特異な酵素反応を利用した細胞内タンパク質機能制御システムの開発

• 研究課題/領域番号: 22750071
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 分析化学
• 研究機関: 九州工業大学
• 研究代表者: 末田 慎二 九州工業大学, 大学院・情報工学研究院, 准教授 (00325581)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: タンパク質機能制御 / ビオチン化反応 / 膜タンパク質 / 細胞膜 / タンパク質局在制御 / 核膜 / 遺伝子ノックアウト / タンパク質間相互作用 / タンパク質機能解析

研究概要

古細菌 Sulfolobus tokodaii 由来のビオチン化反応は、ビオチン化酵素がそのビオチン化された基質タンパク質と安定な複合体を形成するという特異な性質を有している。本研究ではこのビオチン化酵素反応系を利用して、標的タンパク質の細胞内での機能を制御できるシステムの構築について検討を行った。実際にこの酵素反応系を利用して、動物細胞内に発現させた標的タンパク質に関して、 その細胞内での局在を制御することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] An SH2 Domain-Based Tyrosine Kinase Assay Using Biotin Ligase Modified with a Terbium(III) Complex (2013)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二,新北幸,草場壮
  • 雑誌名: Analytical Sciences 巻: 29 号: 5 ページ: 491-497
  • DOI: 10.2116/analsci.29.491
  • NAID: 10031170976
  • ISSN: 0910-6340, 1348-2246
  • 査読あり
• [雑誌論文] Site-specific labeling of proteins by using biotin protein ligase conjugated with fluorophores (2011)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二,米田佐和子,林秀樹
  • 雑誌名: ChemBioChem 巻: Vol.12 号: 9 ページ: 1367-1375
  • DOI: 10.1002/cbic.201000738
  • ISSN: 1439-4227, 1439-7633
  • 査読あり
• [学会発表] 遺伝子レベルで制御可能なタンパク質の蛍光ラベル化技術の開発に関する検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二、山本千裕、有須田一馬
  • 学会等名: 日本化学会第93春季年会
  • 発表場所: 立命館大学びわこ・くさつキャンパス（草津市）
• [学会発表] 膜タンパク質とビオチンリガーゼの融合体を利用した細胞内タンパク質の局在制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 有須田一馬、末田慎二
  • 学会等名: 日本分析化学会第61 年会
  • 発表場所: 金沢大学角間キャンパス(石川県)
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] 特異な酵素反応を利用した細胞内タンパク質の機能制御システムの構築に関する検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 有須田一馬、末田慎二
  • 学会等名: 第49回化学関連支部合同九州大会
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2012-06-30
• [学会発表] 膜タンパク質とビオチンリガーゼの融合体を利用した細胞内タンパク質の局在制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 有須田一馬、末田慎二
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学角間キャンパス（金沢市）
• [学会発表] Development of a regulated fluorescent labeling system for proteins with biotin ligase fused to GFP (2012)
  • 著者名/発表者名: 山本千裕、林秀樹、末田慎二
  • 学会等名: The Fifth Japan-Korea Joint Symposium on Bio-microsensing Technology: Future Technology in Medical & Dental Areas
  • 発表場所: 九州工業大学戸畑キャンパス（北九州市）
• [学会発表] 蛍光性ビオチンリガーゼを利用した生細胞系でのタンパク質の蛍光ラベル化技術の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二、米田佐和子、山本千裕
  • 学会等名: 日本分析化学会第60 年会
  • 発表場所: 名古屋大学東山キャンパス(愛知県)
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] ビオチンリガーゼと基質タンパク質間の相互作用を利用したアフィニティー精製技術の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 長尾亜都紗, 末田慎二
  • 学会等名: 第84回生化学会大会
  • 発表場所: 京都国際会議場(京都府)
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 蛍光性ビオチンリガーゼを利用した生細胞系でのタンパク質蛍光ラベル化技術の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二, 米田佐和子, 山本千裕
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋大学東山キャンパス(愛知県)
  • 年月日: 2011-09-16
• [学会発表] 蛍光タンパク質とビオチンリガーゼの融合体を用いた細胞内タンパク質の蛍光ラベル化技術 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山本千裕, 林秀樹, 末田慎二
  • 学会等名: 第48回化学関連支部合同九州大会
  • 発表場所: 北九州国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2011-07-09
• [学会発表] 特異なビオチン化酵素反応系を利用した生細胞内外でのタンパク質の蛍光ラベル化技術の開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二、林秀樹、米田佐和子
  • 学会等名: 日本化学会第91春季年会
  • 発表場所: 神奈川大学(神奈川県)
  • 年月日: 2011-03-27
• [学会発表] Site-specific labeling of proteins using biotin protein ligase modified with fluorescent dyes (2010)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二、林秀樹、米田佐和子
  • 学会等名: 2010 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies
  • 発表場所: Hawaii Convention Center (Honolulu)
  • 年月日: 2010-12-17
• [学会発表] Protein imaging in living cells with fluorescently labeled biotin protein ligase (2010)
  • 著者名/発表者名: 末田慎二
  • 学会等名: The Third Japan-Korea Joint Symposium on Bio-microsensing Technology
  • 発表場所: 九州工業大学(福岡県)
  • 年月日: 2010-12-03