酵素活性を指標とした有益プロバイオティクスの新規スクリーニング法の構築とその応用

• 研究課題/領域番号: 22780241
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 畜産学・草地学
• 研究機関: 宮城大学
• 研究代表者: 木下 英樹 宮城大学, 食産業学部, 助教 (50533288)
• 連携研究者: 齋藤 忠夫 (00118358) ; 石田 光晴 (40151386)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2012年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2011年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2010年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 乳酸菌 / 腸管付着性 / 付着因子 / アドヘシン / 酵素活性 / プロバイオティクス / ムチン / 熱ショックタンパク質 / GroEL / 酵素 / スクリーニング / グリセルアルデヒド-3-リン酸脱水素酵素

研究概要

本研究では、酵素活性という新たな指標の導入により高腸管付着性乳酸菌の選抜が可能かを検討した。18 時間培養のヒト腸管由来乳酸菌の全てで GAPDH 活性が見られたことから、 GAPDH は乳酸菌に普遍的に発現している可能性が示された。また、GAPDH の酵素活性と腸管付着性の間には高い正の相関があったことから GAPDH 酵素活性により高腸管付着乳酸菌が選抜可能であることが示された。さらに、多くの乳酸菌にヒートショックプロテイン、GroEL が見出されたことから GroEL も GAPDH と同様、有力な付着因子である可能性が考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Proposal of screening method for intestinal mucus adhesive lactobacilli using the enzymatic activity of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) (2013)
  • 著者名/発表者名: H. Kinoshita, S. Imoto, Y. Suda, M. Ishida, M. Watanabe, Y. Kawai, H. Kitazawa, K. Miura, A. Horii, T. Saito
  • 雑誌名: Animal Science Journal 巻: 84巻 ページ: 150-158
  • 査読あり
• [雑誌論文] Proposal of screening method for intestinal mucus adhesive lactobacilli using the enzymatic activity of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) (2013)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita H, Imoto S, Suda Y, Ishida M, Watanabe M, Kawai Y, Kitazawa H, Miura K, Horii A, Saito T.
  • 雑誌名: Anim Sci J. 巻: 84 号: 2 ページ: 150-158
  • DOI: 10.1111/j.1740-0929.2012.01054.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Adhesin-Like Protein, Lam29, from Lactobacillus mucosae ME-340 Binds to Histone H3 and Blood Group Antigensin Human Colonic Mucus、Bioscience (2012)
  • 著者名/発表者名: M. Watanabe, H.Kinoshita, IN. Huang, K. Eguchi, T. Tsurumi, Y. Kawai, H. Kitazawa, K. Kimura, N. Taketomo, D. Kikuchi, T. Sase, K. Miura, H. Ogawa, C. Shibata, A. Horii, T. Saito
  • 雑誌名: Biotechnology, and Biochemistry 巻: 76巻 ページ: 1655-1660
  • URL: http://dx.doi.org/10.1271/bbb.120150
  • 査読あり
• [雑誌論文] 有用乳酸菌の単離と腸管付着メカニズムの解明に関する研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹
  • 雑誌名: ミルクサイエンス 巻: 61巻 ページ: 217-228
  • NAID: 130003398722
  • URL: http://ci.nii.ac.jp/naid/40019556814
• [雑誌論文] An Adhesin-Like Protein, Lam29, from <i>Lactobacillus mucosae</i> ME-340 Binds to Histone H3 and Blood Group Antigens in Human Colonic Mucus (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe M, Kinoshita H, Huang IN, Eguchi K, Tsurumi T, Kawai Y, Kitazawa H, Kimura K, Taketomo N, Kikuchi D, Sase T, Miura K, Ogawa H, Shibata C, Horii A, Saito T.
