム
  • 発表場所: 仙台市民会館、仙台市
  • 招待講演
• [学会発表] In vitro reconstitution of human RISC assembly/ヒトRISC形成過程の再構成 (2012)
  • 著者名/発表者名: 成瀬 健
  • 学会等名: 第35回分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場、福岡市
• [学会発表] Chaperoning RISC assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: 泊幸秀
  • 学会等名: 長崎大学NEKKEN Special Seminar
  • 発表場所: 長崎市(招待講演)
  • 年月日: 2011-11-21
• [学会発表] Chaperoning RISC Assembly (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomari Y.
  • 学会等名: Keystone Symosia Mechanism and Biology of Silencing
  • 発表場所: Monterey (USA)
  • 年月日: 2011-03-22
• [学会発表] Chaperoning RISC Assembly. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomari Y
  • 学会等名: Keystone Symposia Mechanism and Biology of Silencing
  • 発表場所: Monterey,USA
• [学会発表] In vitro Reconstitution of RISC Assembly Mediated by Hsc70/Hsp 90 Chaperone Machinery (2011)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki S, Tomari Y
  • 学会等名: The 16th Annual Meeting of RNA Society
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Chaperoning RISC Assembly (2010)
  • 著者名/発表者名: Tomari Y.
  • 学会等名: The 2^<nd> Korean Oligonucleotide Therapeutics Society International Symposium
  • 発表場所: Seoul (Korea)
  • 年月日: 2010-11-30
• [学会発表] Hsc70/Hsp90シャペロンマシナリーによるRISC loading (2010)
  • 著者名/発表者名: 岩崎信太郎
  • 学会等名: 第12回日本RNA学会
  • 発表場所: 一ツ橋記念講堂(東京)
  • 年月日: 2010-07-27
• [学会発表] Chaperone Machinery is Required for RISC-loading (2010)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki S, Tomari Y
  • 学会等名: 19th CDB Meeting /RNA Sciences in Cell and Developmental Biology
  • 発表場所: Riken CDB, Kobe, Japan
• [学会発表] Chaperone Machinery is Required for RISC-loading (2010)
  • 著者名/発表者名: Iwasaki S.
  • 学会等名: 19^<th> CDB Meeting/RNA Sciences in Cell and Developmental Biology
  • 発表場所: 理化学研究所・発生科学総合研究センター(神戸)