研究課題/領域番号 |
22K05369
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分38010:植物栄養学および土壌学関連
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研究機関 | 宮崎大学 |
研究代表者 |
佐伯 雄一 宮崎大学, 農学部, 教授 (50295200)
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研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2024年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
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キーワード | 温帯 / 熱帯 / 亜熱帯 / ダイズ根粒菌 / 水田転換畑 / 土着根粒菌 / 環境傾度 / 群集構造 / 気候変動 |
研究開始時の研究の概要 |
土壌中の根粒菌生態に関しては、有効な解析手法がなかったことから不明な点が多く、根粒菌生態を利用した共生窒素固定の有効活用のための大きな課題となっていた。近年、筆者は次世代シークエンス(NGS)を活用した群集構造解析法を考案した。この技術を活用し、多様な気候下における土着根粒菌群集構造とダイズ感染根粒菌群集構造を比較解析することは、植物-微生物共生系、および温暖化の最中にある農業にとって重要な知見となる。本研究では、日本、アメリカ東部、フィリピンの土壌を解析対象とし、土着根粒菌群集構造と感染根粒菌群集構造を、分子・数理生態学的に比較解析し、気候変動に対応した根粒菌の農業利用のための知見とする。
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研究実績の概要 |
本研究は、温帯、亜熱帯、熱帯土壌のダイズ根粒菌群集構造を解析し、優占化メカニズムを明らかにすることを目的に行う。本年度は研究初年度であるため、研究室保冷庫で長期保管していたアメリカ土壌とフィリピン土壌の群集構造に変化がないか、確認を行った。まず無菌ポットに土壌を埋設して滅菌ダイズ種子を播種し4週間栽培した。それと並行して、北海道の普通畑、宮崎の普通畑と水田、沖縄普通畑の土壌、およびフィリピンCentral Luzon State Univ.(CLSU)の普通畑と水田の土壌を新たに採取し、同様にダイズの栽培を行った。使用したダイズにはRj遺伝子型の異なるBragg, CNS, Hillを用いた。着生した根粒からDNAを抽出し、鋳型として16S-23SrRNAgeneITS領域のBradyrhizbiumに特異的なプライマーを用いてPCR増幅を行った。得られた増副産物をアンプリコンシークエンス解析に供した。 その結果、得られたリードのほとんどがBradyrhizobium属のシークエンスであった。また、4℃で長期保存した土壌から得られた根粒菌において、B. japonicumやB. diazoefficiensは検出されたものの温暖な地域に優占しているB. elkaniiはほとんど検出されなかった。この傾向は保存期間が長くなるほど顕著であった。この結果は、今後の研究には新たに採取した土壌を使用して研究をすすめることを強く示唆した。そこで新たに採取した土壌から得られた根粒菌群集構造と土壌の理化学性や緯度などの環境因子との関連性を多次元尺度構成法によって解析した。その結果、緯度の差や水田土壌に代表される酸化還元の差が最も大きく根粒菌の群集構造に影響を及ぼすことが示唆された。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今年度の研究結果から、少なくともB. elkanii が土着化している土壌の長期保存は研究試料としては不適であることが分かった。今回、長期保存土壌と新たに採取した土壌を同時期に解析に供したことが今後の研究の方向性を決める機会となった。 現在のところ順調に進展していると判断する。
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今後の研究の推進方策 |
本研究では気候帯の違いによる根粒菌群集構造を次世代シークエンサーによるアンプリコンシークエンスで解析する。したがって新鮮な土壌を用いて、日本とフィリピンの緯度の違いによる根粒菌群集構造の違いについて解析を進めていく。
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