  • 雑誌名: Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 巻: 76 号: 9 ページ: 1655-1660
  • DOI: 10.1271/bbb.120150
  • NAID: 130004137955
  • ISSN: 0916-8451, 1347-6947
  • 査読あり
• [雑誌論文] MRS寒天培地と変法LBS寒天培地における乳酸菌の選択的単離能の比較 (2011)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹,井本瞬,須田義人,石田光晴
  • 巻: 60巻
  • ページ: 171-176
  • NAID: 130003398707
  • URL: http://ci.nii.ac.jp/naid/40019173279
  • 査読あり
• [雑誌論文] MRS寒天培地と変法LBS寒天培地における乳酸菌の選択的単離能の比較 (2011)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹, 井本瞬, 須田義人, 石田光晴
  • 雑誌名: ミルクサイエンス誌 巻: 60 ページ: 171-176
  • NAID: 130003398707
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a new adhesin-like protein from Lactobacillus mucosae ME-340 with specific affinity to the human blood group A and B antigens (2010)
  • 著者名/発表者名: M. Watanabe, H. Kinoshita, M. Nitta, R. Yukishita, Y. Kawai, K. Kimura, N. Taketomo, Y. Yamazaki, Y. Tateno, K. Miura, A. Horii, H. Kitazawa and T. Saito
  • 雑誌名: Journal of applied Microbiology 巻: 109巻 号: 3 ページ: 927-935
  • DOI: 10.1111/j.1365-2672.2010.04719.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] プロバイオティック乳酸菌の酵素活性を有する腸管付着因子とその腸管付着メカニズム (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹
  • 雑誌名: 宮城大学食産業学部紀要 巻: 4巻 ページ: 45-50
  • NAID: 120006015011
  • URL: http://ci.nii.ac.jp/naid/40017144924
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a new adhesin-like protein from Lactobacillus mucosae ME-340 with specific affinity to the human blood group A and B antigens (2010)
  • 著者名/発表者名: M.Watanabe, H.Kinoshita, et al
  • 雑誌名: Journal of Applied Microbiology 巻: 109 ページ: 927-935
  • 査読あり
• [学会発表] Lactobacillus mucosae由来アドへシン様タンパク質(Lam29)の新規ヒト大腸粘液由来結合因子の探索および同定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡辺真通, 木下英樹,川井泰,北澤春樹,三浦康,柴田近,堀井明,木村勝紀,竹友直生,齋藤忠夫
  • 学会等名: 日本畜産学会第115回大会
  • 発表場所: 名古屋(名古屋大学東山キャンパス)
  • 年月日: 2012-03-28
• [学会発表] Lactobacillus mucosae由来アドヘシン様タンパク質(Lam29)の新規ヒト大腸粘液由来結合因子の探索および同定 (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡辺真通、木下英樹, ら
  • 学会等名: 日本畜産学会第115回大会
  • 発表場所: 名古屋大学
  • 年月日: 2012-03-28
• [学会発表] Discovery of a new adhesin-like protein from Lactobacillus mucosae ME-340 with binding activity to human blood group A and B antigens (2010)
  • 著者名/発表者名: M. Watanabe, H. Kinoshita, M. Nitta, R. Yukishita, M. Haruta, K. Eguchi, Y. Kawai, K. Kimura, N. Taketomo, K. Miura, A. Horii, H. Kitazawa, T. Saito
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress (AAAP2010)
  • 発表場所: National Pingtung University of Science and Technology、台湾
  • 年月日: 2010-08-27
• [学会発表] Search for new Bifidobacterium adhesins with specific binding activity to human colonic mucin (2010)
  • 著者名/発表者名: R. Yukishita, M. Watanabe, M. Nitta, H. Kinoshita, Y. Kawai, K. Miura, A. Horii, J. Z. Xiao, T. Yaeshima, K. Iwatsuki, H. Kitazawa, T. Saito
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress (AAAP2010)
  • 発表場所: National Pingtung University of Science and Technology、台湾
