セレノプロテイン生合成における翻訳制御機構解明

• 研究課題/領域番号: 22770093
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 尾瀬 農之 北海道大学, 大学院・薬学研究院, 准教授 (80380525)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2011年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2010年度: 3,380千円 (直接経費: 2,600千円、間接経費: 780千円)
• キーワード: 翻訳マシーナリ / RNA調製 / 蛋白質調製 / 翻訳マシーン / リボソーム

研究概要

ヒト由来SBP2, L30, EFSec, SECIS-RNA, tRNASecの調製に成功し,生化学的実験を進めてきた. L30に関して結晶構造解析及びRNAとの結合実験をおなうことができ,論文発表した.また,機能的tRNASecの調製方法を確立することができたため,アミノ酸存在下においてEFSecやSBP2との相互作用研究を進めている.野生型では等温滴定型熱量計を用いてGDPとの相互作用解析を行い, K_d=229nMでの相互作用が見られ,調製したタンパク質は正しい構造をとっていることが確認できた.また作製した変異体では,二次構造を保持していることを確認した.

研究成果

• [雑誌論文] Crystallization and preliminary X-ray structure analysis of human ribosomal protein L30e (2011)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi A, Ose T, Yao M, Tanaka I
  • 雑誌名: Acta Cryst 巻: F67 号: 12 ページ: 1516-1518
  • DOI: 10.1107/s1744309111045131
  • NAID: 120003660596
  • 査読あり
• [学会発表] Mechanistic analysis of the 21st amino acid incorporation system in eukaryotes Sapporo Symposium on Advanced (2012)
  • 著者名/発表者名: 川口亜希子,尾瀬農之,中村彰良,銚関,田中勲
  • 学会等名: Crystallography
  • 発表場所: 北海道大学(札幌市)
  • 年月日: 2012-03-17
• [学会発表] 10. Mechanistic analysis of the 21st amino acid incorporation system in eukaryotes (2012)
  • 著者名/発表者名: Akiko Kawaguchi, Toyoyuki Ose, Min Yao, Isao Tanaka
  • 学会等名: Sapporo Symposium on Advanced Protein Crystallography
  • 発表場所: 北海道大学(札幌市)
  • 年月日: 2012-03-17
• [学会発表] Structure analysis of ribosomal protein L30 to understand the interaction to SECTS 9th International Symposium on Selenium in Bilogy and Medicine (2011)
  • 著者名/発表者名: 川口亜希子,尾瀬農之,中村彰良,喜多俊介,銚関,田中勲
  • 学会等名: 国際セレン学会
  • 発表場所: 京都大学(京都市)
• [学会発表] Structure analysis of SelB in complex with SECIS mRNA from Moorella thermoacetica (2010)
  • 著者名/発表者名: Toyoyuki Ose, et.al.
  • 学会等名: 9th International Symposium on Selenium in Biology and Medicine
  • 発表場所: 京都大学(京都市)