| 研究課題/領域番号 |
22K06002
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分42020:獣医学関連
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
柳田 哲矢 山口大学, 共同獣医学部, 准教授 (40431837)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2024年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2023年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
2022年度: 520千円 (直接経費: 400千円、間接経費: 120千円)
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| キーワード | 微胞子虫 / メダカ / 寄生虫 / 観賞魚 / 実験動物 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、国内で初めて確認された微胞子虫 P. hyphessobryconis のメダカへの病害性を明らかにするとともに、本微胞子虫が国内で流通する観賞魚に与える影響を推定する。本微胞子虫は、国外では観賞魚と実験動物の死亡原因として重要視されており、もし国内でも流行すれば大きな問題となることが予想される。しかしながら、国内では観賞魚や実験動物の微胞子虫症についての調査・研究はほとんど行われていない。本研究により、これまで国内では軽視されてきた観賞魚や実験動物の微胞子虫症に関する研究が進展すると考える。
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| 研究実績の概要 |
本研究では、申請者らにより国内で初めてメダカから確認された微胞子虫Pleistophora hyphessobryconisについて、1）メダカへの病害性、2）その他の観賞魚（コイ、キンギョなど）への病原性の有無と病害性、3）国内のメダカにおける本微胞子虫の蔓延状況を明らかにすることを目的としている。
これまでの調査により、新たに4例のメダカにおける感染を確認した。これらはいずれも由来が異なり、1例は実験動物として飼育されていた個体、2例は観賞魚として生産された個体、1例は野生個体であり、本微胞子虫が国内に広く蔓延している可能性が示された。このうち2例についてリボソームDNAの一部塩基配列を決定した結果、いずれも国内初症例のものと100％一致した。この結果は、本微胞子虫が単一の起源から急速に拡散していることを示唆している。そこで、本微胞子虫の蔓延状況を確認するため、特異的なPCR法の開発を試みた。リボソームDNAの配列をターゲットとしたプライマーを作成し、胞子1個まで検出できる感度の高いPCR検査法を確立した。
メダカへの病害性を明らかにするため、感染実験を実施した。感染メダカから得た胞子の懸濁液に未感染の成魚あるいは稚魚を浸漬した。その結果、成魚では感染率は低く、稚魚でより感染率が高いという結果が得られた。また、コイ稚魚に対して胞子懸濁液を筋肉注射した結果、コイの筋肉内でも微胞子虫が増殖し、胞子形成を行うことが示された。以上の結果から、本微胞子虫がメダカならびにコイへ与える影響について検証する実験手法を確立できた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究の目的である1）メダカへの病害性、2）その他の観賞魚（コイ、キンギョなど）への病原性の有無と病害性を検証するための感染実験系は概ね確立された。また、3）国内のメダカにおける本微胞子虫の蔓延状況を明らかにするためのPCR検査法を確立し、新たに4例のメダカ感染例を確認した。以上の成果から、おおむね順調に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度までに確立したPCR法を用いて、観賞魚としてのメダカ生産施設と野生個体群における本微胞子虫の蔓延状況を調査する。得られた症例については遺伝子解析を実施し、これまでの症例と比較することで本微胞子虫の起源について考察する。
また、メダカ成魚と稚魚に対する感染実験を実施し、病害性を検証する。さらに、コイとキンギョに対する感染実験も実施し、病原性の有無と病害性を検証する。
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