  • 年月日: 2010-08-27
• [学会発表] Discovery of a new adhesin-like protein from Lactobacillus mucosae ME-340 with binding activity to human blood group A and B antigens (2010)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Kinoshita, et al
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress
  • 発表場所: 台湾(屏東科学技術大学)
  • 年月日: 2010-08-27
• [学会発表] Search for new Bifidobacterium adhesins with specific binding activity to human colonic mucin (2010)
  • 著者名/発表者名: Yukishita, Kinoshita, et al
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress
  • 発表場所: 台湾(屏東科学技術大学)
  • 年月日: 2010-08-27
• [学会発表] A new method to screen for lactobacilli adhesive to human colonic mucin (2010)
  • 著者名/発表者名: H. Kinoshita, S. Imoto, Y. Suda, M. Ishida, M. Watanabe, M. Nitta, R. Yukishita, Y. Kawai, H. Kitazawa, K. Miura, A. Horii, T. Saito
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress (AAAP2010)
  • 発表場所: National Pingtung University of Science and Technology、台湾
  • 年月日: 2010-08-24
• [学会発表] A new method to screen for lactobacilli adhesive to human colonic mucin (2010)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita, et al
  • 学会等名: The 14th AAAP Animal Science Congress
  • 発表場所: 台湾(屏東科学技術大学)
  • 年月日: 2010-08-24
• [学会発表] GAPDH 酵素活性を指標とした腸管付着性乳酸菌の新規スクリーニング法の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹 ,井本瞬, 須田義人,石田光晴,三浦康,堀井明,渡辺真通,新田将光,雪下玲奈, 川井泰,北澤春樹,齋藤忠夫
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会 2010 年度大会
  • 発表場所: 仙台(フォレスト仙台)
  • 年月日: 2010-07-27
• [学会発表] GAPDH酵素活性を指標とした腸管付着性乳酸菌の新規スクリーニング法の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下, ら
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会2010年度大会
  • 発表場所: フォレスト仙台
  • 年月日: 2010-07-27
• [学会発表] ヒト ABO 式血液型抗原を介したプロバイオティック乳酸菌の腸管付着性機構に関する研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡辺真通,新田将光,雪下玲奈,春田美由樹,江口慧,川井泰,北澤春樹,齋藤忠夫,木下英樹,三浦康,堀井明,木村勝紀,竹友直生
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会 2010 年度大会
  • 発表場所: 仙台(フォレスト仙台)
  • 年月日: 2010-07-26
• [学会発表] ビフィズス菌の新規ヒト腸管付着性因子(アドヘシン)の探索と付着機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 雪下玲奈,渡辺真通,新田将光,木下英樹,川井泰,北澤春樹,三浦康,堀井明,清水(肖)金忠,八重島智子,岩附慧二,齋藤忠夫
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会 2010 年度大会
  • 発表場所: 仙台(フォレスト仙台)
  • 年月日: 2010-07-26
• [学会発表] ヒトABO式血液型抗原を介したプロバイオティック乳酸菌の腸管付着性機構に関する研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 渡辺、木下, ら
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会2010年度大会
  • 発表場所: フォレスト仙台
  • 年月日: 2010-07-26
• [学会発表] ビフィズス菌の新規ヒト腸管付着性因子(アドヘシン)の探索と付着機構の解明 (2010)
  • 著者名/発表者名: 雪下、木下, ら
  • 学会等名: 日本乳酸菌学会2010年度大会
  • 発表場所: フォレスト仙台
  • 年月日: 2010-07-26
• [図書] 乳酸菌とビフィズス菌のサイエンス (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下英樹、齋藤忠夫
  • 出版者: 京都大学学術出版会
• [図書] 乳酸菌とビフィズス菌のサイエンス (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下, ら
  • 総ページ数: 668
  • 出版者: 京都大学学術出版会
• [備考]
  • URL: http://www.myu-syoku.jp/university/faculty/Introduction/index/introductionID/51